【摘要】 ：目的 研究疏风饮抗I型超敏反应的作用机制。方法 应用卵白蛋白造成I型超敏反应动物模型，采用ELISA法测定疏风饮对大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及免疫球蛋白E(IgE)含量的影响。结果 疏风饮可增加模型大鼠血清IFN-γ含量(P&<0.05)，降低模型大鼠血清IL-4、IgE含量(P&<0.01)。疏风饮组和扑尔敏组比较无显著差异(P&>0.05)；疏风饮组IFN-γ/IL-4高于模型组，有显著差异(P&<0.05)，而和扑尔敏组比较无显著差异(P&>0.05)。结论 疏风饮防治皮肤I型超敏反应性疾病(急性荨麻疹)的作用机制可能与其通过对某些细胞因子的调节，对机体内Th1/Th3平衡产生影响有关。
【关键词】 疏风饮 I型超敏反应 白细胞介素-4 干扰素-γ 免疫球蛋白E 大鼠
Abstract：Objective To investigate the effects and mechanism of Shufeng Decoction resisting type I hypersensitivity. Methods Type I hypersensitivity was induced by OVA. The content of IL-4， IFN-γ and IgE in serum of the rats treated by Shufeng Decoction were determined by ELISA. Results Shufeng Decoction can increase the content of IFN-γ in model rats (P&<0.05)， and decrease the content of IL-4 and IgE (P&<0.01)， there was no significant difference between Shufeng Decoction group and chlorpheniramine group (P&>0.05). IFN-γ/IL-4 of Shufeng Decoction was significant higher than model group (P&<0.05)， and there was no significant difference compared with chlorpheniramine group (P&>0.05). Conclusion The effects and mechanism of Shufeng Decoction on prophylaxis and treatment of type I hypersensitivity of skin (acute urticaria) may be related with regulating cell factors and influencing the balance of Th1/Th3.
Key words：Shufeng Decoction；type I hypersensitivity；IL-4；IFN-γ；IgE；rat
急性荨麻疹是临床上常见的、多发的皮肤Ⅰ型超敏反应，常反复发作。疏风饮是经多年临床经验配制的验方，在急性荨麻疹的治疗中已显示出较好的疗效。为了阐明其作用机制，我们进行了实验研究。现将结果报道如下。
1 实验材料
1.1 动物
Wistar大鼠，体重200～220 g，雄雌各半，购自辽宁中医药大学实验动物中心。
1.2 药物与试剂
疏风饮组成：荆芥穗、防风、牛蒡子、蝉蜕、金银花、连翘、甘草，均购自辽宁中医药大学附属医院。取6剂，分别将药物混合后浸泡30 min，煮沸后继续煎30 min，共煎煮2次，合并2次煎液，浓缩至每毫升含原药材2 g。扑尔敏，北京太平洋药业有限公司生产，批号060205；生理盐水，哈尔滨三联药业有限公司生产，批号F060624B2；卵白蛋白(OVA)，国药集团化学试剂公司生产，批号F20060147；白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)酶联免疫法检测试剂盒，深圳晶美生物工程有限公司生产；免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫法检测试剂盒，上海森雄科技实业有限公司分装。
1.3 仪器
常温高速离心机(C412型，法国捷安)；微孔板酶标仪(550号，美国博乐公司)。
2 实验方法
2.1 疏风饮对大鼠血清IL-4、IFN-γ、IgE含量的影响
取大鼠40只，随机分为4组，即正常对照组、模型组、疏风饮组、扑尔敏组，每组10只。以生理盐水配制Al(OH)3悬液(10 g/L)，正常对照组每只大鼠腹腔注射1 mL；其余各组大鼠均腹腔注射OVA l mg与Al(OH)3悬液(1 mL)的混合液进行初次免疫，第10天重复1次[1]。正常对照组及模型组每天灌服生理盐水4 mL/只；疏风饮大剂量组及扑尔敏组分别灌服疏风饮40 g/(kg·d)、扑尔敏4 mg/(kg·d)，从初次免疫后第6天开始给药，共14 d。将大鼠在未处死前取血，离心2 000 r/min，取血清。采用酶联免疫试剂盒，严格按照试剂盒说明书操作，测定血清中IL-4、IFN-γ、IgE的吸光度(OD)，根据标准曲线，计算细胞因子浓度。
转贴于 2.2 统计学方法
采用SPSS10.0统计软件系统，计量资料用x±s表示，各组计量资料比较采用方差分析。
3 结果
(见表1、表2)表1 疏风饮对大鼠血清IFN-γ、IL-4含量的影响(略)注：与正常对照组比较，*P&<0.05，**P&<0.01；与模型组比较，☆P&<0.05，☆☆P&<0.01；与扑尔敏组比较，△P&<0.05(下同) 表2 疏风饮对大鼠血清IgE含量的影响(略)
4 讨论
荨麻疹、湿疹等Ⅰ型超敏反应疾病的发病机制主要是由IgE介导，肥大细胞、嗜碱粒细胞和嗜酸粒细胞等效应细胞以释放生物活性介质的方式参与发生[2]。T细胞分泌的细胞因子在调节Ⅰ型超敏反应中也起重要作用[2]。Th细胞按其产生的细胞因子可分为Thl和Th3两个亚群，Thl细胞主要分泌IFN-γ、IL-2、IL-12，Th3细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-10等细胞因子，Thl细胞因子主要参与细胞免疫应答，而Th3细胞因子主要参与体液免疫应答[3]。IgE的类别转换取决于Th细胞[4]。1986年以来在鼠和人的体内、体外研究表明，IL-4促进IgE合成，而IFN-γ抑制IL-4所诱导的IgE合成，说明Thl和Th3细胞均调控IgE合成。变应原致敏B细胞合成IgE需IL-4的机制之一是IL-4为B细胞提供了活化信号，B细胞由产生IgM转换成产生IgE抗体，因此，IL-4是一个类别转换因子。特应症患者可能有较多IL-4的变应原特应性T细胞，并能分泌较多IL-4。IL-4能在mRNA水平上阻断单核细胞、CD4+或CD8+T细胞由植物凝集素所诱导的IFN-γ的产生，也能抑制IL-1、TNF-α和PGE2的产生，而这些细胞因子均能抑制IgE合成。因此，IL-4和IFN-γ量的比例和相互制约的平衡调节可能是IgE合成的重要决定因素[4]。两类Th细胞所分泌的细胞因子在超敏反应调节中互相拮抗，二者失衡导致IgE产生失控而增多，与Ⅰ型超敏反应的发生密切相关。
本研究结果表明，疏风饮可升高大鼠血清中IFN-γ的含量，使IL-4分泌降低，从而减少血清中IgE的含量，与模型组相比较有显著差异(P&<0.05)。从4组大鼠血清中细胞因子的含量及IFN-γ/IL-4比值可以看出，本实验研究的IL-4、IFN-γ及IgE的分泌有一定趋势：模型组大鼠用疏风饮治疗后，IFN-γ分泌增加，同时IL-4及IgE含量受到抑制。由此可以考虑，疏风饮抗Ⅰ型超敏反应的免疫作用与其可调节血清中某些细胞因子的含量有关；并能通过对某些细胞因子的调节，对机体内重要的免疫平衡机制Th1/Th3平衡产生影响。研究结果提示，疏风饮可从调节大鼠Th1/Th3细胞因子分泌等角度预防、延缓和减轻Ⅰ型超敏反应的发生，从理论上证实该药具有预防和治疗急性荨麻疹的作用。
【参考文献】
[1] 唐建民，张凤蕴，高淑英，等.息敏胶囊对Ⅰ型超敏反应模型鼠IgE、IL-4及IFN-γ水平的影响[J].细胞与分子免疫学杂志，2003，19(6)：616－617.
[2] 龚非力.医学免疫学[M].北京：科学出版社，2004.293－297.
[3] Mosmann TR， Sad S.The expanding universe of T-cell subsets：Th1，Th3 and more[J]. Immunol Today，1996，17(3)：138.
[4] 何 维.医学免疫学[M].北京：人民卫生出版社，2005.303.