肺痨康对结核杆菌体内抑菌实验研究

　　　　 作者：王帅　叶品良 申金贵　卢润生

【摘要】 观察肺痨康对结核杆菌体内抑菌作用。［方法］小鼠随机分为空白组，模型组，阳性组（RFP，灌胃150mg/kg），肺痨康高、中、低剂量组6组，空白组，模型组给予等容积的生理盐水。实验当天，将结核菌配制成1mg/ml生理盐水菌悬液，尾静脉注射0.2ml/只。于第二天灌胃药物。一周后死亡的动物作解剖记录；观察肝，脾，肺的重量指数及每个脏器的结核结节，脏器的病理形态学变化(HE染色)与结核菌数（ZN染色）。观察并记录各组动物的存活时间。［结果］肺痨康高剂量对感染肺结核小鼠有明显的治疗效果，中剂量组有较明显的疗效。［结论］肺痨康高剂量、中剂量有较好的抗结核杆菌的作用。

【关键词】 肺痨康;结核菌;体内抑菌

　　 Abstract: Tuberculosis is one of the critical diseases with priority of the State’s infectious disease prevention. This research， based on the collection and analysis of the cases cured by “feilaokang” and a fine result for symptomatic treatment experiment in vitro， make a further research of bacteriostasis in vivo. The pathological section examination has also been made， including HE coloration and ZN coloration examination. The result indicate that there is a clear effect， for some indicators， on infected mouse for middle does and a clear effect， for all indicators， on infected mouse for high does. This result would be the very foundation for the further research of screening for MDRTB with effect by “feilaokang” and concluding for the antibacterial coverage and antibacterial material basis.

　　Key words: Feilaokang; tubercle bacillus; bacteriostasis in vivo

　　肺痨康是在中医药理论的指导下，结合长期的临床实践、科学总结出的一张实用方剂。前期实践和实验证明，“肺痨康”对各型结核菌都有较好的治疗作用［1］，体外研究也取得了较好的效果［2］。本次研究对肺痨康体内抗菌进行了实验观察，现报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　（1）实验药品：肺痨康水煎液，药品用常规方法煎煮，所需药品均购自同仁堂药店成都分店。对照药物：利福平（成都锦华药业有限公司，批号：071101。配制方法：RFP先用二甲基甲酰胺一滴溶解后，再用蒸馏水稀释。）（2）实验菌株：H37RV标准菌（ATCC：27294）；由中国疾病预防控制中心结核病预防控制分中心提供。（3）实验动物：昆明种小鼠，120只，一级，雌性，体重18～22g。由成都中医药大学动物实验中心提供（合格证号：SCXK(川)200811）。

　　1.2 实验方法［36］

　　小鼠经PPD测试阴性后，完全随机分组，分为空白组，模型组，阳性组（RFP，灌胃150mg/kg），肺痨康高剂量组，肺痨康中剂量组，肺痨康低剂量组（分别按6g/kg、3g/kg、1.5g/kg灌胃给药）6组，空白组，模型组给予等容积的生理盐水。实验当天，将结核菌配制成1mg/ml生理盐水菌悬液，尾静脉注射0.2ml/只。于第二天灌胃药物，每日一次，连续56天。一周后死亡的动物作解剖记录；观察肝，脾，肺的重量指数(脏器重g/体重g×100)，及每个脏器的结核结节，脏器的病理形态学变化(HE染色)与结核菌数（ZN染色）。观察并记录各组动物的存活时间。

　　1.3 统计学方法

　　结果采用SPSS17.0统计软件处理，测定结果以（x±s）表示，组间计量资料比较采用组间t检验，计数资料用秩和检验。

　　2 结果

　　2.1 小鼠脏器重量指数，体重，肺脏结核结节，存活时间的比较

　　见表1。表1 小鼠脏器重量指数、体重、肺脏结核结节、存活时间的比较（略）

　　与空白组比较，#P<0.01，##P<0.01，*P<0.01，**P<0.01，&P<0.01，&&P<0.01

　　2.2 小鼠脏器病理组织学结果（HE染色）

　　见表2。表2 小鼠脏器病理组织学结果（略）

　　2.3 小鼠脏器结核菌检查（ZN染色）

　　见表3。表3 小鼠脏器结核菌检查（略）

　　3 讨论

　　肺痨康高剂量与空白组、阳性组在存活时间、脏器指数等各指标方面均无显著性差异，证明肺痨康高剂量能达到理想的治疗效果。肺痨康中剂量组与空白组有一定的差异，但与阳性组无显著性差异，证明中剂量虽然有一定的治疗作用，但不及RFP和肺痨康高剂量。低剂量显著性差异明显。可以得出肺痨康高剂量、中剂量有较好的抗结核杆菌的作用，但中剂量效果次于RFP。因此，有必要进一步对中剂量进行抗菌筛选，确定抗菌范围，另外，高剂量、中剂量对其他耐药性结核杆菌的体内实验、有效成分、物质基础、抗菌机制，也有待一步的研究。

参考文献

1］叶品良，卢润生，黄秀深，等.肺痨康治疗肺结核69例［J］.江西中医药，2009，40（2）：33.

　　［2］刘婷婷，叶品良，王帅，等.“肺痨康”对耐多药结核分枝杆菌抑菌效力的体外研究［J］.光明中医，2008，23（10）:14531454.

　　［3］卢润生，郑德福，李定越，等.某中药抗结核菌药物效果实验研究［J］.现代预防医学，2007，34（5）：878879，882.

　　［4］李定越，卢润生，蒋绍双.结核菌实验动物模型［J］.四川医学，2003，24（7）：761762.

　　［5］中国防痨协会基础委员会.结核病诊断实验室检验规程［M］.北京：中国教育文化出版社，2006.

　　［6］卢润生，刘传金，漆浩珊，等.结核菌实验动物模型探讨［J］.中国防痨通讯，1990，12(3):118.