补肾复方对去势雌性恒河猴NO和ET水平的影响

　　　　 作者：文乐兮 张延武 尤昭玲 孟琼 吴玉冰 任丽萍

【摘要】 探讨补肾复方防治绝经后冠心病的作用机理。［方法］将4只性成熟雌性恒河猴复制成人工绝经模型，随机分为补肾复方组和倍美力对照组，每组2只。每日灌胃补肾复方煎剂，血清NO采用硝酸还原酶法测定，血浆ET1浓度采用放免法。［结果］补肾复方和西药结合雌激素倍美力均能升高NO和降低ET水平，两组在重复测量间有统计学意义（P<0.05）。［结论］补肾复方防治绝经后冠心病的机理可能与调节NO和ET两者平衡，改善血管舒缩功能有关。

【关键词】 补肾复方；一氧化氮（NO）；内皮素（ET）；冠心病；去势雌性恒河猴

　　　　 Influence of Kidneynotifying Compound on Decapitated Henghe Female Monkeys’ NO and ET Wen Lexi， Zhang Yanwu， You Zhaoling， et al Hunan University of TCM， Changsha(410208)Abstract：［Objective］ To discuss the mechanism of Kidney-notifying Compound preventing and treating menopause coronary heart disease. ［Method］ Copy 4 mature Henghe female monkeys into artificial menopause models， randomly pide them into Kidneynotifying Compound group(1) and Premarin control group(2)， 2 monkeys in one group. Every day make stomach perfusion of the of Compound decoction; take nitrate reductase to measure serum NO， radiationimmune method for plasm ET1 concentration. ［Result］ The Compound and WM combined with estrogen Premarin all can raise NO and reduce ET level， two groups have statistical meaning in replying measurement（P<0.05）.［Conclusion］ The mechanism of Kidneynotifying Compound preventing and treating menopause coronary heart disease may be concerned with regulating NO and ET balance， and improving vasomotor function.

　　Key words: Kidneynotifying Compound; decapitated Henghe female monkey; NO; ET; menopause coronary heart disease

　　绝经后心血管疾病的发病机理与妇女进入围绝经期，机体的内分泌平衡状况发生改变，卵巢功能减退，雌激素（E）分泌减少，心血管系统失去了内源性E的保护作用相关［1］。本文通过补肾复方对去势雌性恒河猴血清NO、ET水平影响的观察，探讨该方防治绝经后冠心病（CHD）的作用机理。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

　　(1)动物:实验动物为性成熟雌性恒河猴。清洁级，体重5～7kg，购自中国军事科学院动物实验中心。动物质量合格证号为99001。(2)药物制备:补肾复方由熟地黄、山茱萸、菟丝子、桑寄生、珍珠母、夜交藤等药物组成。实验药物均购自湖南金沙大药房。西药对照药物结合雌激素倍美力由美国惠氏制药有限公司提供。（3）试剂与器械：TD4－1台式离心机（湖南仪器仪表总厂离心机厂）、－80℃低温冰箱（日本Sanyo公司）、KJ120型自动煎药机（韩国）等。NO试剂盒，ET试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供。

　　1.2 方法

　　4只去势恒河猴先按体重分层，然后随机分为药物组和对照组2组，每组2只。

参考文献

［2］方法用氯氨酮5～8mg/kg肌肉注射麻醉，行双侧卵巢切除术，复制成人工绝经模型。术后观察6个月，4只恒河猴均无月经来潮，证明造模成功。术后6个月开始给药。药物组、对照组给药量按照《人和动物体表面积折算的等效剂量比值表》计算，补肾复方组7.2g/（kg·d）、倍美力组0.025mg/（kg·d）。每日灌胃1次，28d为1疗程，连续给药3个疗程。给药前与每疗程最后1次给药次晨在后肢皮下静脉抽血2ml，分离血清。血浆标本采集：取静脉血２ml，注入含7.5%EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的试管中混匀，分离血浆。放-80℃低温冰箱保存备测。血清NO采用硝酸还原酶法测定，血浆ET1浓度采用放免法。

　　1.3 统计学分析

　　结果采用DPS统计软件重复测量资料方差分析进行统计。

　　2 结果

　　2.1 补肾复方对去势雌性恒河猴血清NO的影响

　　见表1。表1 两组不同测量时间血清NO结果(略)

　　2.2 补肾复方对去势雌性恒河猴ET水平的影响

　　见表2。表2 两组不同测量时间血浆ET1结果（略）．结果显示，两组重复测量间有统计学意义，两药在各疗程中都能降低ET水平。

　　3 讨论

　　一氧化氮（NO）与内皮素（ET）之间合成、释放失衡是影响血管基础张力、冠状动脉血液储备的关键，是高血压、CHD的危险因素。NO具有抗脂质过氧化作用，能够抑制Ca2+和细胞诱导的LDL氧化，减少oxLDL的量，抑制动脉粥样硬化（AS）的形成；NO在心血管系统还具有调节血管张力、血压、器官血流量，抑制白细胞粘附于内皮，降低血管通透性，影响心肌收缩性等作用，可阻止AS的发生发展。

　　ET是目前已知缩血管活性最强的物质。ET有3种同分异构体：ETl、ET2和ET3，其中ETl缩血管作用最强。研究发现，CHD患者血中ET1的水平明显上升。在有AS形成的血管，ET的缩血管作用更加显著［3］。ET不仅在AS的初始阶段起重要作用，还可刺激血管平滑肌的迁移和增生，维持AS的进程。因而NO和ET的失衡对AS、CHD的发生发展有重要作用。

　　有研究结果提示，围绝经期妇女NO、ET变化的原因可能是由于围绝经期E水平的下降，导致血管内皮细胞刺激NOS的作用发生障碍，使NO合成降低；对ET的抑制作用减弱，使ET上升，引起冠状动脉痉挛、心肌缺血、血管内皮细胞受损［4］。可见，E对妇女心血管的保护作用与对血管内皮因子NO、ET的调节有关。

　　补肾复方为全国名老中医、妇科专家尤昭玲教授的临床经验方。该方由熟地黄、山茱萸、菟丝子等药物组成，具有补肾养肝，宁心安神之功效。全方用药肾、心、肝并调，阴、血、精并补，既照顾绝经前后女性生理病理特点，又病证症结合遣药，不失为一首防治绝经前后诸证之良方。本实验结果表明，补肾复方和西药结合雌激素倍美力均能升高NO和降低ET水平，各次测量间有统计学意义。补肾复方防治绝经后冠心病的机理可能与调整NO和ET含量，改善血管收缩功能，防止AS发生、发展有关。

参考文献

［1］Sitges M，Heras M，Roig E，et al.Acute and mid—term combined hormone replacement therapy improves endothelial function in post—menopausal women with angina and angiographically normal coronary arteries［J］.Eur Heart J，2001，22(22):21162124.

　　［2］谢文桂，袁耀萼.尼尔雌醇对去卵巢猕猴实验性动脉粥样化的研究［J］.广西医学，1995，17，(6):492.

　　［3］Miki S，Takeda K，Kiyama M，et al.Modulation of endothelinlcoronary vasoconstriction in spontaneously hypertensive rats by the nitric oxide system［J］.Gen Pharmacol，2000， 35(3): 143147.

　　［4］赖爱鸾，王成彬. 绝经妇女血浆氧化氮，内皮素的水平及补充性激素后的变化［J］.中华妇产科杂志，2000，35(4):222224.