【关键词】 青天葵/药理学;,,镇咳药;,,平喘;,,疾病模型,动物;,,小鼠;,,豚鼠
摘要:【目的】观察青天葵镇咳、平喘的药理作用。【方法】NIH小鼠随机分为8组,即青天葵水提浸膏高、中、低剂量组,青天葵醇提浸膏高、中、低剂量组(剂量均分别为192、96、48?g・kg-1・d-1),阳性对照组(镇咳实验为50?mg・kg-1・d-1的磷酸可待因,平喘实验为01?g・kg-1・d-1的茶碱)和模型组; 采用氨水超声雾化法引发小鼠咳嗽,乙酰胆碱组胺超声雾化法诱发豚鼠哮喘,观察青天葵的镇咳、平喘药理作用。【结果】青天葵水提和醇提高、中、低剂量组均能减少模型小鼠咳嗽次数(P<001),醇提高、中、低剂量组均能延长模型小鼠咳嗽潜伏期(P<001);青天葵醇提高、中、低剂量组和水提高、中剂量组均能延长模型豚鼠抽搐跌倒潜伏期(均P<005或P<001),醇提中、低剂量组和水提高剂量组均能延长模型豚鼠的呼吸困难潜伏期(均P<005或P<001)。【结论】青天葵具有一定的镇咳、平喘的作用。
关键词:青天葵/药理学; 镇咳药; 平喘; 疾病模型,动物; 小鼠; 豚鼠
青天葵始见于《陆川本草》,为兰科植物毛唇芋兰Nervilia fordii(Hance) Schitr.,以全草或块茎入药,性平,味苦、甘。有清肺止咳,健脾消积,镇静止痛,清热解毒,散结消疬之功效,对小儿肺炎有特效[1]。目前,青天葵的研究多集中在栽培、组织培养、化学成分等方面[24]。为进一步证实青天葵的镇咳、平喘药理作用,本文进行了以下相关实验。
1 材料与方法
11 药物与试剂
本实验所用青天葵药材来源于广东翁源,经第一作者鉴定为毛唇芋兰Nervilia fordii(Hance) Schitr.。取称青天葵药材100?g,加10倍量蒸馏水,煮沸30?min,过滤;滤渣再加10倍量蒸馏水,煮沸30?min,过滤,合并2次滤液,蒸干得青天葵水提浸膏。称取青天葵药材100?g,加10倍量体积分数为95%的乙醇,回流30?min,过滤;滤渣再加10倍量体积分数为95%的乙醇,回流30?min,过滤,合并2次滤液,回收乙醇,蒸干得青天葵醇提浸膏。以上水提浸膏和醇提浸膏按文献[5]方法制成高、中、低剂量组。磷酸可待因片(北京中顺制药厂,15?mg/片,批号:0204012);茶碱缓释片(广州迈特兴华制药厂有限公司,01?g/片,批号:20030604);组胺(上海丽珠东风生物技术有限公司,批号:20000113);氯化乙酰胆碱(上海试剂三厂,批号:2000420);氨水(广州化学试剂二厂,批号:2001051502)。
12 动物
清洁级NIH种小鼠,体质量18~150?g,合格证号(粤检证字)为2003A064,均由中山大学实验动物中心提供。
13 仪器
402A超声雾化器Ⅱ类B型(江苏鱼跃医疗设备有限公司)。
14 镇咳作用试验
参考文献
[6-7]方法,取小鼠80只,雌雄各半,随机分成8组,分别为青天葵水提浸膏高、中、低剂量组,青天葵醇提浸膏高、中、低剂量组(剂量均分别为192、96、48?g・kg-1・d-1),磷酸可待因组(剂量为50?mg・kg-1・d-1),模型组,每组小鼠10只。将以上药物均配成相应浓度灌胃给药,连续给药4?d。于末次给药后30?min,将小鼠逐个放入玻璃钟罩内,以浓氨水喷雾引咳15?s,观察小鼠从喷雾开始到出现腹肌收缩张嘴的时间以及2?min内咳嗽次数,首咳时间超过90?s者,按90?s计。15 平喘作用试验
取体质量为120~150?g的豚鼠,雌雄各半,于试验前进行筛选。参照文献方法[89],将56只合格豚鼠随机分成8组,即青天葵水提浸膏高、中、低剂量组,青天葵醇提浸膏高、中、低剂量组(剂量均分别为192、96、48?g・kg-1・d-1),茶碱组(剂量为01?g・kg-1・d-1),模型组,每组豚鼠7只,按10?mL/kg灌胃给药,连续给药4?d。于末次给药后30?min,将豚鼠置于玻璃钟罩内,以20?g/L氯化乙酰胆碱和1?g/L组胺按体积比为1∶1的混合溶液超声雾化15?s,在钟罩内继续停留35?s,将豚鼠取出,观察豚鼠呼吸困难及抽搐跌倒的时间,如果6?min仍不跌倒,则按6?min计。 2 结果
21 镇咳作用试验
表1结果表明,青天葵醇提物高、中、低剂量组能延长小鼠咳嗽潜伏期(P<005或P<001),水提、醇提物各剂量组均能减少2?min内小鼠的咳嗽次数(P<001)。
22 平喘作用试验
表2结果表明,青天葵水提物高剂量组和醇提物中、低剂量组能延长“乙酰胆碱-组胺”性哮喘豚鼠呼吸困难的潜伏期(P<005或P<001);水提物高、中剂量组,醇提物高、中、低剂量组均能延长“乙酰胆碱-组胺”性哮喘豚鼠引喘潜伏期(P<005或P<001)。表1 青天葵对小鼠的镇咳作用表2 青天葵对豚鼠的平喘作用
3 讨论
本实验结果表明:青天葵能延长氨水引起的小鼠咳嗽潜伏期,减少2?min内小鼠的咳嗽次数,具有镇咳作用;气道高反应性(AHR)是哮喘的重要特征之一,它与β肾上腺能受体功能低下、胆碱能神经兴奋性增强有关,青天葵能延长“乙酰胆碱-组胺”性哮喘豚鼠呼吸困难的潜伏期和引喘潜伏期,具有平喘作用,这与青天葵临床治疗哮喘及喘息型慢性支气管炎具有较好疗效的报道一致[10]。本文的研究结果支持了临床用药意图,证实该药镇咳、平喘的作用确实。青天葵在自然界繁殖系数极低,野生资源由于过度开采,目前已基本枯竭,本工作为进一步保护并扩大青天葵种质资源,抢救濒危稀缺南药的深入研究提供了药理学依据。
参考文献
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