MCP1和VEGF在卵巢癌中的表达及临床意义

　　　　作者：张巍 孙迎春 陈萍 梅庆步 纪慧 郑立红

【摘要】 目的 探讨卵巢癌(OCa)及正常卵巢组织单核细胞趋化蛋白(MCP)1和血管内皮生长因子(VEGF)表达及临床意义。方法 采用免疫组化法检测OCa组织及OCa盆腔腹膜转移灶、上皮性良性肿瘤及卵巢良性疾病组织MCP1、VEGF表达，分析其与OCa生物学特征间关系。结果 MCP1在OCa及转移灶阳性率明显高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤(P&<0.05);VEGF在OCa中阳性率明显高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤 (P&<0.05)。结论 MCP1及VEGF在OCa中表达明显上调，与OCa血管生成及浸润、转移有关，可能在OCa发生发展中起重要作用。

【关键词】 卵巢癌;单核细胞趋化蛋白1;血管内皮生长因子

单核细胞趋化蛋白1(MCP1)通过促进巨噬细胞的聚集对肿瘤的生长和转移有促进作用〔1〕。研究表明肿瘤组织过度表达MCP1引起的单核细胞浸润促进血管内皮生长因子(VEGF) 的表达并促进肿瘤组织血管生长，VEGF能增加新生血管的通透性，协助癌细胞进入血液并转移到其他组织，促使肿瘤发生转移〔2，3〕。本研究采用免疫组化方法检测MCP1和VEGF蛋白在卵巢癌(OCa)组织中的表达，探讨其与OCa临床病理特征的关系，为MCP1和VEGF用于临床治疗和病理学诊断提供实验依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 标本采集 收集齐齐哈尔医学院附属医院2000～2008年OCa组织及OCa盆腔腹膜转移灶实施根治手术标本45例、上皮性良性肿瘤组17例、卵巢良性疾病组织20例。术前均未接受化疗，患者年龄35～72岁，平均54岁，临床资料完整，随访确切，石蜡标本保存。

　　1.2 免疫组化法 每例标本4 μm厚切片，其中1张做HE染色，其余做免疫组化染色，染色采用SP法。试剂MCP1、VEGF均为鼠单克隆抗体，二抗为生物素化兔抗鼠IgG，以上试剂购自福州迈新生物技术公司，具体按常规SP法操作，用PBS代替一抗作空白对照。

　　1.3 免疫组化评定 阳性反应为黄至棕黄色颗粒，MCP1、VEGF定位细胞质，以细胞数&>10%为阳性标准，阳性强度分级：细胞数10%～25%(+)，26%～50%()，&>50%()。

　　1.4 统计学分析 用SPSS10.0统计软件行χ2检验。

　　2 结 果

　　2.1 MCP1和VEGF蛋白在不同卵巢组织中的表达 OCa组MCP1阳性表达位于癌细胞的细胞质中，呈弥漫棕黄色颗粒，在正常卵巢组织中多呈阴性表达。OCa组MCP1的表达阳性率为66.67%(30/45)，显著高于上皮性良性肿瘤组织(0/17)及卵巢良性组织(0/20)(P&<0.05);VEGF的表达阳性率为77.78%(35/45)，显著高于上皮性良性肿瘤组织17.65%(3/17)及卵巢良性组织25%(5/20)(P&<0.05)。

　　2.2 MCP1和VEGF蛋白表达与OCa患者临床病理特征的关系 MCP1在OCa患者中的表达与临床分期及年龄不相关(P&>0.05)，在低分化、有淋巴结转移者中的表达均明显高于肿瘤高或中分化、无淋巴结转移者(P&<0.05)。VEGF蛋白在OCa患者中的表达与患者的临床分期、病理分级及年龄无关(P&>0.05)，与淋巴结转移相关(P&<0.05)。见表1。

　　2.3 MCP1和VEGF蛋白在OCa中表达的关系 OCa组织中MCP1和VEGF蛋白共阳性表达25例，共阴性表达者8例，MCP1阳性而VEGF阴性5例，35例VEGF阳性中MCP1阴性7例。通过相关性分析，OCa组织中MCP1和VEGF蛋白表达呈正相关(P=0.009 7)。表1 OCa中MCP1、VEGF阳性表达与临床病理特征的关系

　

　3 讨 论

　　在炎症、肿瘤、自身免疫病、变态反应、血管生成、AIDS等病毒感染中均有趋化因子及其受体参与〔3〕。肿瘤发生主要是由于细胞恶性转化引起的。与大多数肿瘤有关的巨噬细胞均起源于外周血单核细胞，它在趋化因子作用下，将单核细胞聚集到肿瘤部位分化成巨噬细胞，造成大面积浸润，释放多种调控因子、酶等物质，从而影响肿瘤细胞恶性增殖。MCP1是趋化因子CC亚家族中的一员，由76个氨基酸组成，是一种可趋化和激活单核细胞、T淋巴细胞和NK细胞等多种免疫细胞的细胞因子。MCP1可由多种细胞分泌，如单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞等。在多种人类肿瘤中亦可见MCP1基因扩增和蛋白高表达。有研究通过检测OCa患者血清MCP1水平发现原发性和复发性OCa患者血清MCP1水平明显高于良性卵巢肿瘤患者和正常健康妇女，而原发性OCa患者血清MCP1水平又明显高于复发性OCa患者〔4〕。本研究显示OCa中MCP1蛋白阳性率明显高于正常卵巢组织和上皮性良性肿瘤组织，MCP1蛋白表达随OCa病理分期的增高而上升，有淋巴结转移组织中MCP1蛋白阳性率明显高于无转移组织，提示MCP1可能参与促进卵巢侵袭和转移。

　　VEGF首先从肿瘤细胞的分泌物中分离出来，但现已证实VEGF及其家族成员不仅在肿瘤血管生成，在其他生理和病理血管生成中都是必不可少的诱导因子。因此，VEGF作为重要的血管生成因子在各种实体肿瘤发生中起重要作用，通过抑制VEGF调节血管生成作用，抑制肿瘤及其他以病理性血管生成为特征的疾病，已成为一种有效的治疗方法〔5〕。VEGF是参与调控血管生成最重要的血管生长因子，它在组织中的表达反映了该组织血管生成活性。本研究表明OCa中VEGF蛋白阳性率明显高于正常卵巢组织和纤维腺瘤组织，有淋巴结转移组织中VEGF蛋白阳性率明显高于无转移组织。OCa患者VEGF表达增强使卵巢组织血管渗透性增加，可以诱导卵巢肿瘤血管生成，肿瘤组织获得血供进一步侵袭、发展，病灶不断扩大。

　　MCP1可促进局部组织细胞表达VEGF并诱导血管生成，但仅限于动物实验或肿瘤组织中。本实验中MCP1与VEGF表达呈正相关，即两者呈同向表达，表明MCP1在OCa发生过程中也起重要作用，但是否通过调节VEGF表达间接发挥促血管生成作用，需深入研究。总之，MCP1和VEGF的异常表达在OCa淋巴结转移中有重要作用，联合检测MCP1和VEGF蛋白表达可能对OCa患者临床治疗和病理诊断有帮助。

参考文献

　1 Houghton J，Wang TC.Helicobacter pylori and gastric cancer：a new paradigm for inflammation associated epithelial cancers〔J〕.Gastroenterology，2005;128 (6)：156778.

　　2 Singh S，Sadanandam A，Singh RK.Chemokines in tumor angiogenesis and metastasis〔J〕.Cancer Metastasis Rev，2007;26 (324)：45367.

　　3 Koga M，Kai H，Egami K，et al.Mutant MCP1 therapy inhibits tumor angiogenesis and growth of malignant melanoma in mice〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2008;365(2)：27984.

　　4 Aqarwal A，Makker K，Sharma R.Clinical relevance of oxidative stress in male factor infertility: an update〔J〕. Am J Repord Immunol，2008;59(1):211.

　　5 Shinkaruk S，Bayle M，Lain G，et al.Vascular endothelial cell growth factor (VEGF)，an emerging target for cancer chemotherapy〔J〕.Curr Med Chem Anti Canc Agents，2003;3(2)：95117.