关于βcatenin 蛋白在肝细胞癌中表达的意义

【关键词】 肝细胞癌；βcatenin；蛋白表达；免疫组织化学

　　 β连环蛋白是一种重要的胞内蛋白，它具有双重功能，一是介导细胞粘附的E钙粘连素的重要结构分子，其异常改变在肿瘤浸润、转移过程中发挥重要作用;二是WNT信号传导途径的关键信号分子，降解障碍致使胞质内游离的β连环蛋白积累，并与T细胞因子/淋巴细胞增强因子(TCF/LEF)结合进入细胞核，激活下游靶基因cmyc转录，引起细胞增殖和分化失控，导致肿瘤发生。目前对肿瘤的研究表明，βcatenin基因突变及蛋白的过度表达与肿瘤的发生、发展和预后密切相关，阻断βcatenin信号通路的异常激活有希望成为治疗肝癌的新途径，该基因表达与肿瘤病理分级和预后的关系目前颇多争议，有研究表明与肿瘤预后良好相关，但也有相反的报道，βcatenin它不但可以作为评价细胞增殖状态的指标，而且可能作为判断肿瘤预后的重要指标。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 收集郑州大学第一附属医院1996-2006年因肝癌手术切除后病理科存档蜡块。选取40例HCC(肝细胞癌)及10例癌旁正常肝组织。其中高分化HCC18例，中分化HCC12例，低分化HCC 10例；淋巴结未转移者24例，淋巴结转移者 16例。所有组织标本经10%中性福尔马林固定，常规脱水后石蜡包埋。

　　1.2 方法 应用免疫组织化学（SP法）分别检测Livin 及βcatenin在HCC和癌旁正常组织中的表达情况。

　　1.3 统计学处理 所有数据均采用SPSS 10.0 软件，两样品率的比较采用四格表资料χ2检验;多样本率的比较采用行X列表χ2检验;相关性检验用Spearman相关分析。 检验水准α=0.05。

　　2 实验结果
　　　
　　βcatenin 蛋白阳性染色呈棕黄色，正常肝细胞定位于胞膜，肝癌组织中以胞浆表达为主。40例HCC组织中有29例阳性，表达率是72.5%，10例正常组织中3例弱表达，阳性表达率30%，2组相比有统计学意义（P&<0.05）；βcatenin 在高分化、中分化、低分化中的阳性表达率分别是61.1%（11/18 ），83.3%(10/12)，80% (8/10)，3组间相比均无统计学意义（P&>0.05）；βcatenin 在淋巴结转移肝细胞肝癌中阳性表达率是50%（8/16）， βcatenin 在淋巴结未转移组肝癌中阳性表达率是87.5%(21/24)，2组差异有统计学意义（P&<0.05）。见表1。

　　表1 βcatenin蛋白在HCC组织中表达（略）

　　注：* 中分化组与低分化组相比，χ2=0.031，P&>0.05

　　3 讨论
　　
　　本研究利用免疫组织化学方法，探讨βcatenin的表达与肝细胞癌的发生关系及意义。本研究结果显示，βCatenin在癌旁正常肝细胞组织中10例3例胞膜表达(表达率30.00%)。βCatenin在肝癌细胞组织中29例高表达(表达率72.50%)，表达部位位于胞浆，二组间差异有统计学意义。苏小康［1］等人用免疫组化法检测32例肝癌原发灶、癌栓和癌旁组织中βcatenin、Cyclin D1的表达，同时分析其与临床病理参数之间的关系。结果显示，βcatenin在原发灶、癌栓和癌旁组织中的阳性率分别为62.50%、81.25 %、9.38%，三者之间有显著差别， 癌栓和癌旁细胞组织中二组间差异有统计学意义。郑启昌［2］等人采用应用免疫组织化学SP法对 42例肝门部胆管癌及 10例胆管良性病变组织中的 β连环蛋白和cmyc蛋白进行检测，并结合临床资料进行分析。结果显示，β连环蛋白在 10例胆管良性病变组织中均呈正常表达， 而在 42例胆管癌患者中 30例癌组织细胞胞浆内的 β连环蛋白的异常表达率明显高于胆管良性病变组织，且异常表达率与肝门部胆管癌的淋巴结转移显著相关，而与肝门胆管癌大小、分化程度和侵袭状况无关。总之，上述研究报道均表明βcateninn在多数恶性肿瘤中均呈高表达，本实验与上述研究结果相符。
　　
　　本实验发现βcatenin 与HCC组织学分级有关，它在高、中、低分化中的阳性表达率分别是61.11%（11/18 ）、83.33%(10/12)、80.00% (8/10)，3组间相比均无统计学意义（P&>0.05）。王启明等，应用RTPCR法观察它们在正常肝脏，不典型增生肝脏和肝癌组织中的转录水平，用免疫组化染色法研究βcatenin、APC和cyclinD1等3个因子有无，表达结果显示，在正常肝脏中，用RTPCR未检测到wnt1、cyclinD1以及cmyc的mRNA转录，免疫组化染色也只观察到βcatenin在细胞膜处有比较弱的表达。本实验研究证实βcatenin的表达与HCC组织学分级之间无显著关系，与以上文献结果相符。
　　
　　β Catenin 在16例淋巴结转移肝细胞癌中8例表达(表达率50.00%)，在24例淋巴结未转移肝细胞癌中21例表达(表达率87.50%)，比较两组的染色阳性率，差异有统计学意义。郑启昌［2］等发现了β连环蛋白肝门胆管癌大小、分化程度和侵袭状况无关，而与肝门部胆管癌的淋巴结转移显著相关。
　　
　　βcatenin 在肝细胞癌中研究中的相关意义，Dong Yuan等人也研究表明了βcatenin基因突变及蛋白的过度表达与肿瘤的预后密切相关，阻断βcatenin信号通路的异常激活有希望成为治疗肝癌的新手段；苏小康［1］等用免疫组化法检测32例肝癌原发灶、癌栓和癌旁组织中βcatenin、Cyclin D1的表达，同时分析其与临床病理参数之间的关系，结果显示，βcatenin与癌栓形成、HBV感染、肝硬化有关，βcatenin和Cyclin D1促进癌栓形成，参与HBV感染和肝硬化形成过程［2］；以上研究为βcatenin在HCC治疗中的应用奠定基础。
　　
　　总之，β连环蛋白是一种重要的细胞粘附及信号转导分子，通过与多种蛋白结合参与细胞和组织的分化、损伤和修复及其他生物学功能。近年来研究表明βcatenin蛋白的表达与多种恶性肿瘤的发生和发展和有密切关系，例如大肠癌、肝母细胞瘤、 卵巢癌、 髓细胞瘤、黑色素瘤细胞系、肺癌、膀胱癌等在肝细胞癌的发展中，βcatenin频繁活动，并可能促进其发展。

参考文献