作者：王跃民 谢安 臧益民 朱妙章
【关键词】 脑缺血
关键词: 脑缺血;诱发电位;动物疾病模型
摘 要:目的 制成鼠大脑局部缺血模型. 方法 采用左侧颈动脉离心端插管，灌注一定压力和流量的生理盐水. 结果 ①美蓝染色显示大脑左侧大部分区域被染蓝，除皮层着色较浅外，其余部位着色较深.②体感诱发电位在灌注后30min时，其幅度超过灌注前20%. 结论 染色说明大脑左侧为缺血区，体感诱发电位幅度的增高，表明大脑处于兴奋性损伤状态.证实了此方法制成的大脑局部缺血可靠，且省时省力简便易行.
Keywords:cerebral ischemia;evoked potential;animal dis-ease models
Abstract:AIM To make a new focal cerebral ischemia mod-el of rats.METHODS By perfusing normal saline from the catheter inserted in the left common carotid artery with cer-tain pressure and flow.RESULTS Methylene blue staining showed that most areas in left cerebrum became dark blue ex-cept that cortex became slight blue.30min after infusion，the amplitude of somato sensory evoked potential（SEP）in-creases by more than20%.CONCLUSION Staining indi-cates that left cerebrum becomes ischemia.The augment of SEP amplitude says that cerebrum is in excitotoxic injury state.It has been proved that this regional cerebral ischemia model is reliable and easy to carry out.
0 引言
大脑局部缺血在基础和临床研究领域愈加受到重视，20世纪90年代以来，在大脑局部缺血和模型研究方面报道较多，其缺血模型大致有如下几种:①堵塞大脑中动脉:采用一较细的尼龙绳，尖端带热诱发气囊，经颈动脉插入大脑中动脉，在血液温度的诱发下而膨胀，堵塞大脑中动脉［1］ .这种方法在技术和材料上都有很高的要求，实验中困难较大.②增加颅内压使颅内血管阻力增大导致脑缺血［2］ ，采用38℃下人工脑脊液经脑穿刺至脑室注射，使颅内压升高0.8kPa致使脑缺血.此方法对大脑损伤较大，且脑室内压不易控制，成功率较低.③漂浮导管法［3］ ，技术难度高，缺血程度不易掌握.④结扎大脑中动脉［4-6］ ，经眼眶结扎大脑中动脉，此方法损伤较大，出血多.此外还有栓塞法、电解法等都易造成脑组织的损伤.我们的实验模型采用颈动脉灌流的方法，引起大脑局部缺血，实验证明其方法可靠、简便，易被采纳.
1 材料和方法
1.1 动物和麻醉 SD大鼠20只，由本校实验动物中心提供，体质量为200～350g，雌雄不拘，戊巴比妥钠（35mg・kg-1 ，iP）麻醉，待麻醉稳定后行气管插管.
1.2 插管和灌流 分离左侧颈动脉1～1.5cm，结扎近心端，离心端剪斜口并插管，插管的后段接硅胶管与灌流泵相连，灌注生理盐水，灌注压为14kPa，灌流量0.2mL・min-1 ，灌流液温度为37℃，环境温度为27℃左右.通过调节灌流泵的流量以控制大脑缺血的程度及范围.
1.3 实验分组 将10只SD大鼠灌注生理盐水30min后，从三通管注射美蓝，处死后取出大脑，观察美蓝染色的部位和范围;另10只SD大鼠则用于观察在正常情况下灌注生理盐水30min时以及停止灌注30min时，依靠侧支循环改善或减轻缺血程度，观察体感诱发电位的变化.体感诱发电位引导的方法和指标为:在大鼠颈动脉插管后，用立体定向仪固定，沿正中线切开头皮，在离冠状缝与矢状缝2mm处对称打两个直径约1mm的小孔，将银球电极放入小孔内引导和记录体感诱发电位（SFP）.采样频率为3022Hz，刺激电极放在对侧下肢，刺激强度为4.0mA，波宽为50μs，频率为2.1Hz.
2 结果
2.1 SEP的变化 灌注生理盐水30min时，SEP有明显的变化，其幅度超过正常SEP的20%.而停止灌注30min时，SEP与灌注30min时的SEP基本相同（Fig1）.
2.2 缺血区染蓝情况 灌注美蓝后，取出大脑并做冠状切片发现，左侧大脑大部分区域被染蓝，大脑皮层部分着色稍浅，
其余部分着色较深.右侧大脑几乎无着色（Fig2）.
3 讨论
由Fig2显示，左侧大脑皮层着色较浅，说明该区域的缺血程度较轻或侧支循环较丰富.而其他区域着色较深，显示该区域的缺血程度较重、侧支循环少，组织损伤重.由Fig1显示诱发电位的变化，诱发电位是指感觉传入系统受到刺激时，在中枢神经系统内引起的电位变化.为了便于观察SEP，采用叠加的方法对SEP进行放大，同时又低消了脑电波的影响.图中显示灌注30min时的SEP比正常下SEP的幅度增加20%，表明大脑处于兴奋性损伤状态，从美蓝染色上不难看出，大脑皮层着色较浅，说明其缺血程度较轻，不致于在短时间内造成组织的坏死，而SEP的这些变化正说明了SEP能较敏感地反映脑兴奋性损伤.
图2 略
综上所述，采用颈动脉灌流的方法导致局部脑缺血的模型，其方法可靠且有以下优点:①损伤小、出血少、手术创伤仅限于颈部;②可以通过调节灌流量或灌注压可导致不同程度的局部脑缺血;③由于在脑部无机械性损伤，减少了由于创伤对实验结果造成的影响因素，从而提高了在局部脑缺血研究方面的可靠性;④方法简便易行，省时省力易被采用.至于造成不同程度局部定量脑缺血模型，应采用较大动物比较合适.
参考文献
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