慢性阻塞性肺病患者的细胞免疫及细胞因子水平变化

　　　　 作者：孙雯雯 李燕芹 刘斌 秦惠 徐佳波 邹静

【摘要】 目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者细胞免疫功能和白介素(IL)6，IL8、肿瘤坏死因子(TNF)α的变化及其与肺功能参数的关系。方法 以30名COPD患者为研究对象，30名健康志愿者为对照组，测定血清T细胞亚群，自然杀伤细胞(NK)细胞水平及治疗前后血清IL6、IL8、TNFα水平，并与第1秒用力呼气容积(FEV1)做相关分析。结果 COPD组急性发作期血清CD3+、Th(CD3+CD4+)、Th/Ts ，NK细胞水平均低于健康对照组，差异有统计学意义(P&<0.01)，Ts(CD3+CD8+)在各组间均无统计学差异，血清T细胞亚群水平、 NK细胞水平与FEV1无明显相关(P&>0.05);COPD患者治疗前后血清IL6、IL8及TNFα水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P&<0.01)，且治疗前血清IL6、IL8及TNFα水平又高于治疗后，差异有统计学意义(P&<0.05)。COPD急性发作期血清IL8、IL6、TNFα与FEV1呈负相关(r=-0.72，P&<0.05;r=-0.74，P&<0.05;r=-0.75，P&<0.05);COPD急性发作期血清IL6、IL8水平与TNFα水平呈正相关(r=0.60，P&<0.05;r=0.65，P&<0.05)。结论 COPD急性发作期细胞免疫功能显著降低，存在T细胞亚群失衡和NK细胞水平下降;血清中IL6、IL8、TNFα过度分泌，这些变化在COPD的发展过程中起着重要的作用，可作为监测病情、观察疗效的重要指标。

【关键词】 慢性阻塞性肺疾病;T淋巴细胞亚群;FEV1;白介素6;白介素8;肿瘤坏死因子α;NK细胞

　 慢性阻塞性肺疾病(COPD)不仅影响肺，而且存在显著的全身炎症反应〔1〕。长期慢性炎症刺激可导致患者免疫功能改变。淋巴细胞亚群是反映机体细胞免疫功能的重要指标，在COPD发病中有着重要作用〔2～6〕，作为重要炎症因子和免疫介导因子的肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)6、8可能与 COPD的发生发展过程有关〔7～10〕。本研究通过观察 COPD患者细胞免疫功能和血清IL、TNFα水平的变化，探讨机体细胞免疫和血清细胞因子的变化在COPD病程中的作用和临床意义。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象 COPD组30 例，男18例，女12例，年龄52～75〔平均(65.25±7.82)〕岁，为本院呼吸科2007年8月至2008年3月住院病人。COPD的诊断符合2007年中华医学会关于《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》的诊断标准 。排除其他肺部疾病、其他部位的慢性炎症、肿瘤、结缔组织病、心力衰竭、糖尿病等消耗性疾病。近1个月内未用过免疫抑制剂、激素等影响免疫状态的药物。健康对照组30例，男16例，女14例，年龄55～72〔平均(63.32±6.58)〕岁。均无明显过敏疾病史。两组均签署知情同意书，健康对照组经病史询问、体格检查、相关辅助检查、肺通气功能测定均未发现异常。

　　1.2 血清标本采集及IL6、IL8及TNFα检测 患者入院48 h内抽取清晨空腹静脉血2 ml，乙二胺四乙酸二钠(EDTA)抗凝，应用美国BD型流式细胞仪检测T细胞亚群水平;入院48 h内及病情稳定出院前抽取静脉血6 ml，注入试管中，离心吸取血清，-70℃低温保存备统一检测。ELISA法检测血清IL6、IL8、TNFα。标本处理、测定步骤和含量计算严格按试剂盒说明书的操作规程进行。

　　1.3 肺功能测定 采用比利时生产的Medisoft肺功能仪进行肺功能指标的测定，测定第一秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)和FEV1/FVC。

　　1.4 统计学分析 计量资料数据采用x±s表示。采用SPSS11.5统计软件包进行分析。组间比较采用t检验，相关性检验采用直线相关分析。

　　2 结 果

　　2.1 两组外周血T细胞亚群比较 COPD组CD3+、Th(CD3+CD4+)、Th/Ts，自然杀伤(NK)细胞水平均低于健康对照组，差异有统计学意义(P&<0.01);Ts(CD3+CD8+)与健康对照组相比差异无统计学意义(P&>0.05);COPD急性加重期血清CD3+、Th(CD3+CD4+)、Ts(CD3+CD8+)、NK细胞水平与FEV1均无明显相关(分别r=0.24，0.16，0.21，0.21，均P&>0.05)。见表1。

　　2.2 两组IL6、IL8和TNFα比较 COPD组急性加重入院时及治疗稳定后血清IL8、IL6和TNFα水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P&<0.05);急性加重入院时明显高于治疗稳定后，差异有统计学意义(P&<0.05);急性加重入院时IL6、TNFα，IL8与FEV1之间存在负相关(分别为r=-0.75，-0.72，-0.74，均P&<0.05); COPD急性加重入院时IL6，IL8水平与TNFα水平呈正相关(分别r=0.60，0.68，均P&<0.05)。见表2。表1 COPD组与健康对照组外周血T细胞亚群比较表2 COPD与健康对照组IL8，IL6和TNFα水平比较(x±s，n=30，pg/ml)与健康对照组比较：1)P&<0.05;与其他两组比较：2)P&<0.05

　　3 讨 论

　　T细胞亚群的分布，特别是Th与Ts的比值是反映免疫内环境是否稳定的一个最重要指标。机体维持正常的免疫功能状态有赖于T细胞亚群维持一定的比例，尤其是CD4+/CD8+比值相对稳定。该值降低是机体免疫功能下降的重要标志，下降程度与疾病严重程度和预后不良密切相关。CD4+能辅助IgG、IgA、IgM合成，CD4+细胞减少导致产生淋巴因子协助B细胞产生抗体和辅助其他淋巴细胞的功能减弱。CD8 +能抑制B 细胞产生抗体。CD4+和CD8+之间相互诱导和制约形成了T 细胞网络，对于调节细胞免疫反应和维持免疫平衡具有重要作用。因此通过测定T细胞亚群可进一步了解COPD病人的细胞免疫功能，同时，又可以借助上述指标对COPD病人细胞免疫功能进行评估，指导临床应用改善细胞免疫功能的药物。

　　本文结果显示COPD急性发作期CD3+、Th(CD3+CD4+)均较正常对照组明显下降，CD3+的下降表明外周血中成熟T细胞总数下降，提示COPD患者细胞免疫功能降低。从CD3+、Th(CD3+CD4+)的数值看，CD3+的下降主要是由于Th(CD3+CD4+)的下降引起的，Th(CD3+CD4+)下降可导致单核吞噬细胞和NK细胞活性降低，同时还可引起表面带有 IgA的B淋巴细胞不能分化为分泌IgA的浆细胞，导致分泌型IgA(sIgA)减少而易致反复的呼吸道感染，使病程迁延。

　　NK细胞不需特异抗原刺激，复合物和靶细胞表面结构均可直接诱发NK细胞的免疫反应。实验结果显示COPD患者急性期与健康组比较NK百分率明显降低，说明体内NK细胞介导的细胞免疫功能降低，对外来抗原免疫应答能力减弱，免疫监视功能低下、免疫机能不全，使疾病预后不佳。

　　研究认为COPD不仅侵犯肺，而是一全身性疾病，呼吸道炎症是诱发COPD急性发作最主要的原因〔1〕。当呼吸道受到病毒或细菌感染时，它们所含的某些抗原成分或代谢产物如脂多糖、内毒素可以激活局部肺泡巨噬细胞产生TNFα、IL1等炎性因子，这些炎性因子继而又可促进肺泡巨噬细胞和支气管上皮细胞产生 Il6、IL8。局部产生的细胞因子吸收入血以及内毒素引起体内单核巨噬细胞广泛的激活，可导致血中TNFα、IL6、IL8升高。本研究显示，COPD急性发作期及治疗缓解后血清lL6、IL8、TNFα水平均高于健康对照组，这表明COPD患者存在IL6、IL8、TNFα的过量产生，上述炎性介质不仅可引起支气管肺的局部病变，同时也是引发COPD肺外表现和病情持续进展的主要因素。同时IL6、IL8、TNFα与FEV1呈负相关，提示IL6、IL8、TNFα与肺功能损害的严重程度相关，测定血清IL8，IL6，TNFα水平对于监测COPD病情、观察疗效具有一定的临床价值〔9，10〕。

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