12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠心脏、肝脏和肾脏病变的特点

　　　　 作者：田枫 张阔 康爱君 周榕 周淑佩 郑振辉 赵德明

【摘要】 目的 探讨12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠心脏、肝脏和肾脏病变特点。方法 选取12月龄雌雄各半动脉粥样硬化小鼠20只及同龄同数量的雌雄各半C57BL/ 6J小鼠作为对照，用全自动生化分析仪测定与心脏功能、肝脏功能和肾脏功能相关的血清酶；以SoftronTM智能无创血压计测定小鼠心率和血压；常规病理制片，HE染色，光学显微镜观察心脏、肝脏和肾脏病理变化。结果 雌性Apoe-/-小鼠肾脏功能相关血清尿素氮（BUN）与正常对照小鼠相比极显著升高（P＜0.01），雄性Apoe-/-小鼠肾脏功能相关血清肌酐(Cr)和尿酸(UA)均极显著升高（P＜0.01）。其他各项指标与对照组相比无显著差异。雌性Apoe-/-小鼠收缩压（SBP）、舒张压（DBP）和平均动脉压（MBP）与对照组相比均有显著差异（P＜0.05），雄性Apoe-/-小鼠DBP和MBP与对照组相比均有显著差异（P＜0.05），心率（HR）未见显著变化。4例Apoe-/-小鼠可见肾动脉管壁中膜增厚，有大量的泡沫样细胞增生。结论 12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠肾脏功能病变显著。

【关键词】 Apoe-/-小鼠；心脏；肝脏；肾脏

由于Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠无论正常或高脂饮食，均可形成严重的高脂血症，并自发形成纤维斑块和复合斑块，而且斑块的分布与人类动脉粥样硬化斑块的分布极为相似，在动脉粥样硬化研究中发挥着越来越重要的作用。本文对12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠心脏、肝脏和肾脏病变特点进行研究，以期为心血管等老年病学研究工作者提供参考资料。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物

　　12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠20只，雌雄各半；另选同龄的雌雄各半 C57BL/ 6J 小鼠20只作为对照，合格证号为SCXK(京) 20060008，饲养于北京大学医学部实验动物科学部屏障环境内，合格证号为 SYXK(京) 20060025；小鼠采食采用无特定病原体或清洁级（SPF）全价营养鼠料，由北京科澳协力饲料有限公司提供，合格证号SCXK(京) 20050007。

　　1.2 方法

　　1.2.1 心脏功能、肝脏功能和肾脏功能相关血清标志物的测定

　　实验小鼠禁食12 h，眼眶静脉丛取血，离心，分离血清待用。心脏功能指标检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDHL)；肝脏功能检测天冬氨酸转氨酶(GOT)、丙氨酸转氨酶(GPT)、 总胆红素(TbIL)；肾功能检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)。测定试剂盒均购自北京中生北控有限公司。用AUTOLAB全自动生化分析仪V1.0测定。

　　1.2.2 血压、心率(HR)测定

　　小鼠清醒状态下，以SoftronTM智能无创血压计BP98A测定小鼠HR、无创收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)。

　　1.2.3 心脏、肝脏和肾脏病理观察

　　各组6只小鼠取心脏、肝脏和肾脏，10%甲醛固定，常规病理制片，HE染色，光学显微镜观察，LeicaDFC300FX病理图像分析系统分析、采集图像。

　　1.3 统计学分析

　　所有数据以x±s表示，采用SPSS11.5软件进行数据分析，组间比较采用单因素方差分析。

　　2 结 果

　　2.1 12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠心脏功能、肝脏功能和肾脏功能相关血清标志物的变化

　　雌性Apoe-/-小鼠肾脏功能相关血清BUN与正常对照小鼠相比极显著升高（P＜0.01），雄性Apoe-/-小鼠肾脏功能相关血清Cr和UA均极显著升高（P＜0.01）。其他各项指标与对照组相比无显著差异，见表1。表1 Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠心脏功能、肝脏功能和肾脏功能相关血清标志物的变化(略)

　　2.2 12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠血压、HR的变化

　　雌性Apoe-/-小鼠SBP、DBP和MAP与对照组相比均有显著差异（P＜0.05），雄性Apoe-/-小鼠DBP和MAP与对照组相比均有显著差异（P＜0.05），HR未见显著变化。见表2。表2 Apoe-/-小鼠血压及HR变化(略)

　　2.3 12月龄Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠心脏、肝脏和肾脏病理学变化

　　Apoe-/-小鼠心肌纤维排列整齐，心肌细胞核位于中央，呈椭圆形或圆形，染色较浅。心内膜结构完整，无增厚，心内膜下无充血、出血等病变。Apoe-/-小鼠均可见肝小叶轮廓清晰，肝细胞索呈辐射状排列在中央静脉的周围，肝细胞大小一致，呈多边形，胞核大而呈圆形或椭圆形，胞浆均匀红染，小叶周边肝细胞胞浆内有大小不等的空泡，疑为肝小叶周边轻度脂变。肝窦、汇管区内动、静脉以及中央静脉未见淤血，胆小管立方上皮细胞排列整齐，细胞结构完整，未见病变；汇管区无渗出或增生性病变。Apoe-/-小鼠肾皮质和髓质结构清晰；肾小球结构、大小、数目正常，但肾小球肿胀，肾小囊腔变小，无渗出，肾小管上皮细胞肿胀，管腔不规则；有4例可见肾动脉管壁中膜增厚，有大量的泡沫样细胞增生。见图1。

　　3 讨 论

　　本研究组曾探讨了Apoe-/-动脉粥样硬化小鼠血脂及冠状动脉硬化的关系〔1〕，老龄小鼠血脂与血清胆红素关系〔2〕及老龄动脉粥样硬化小鼠血小板与血脂及白细胞总数的关系〔3〕等，结果表明Apoe-/-小鼠血脂升高与年龄和性别有关，并且其直接胆红素水平显著降低；白细胞总数、单核细胞数、平均血小板体积及血小板分布宽度均显著升高。由于动脉粥样硬化与高血压、脂肪肝〔4〕及肾功能损害〔5〕等病变相互关联，本文在曾经研究的基础上进一步探讨12个月龄动脉粥样硬化小鼠心脏、肝脏和肾脏的病变特点。
　　本研究结果显示从血清学指标及光镜的病理学结果都表明12月龄Apoe-/-小鼠心脏和肝脏未见明显病变。相比之下，肾功能损伤比较明显，BUN、Cr和UA与对照组相比均有显著差异。生理情况下，动物体内的BUN、Cr、UA等代谢产物都是经肾脏排出体外，检测血清中的含量对诊断机体的肾脏的排泄功能具有一定的意义〔6〕。而且病理学结果显示有4例可见肾动脉管壁中膜增厚，有大量的泡沫样细胞增生。雌性Apoe-/-小鼠SBP、DBP和MAP与对照组小鼠相比均有显著差异（P＜0.05），雄性Apoe-/-小鼠DBP和MAP与对照组相比均有显著差异（P＜0.05），此血压变化可能与肾脏功能改变有关。本研究观察了12月龄Apoe-/-小鼠心脏、肝脏、肾脏的病变特点，为该模型在心血管疾病等老年病学研究的广泛应用提供了基础资料。

参考文献

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　　2 田 枫，张 阔，康爱君，等.动脉粥样硬化模型小鼠血脂与血清胆红素关系的探讨〔J〕.实验动物科学，2007；24（1）：134.

　　3 田 枫，康爱君，张 阔，等.载脂蛋白E基因敲除小鼠血小板与血脂及白细胞总数的关系〔J〕.中国老年学杂志，2006；26（10）：13923.

　　4 贺 琴，谭华炳.动脉粥样硬化程度与脂肪肝关系的实验研究〔J〕.山西医药杂志，2008 ；37（2）：1268.

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