1 210例妇女宫颈液基细胞和DNA倍体检查结果分析

　　　　 作者：黄卫彤 吴卫萍 黄宏思 黄燕 韦凤莲 曲德英

【关键词】 老年妇女；宫颈癌；宫颈液基细胞；DNA倍体分析

宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤，近年来根据临床资料显示，老年妇女宫颈癌高发年龄在55～70岁，而且发病的临床特点是发现病变较晚，病情较严重，死亡率高。因此，老年妇女应重视宫颈癌筛查。本文对1 210例妇女进行宫颈液基细胞DNA倍体检测结果分析。

　　1 材料与方法

　　1.1 一般资料

　　随机选择1 210例于2007年5月至2008年10月右江民族医学院附属医院妇科门诊就诊，年龄55～70岁妇女，临床表现为有白带增多、性交后出血、绝经后出血、不规则阴道流血、流液、腹疼等症状者和宫颈糜烂者，共计1 008例；自愿参加防癌检查符合上述情况者202例。

　　1.2 标本的采集与处理

　　窥阴器暴露宫颈后，用特制的小塑料刷从子宫颈外口插入子宫颈管内旋转3～5圈取出，将刷头放入装有固定液的标本收集管中，用液基细胞制片仪制片，每例制成2张薄层细胞片，分别进行巴氏染色做细胞学诊断及Feulgen 染色做DNA定量测定。

　　1.3 细胞学诊断

　　采用贝塞斯达系统(TBS)分级系统〔1〕：即正常范围（WNL）、意义不明的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）、鳞状上皮内病变（SIL）和鳞状细胞癌（SCC），SIL包括低度鳞状上皮内病变（LSIL）和高度鳞状上皮内病变（HSIL）；腺上皮不正常为意义不明的不典型的腺上皮细胞（AGUS）和腺癌。细胞学阳性诊断包括ASCUS或AGUS以上病变。

　　1.4 细胞DNA定量分析

　　全部福尔根染色片用AcCell全自动细胞图像分析系统进行扫描处理〔2〕，AcCell系统对每张片上5 000个细胞核进行扫描测定，每个细胞核均得到123个核特征值，AcCell系统自动将细胞分类并测出其细胞核内DNA含量，细胞核DNA指数＞2.5 者诊断为异倍体细胞即阳性，细胞核DNA指数＜2.5 者诊断为阴性。细胞学诊断阳性或有异倍体细胞≥3个、每个细胞DNA指数≥3.5者，均做病理组织学活检确诊。

　　2 结 果

　　2.1 宫颈液基细胞学检查与DNA倍体检测结果

　　液基细胞学诊断阳性156例，阳性率为12.9%（156/1 210），细胞DNA异倍体检出阳性169例，检出率14%（169/1 210），只有异倍体细胞≥3个而细胞形态无改变者13例，未能检出DNA异倍体细胞而细胞学诊断为LSIL者4例，液基细胞学结合DNA异倍体分析检出阳性173例，总阳性率为14.6%，而且随着DNA异倍体细胞数量的增加，细胞病变的严重程度相应增加。见表1。表1 1 210例宫颈液基细胞学检查结果与DNA倍体检测结果（略）

　　2.2 99例宫颈或内膜诊刮病理组织学活检查结果

　　在细胞学诊断≥LSIL或细胞DNA分析有≥3个异倍体细胞，并每个细胞DNA指数≥3.5，根据临床症状和特征99例，需做宫颈组织学或子宫内膜组织诊刮活检，活检结果：阳性率为94%（93/99），其中鳞癌2例，腺癌1例，腺鳞癌1例，子宫内膜癌1例，原位癌4例，CIN1 54例，CIN2 12例，CIN3 18例，慢性宫颈炎6例。

　　3 讨 论

　　3.1 液基细胞学检测结合DNA倍体检测在老年宫颈癌早期诊断的应用价值

　　常规巴氏宫颈细胞学涂片检查是宫颈癌筛查的主要方法，对于宫颈、阴道萎缩的老年妇女，取材比较困难，通常取不到颈管内的细胞或无足够的细胞提供诊断，易出现漏诊。液基薄层细胞学技术改进了取材和制片方法，不但取到充足的宫颈外口和颈管内细胞，而且制出的两张薄层细胞片，细胞分布均匀，既能清晰地观察细胞形态结构的改变，又能做DNA倍体分析。DNA异倍体是肿瘤细胞形成过程的一个生物标记，采用全自动细胞DNA倍体分析，是目前判断宫颈上皮内瘤变（CIN）发展状态方法之一，国际上不仅将全自动细胞DNA倍体分析系统用于宫颈癌的诊断，还用于判别宫颈癌的恶性程度及预测宫颈疾病的发展状态〔3，4〕。本文采用宫颈液基细胞DNA倍体检测，阳性率为14%，在细胞学诊断≥LSIL或细胞DNA分析有≥3个异倍体细胞，每个细胞DNA指数≥3.5者，与病理活检符合率为94%，并且随着DNA异倍体细胞增多，病变越严重，这与文献报道相一致〔5〕。同时全自动细胞DNA倍体分析系统可以对涂片内的所有细胞核进行定量检测分析，可避免了人为疏漏、经验不足和只从单一的细胞形态改变来诊断的缺陷，能发现肉眼所不能观察到的细微改变，从而提高了诊断技术。本次检查中，有3例患者均无自觉症状，肉眼观察表现宫颈光滑，检查结果为HSIL和检出大量DNA异倍体细胞，活检证实均为原位癌；1例患者肉眼观察表现为宫颈光滑，检查结果为AGCUS和检出大量DNA异倍体细胞，活检证实为腺癌。5例宫颈糜烂者，细胞学形态观察未找到异形细胞，而DNA倍体分析有＞3个异倍体细胞，且DNA指数≥3.5者，经活检证实为3例为CIN1，2例为CIN2。有4例细胞形态观察诊断为LSIL，但无DNA倍体异常者，经活检证实为CIN1。可见液基细胞学诊断结合DNA倍体分析，可起到相互辅助作用，能及早发现宫颈癌前病变及宫颈早期癌变，使患者能做到早诊断、早治疗，从而提高老年患者的治愈率和存活率。

　　3.2 老年妇女宫颈癌筛查的意义

　　在1 210例检查者中，99例患者细胞学诊断≥LSIL、ASCUS或AGUS伴细胞DNA分析有≥3个异倍体细胞、细胞DNA分析有≥3个异倍体细胞，每个细胞DNA指数均≥3.5者，需进行病理组织学活检确诊，活检结果阳性率为94%（93/99），其中4例癌浸润年龄在57～70岁。说明老年妇女宫颈癌及癌前病变的发病率仍比较高，而且年龄越大，病变越严重。其余6例活检结果阴性者为慢性宫颈炎，需治疗和定期随诊复查。早期宫颈癌和癌前病变一般无临床症状或仅有很轻微症状，常不引起患者的注意，加上老年人随年龄的增长及生理上的变化，不够重视自我体检，对宫颈癌预防的意识很薄弱或者无条件进行筛查，多数老年妇女有明显的临床症状，才到医院就诊，本文调查中，82%的患者没有参加过宫颈癌筛查，都是有明显症状才到医院就诊，因此病情都比较严重，延误了治疗时机。从而导致老年宫颈癌发病率和死亡率仍比较高。可见增强老年人预防宫颈癌意识，使她们能定期性有效的宫颈癌筛查，对降低宫颈癌发病率和提高妇女生活质量有着重要意义。
　　

参考文献

　　1 National Cancer Institute Workshop.The 1988 Bethesda system for reporting cervical/vaginal cytological diagnoses〔J〕.JAMA，1989；262(7):9314.

　　2 Palcic B，Garner DM，MacAulay CE，et al.Oncometrics lmaging Corporation and Xillix Technologies Corporation.Use of the Cytosavant in quantitative cytology〔J〕.Acta Cytol，1996；40（1）:6772.

　　3 Kashap V，Das DK，Luthra UK.Microphotometric nuclear DNA analysis in cervical dysplasia of the uterine cervix:its relation to the Progression to malignancy and regression to normaley〔J〕.Neoplasma，1990；37（5）:497500.

　　4 孙小蓉，汪 键，Boecking A，等.DNA倍体分析系统用于宫颈癌及上皮内瘤变的诊断及预测〔J〕.中华病理学杂志，2005；34（7）:4357.

　　5 屠庆年，汪 键，车东媛，等.非整倍体细胞测定在宫颈上皮内瘤变分级中的意义〔J〕.临床与实验病理学杂志，2007；23（2）：2356.