【关键词】 强心方/药理学;，心力衰竭，充血性/中药疗法;，疾病模型，动物;，兔
摘要: 【目的】观察强心方对超容量负荷型心衰模型兔的治疗作用。【方法】新西兰雄性兔20只，随机分为4组:模型组、强心方组（中药组，2.6g/kg）、西药组（20μg/kg地高辛+1mg/kg速尿片）、中西药组（2.6g/kg强心方+20μg/kg地高辛+1mg/kg速尿片）;复制超容量负荷型心衰模型，造模后6h各给药组分别按设计剂量灌胃给药，连续7d;采用四道生理仪记录并计算心率（HR）、主动脉收缩压（SBP）、主动脉舒张压（DBP）、左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张压（LVPP）、左室内压最大上升速率（+dp/dt max ）、左室内压最大下降速率（-dp/dt max ），左室内压最大变化速率（±dp/dt max ）的值，并采血检测血清超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。【结果】造模后各组体质量无显著性差异，给药1周后西药组体质量显著下降（P&<0.05）;造模后各组心率下降（与造模前比较，P&<0.05或P&<0.01），给药1周后各给药组心率与模型组比较无显著性差异;给药1周后各给药组对SBP、DBP、LVDP值无明显影响，中西药组可使LVSP值升高（P&<0.01）;给药后各组+dp/dt max 、-dp/dt max 、±dp/dt max 值均升高（与模型组比较，P&<0.05或P&<0.01）;模型组血清SOD水平降低，MDA水平升高（均P&<0.01），各给药组均可升高SOD水平，降低MDA水平（P&<0.05或P&<0.01）。【结论】强心方对超容量负荷型心衰模型兔具有一定的治疗作用，与强心、利尿西药合用可减轻其副作用。
关键词: 强心方/药理学; 心力衰竭，充血性/中药疗法; 疾病模型，动物; 兔
充血性心力衰竭（CHF）属内科常见危重症，各种内外因素若导致心脏前后负荷长期过重，心肌病损及收缩力减弱，均可导致CHF的发生。临床观察显示强心方治疗急性充血性心力衰竭（CHF）疗效较好 ［1］ 。为进一步探讨本方治疗CHF的机理，我们观察了本方对兔超容量负荷型心衰模型的影响，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 强心方（Qiangxin Prescription，QP）组成为甘遂、大戟、芫花、大枣、葶苈子。以上中药从广州市药材公司荔湾分公司购买，前3味醋制后打粉，各1g混合装胶囊;后2味煎取含生药2kg/L的药液;地高辛口服片由杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司生产，批号为20021005;速尿片由上海复星朝晖药业有限公司生产，批号为030507;超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）试剂盒均由南京建成生物公司提供。
1.2 仪器与设备 日本光电公司产RM-6000四道生理记录仪;4F及5F介入用穿刺鞘管套装，由广州前茂医疗用品有限公司提供。
1.3 动物及分组 新西兰雄性兔，由本校实验动物中心提供，合格证号为粤检证字2003A001，体质量2.5～3kg。选用造模成功的新西兰兔20只随机分为4组:模型组、中药组、中西药组、西药组。其中中药组、西药组各按临床剂量经动物系数折算后 ［2］ 分别予以灌胃给药，中药组灌服强心方（2.6g/kg），西药（western medicine，WM）组灌服地高辛（20μg/kg）与速尿片混悬液（1mg/kg），中西药组则同时灌服强心方、地高辛和速尿片混悬液，模型组灌服等容积蒸馏水，1次/d，连续灌服1周为1个疗程。
1.4 造模与给药 新西兰兔称质量后兔盒固定，以30mg/kg的剂量耳缘静脉注入戊巴比妥钠麻醉。剪除兔颈部毛，用碘酒、酒精消毒后，分离右颈总动脉;然后用消毒棉线结扎右颈总动脉的近心端，带套血管夹夹住远心端，剪开血管插入4F或5F导管的鞘管，埋管扎线固定;接着进静脉穿刺管入鞘管中并插至主动脉瓣附近，根据生理记录仪所显示的波形，记录并计算心率（HR）、主动脉收缩压（SBP）、主动脉舒张压（DBP）、左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张压（LVDP）、左室内压最大上升速率（+dp/dt max ）、左室内压最大下降速率（-dp/dt max ）、左室内压最大变化速率（±dp/dt max ）等值;然后将导管退回至主动脉瓣瓣膜口处，将已标记长度的7F引导钢丝消毒后，沿静脉穿刺管穿插至主动脉瓣瓣膜口处，一次性用力捅穿瓣膜，并重新观测以上指标。模型成功判定标准 ［4］ 为（1）±dp/dt max 较前下降≥40%;（2）LVDP较前下降≥1/3。抽血检测SOD及MDA，然后撤出静脉穿刺管，留置儿科用4F、5F头皮针管，埋管缝合皮肤，局部喷撒青霉素钠溶液，同时1次性肌注肝素（0.045mg/kg）、青霉素钠注射液（80万U）。造模后6h灌胃给药，连灌1周。第8天，麻醉兔后重新检测m body 、HR、LVSP、LVDP、DBP、SBP、+dp/dt max 、-dp/dt max 、±dp/dt max 等值，并取兔耳缘静脉血，以3000r/min离心15min后，取上清液按试剂盒操作说明，以比色法测定血清SOD和MDA含量。
1.5 统计处理 使用SPSS10.0统计软件，组间比较采用方差分析。
2 结果
2.1 各组体质量与心率的比较 由表1可知，造模后体质量除西药组下降（P&<0.05）外，其他组未见显著性变化;而各组心率均呈下降趋势，其中以模型组和中药组下降较为明显（与造模前比较，P&<0.01），但各组间比较无显著性差异;经过1周治疗后，各给药组心率均无显著性改变（P&>0.05），即中、西药均未对模型动物心率产生显著性影响。
2.2 各组主动脉收缩压与舒张压、左心室收缩压与舒张压的比较由表2可知，经过1周治疗后，中西药组LVSP水平升高，与模型组比较具有显著性差异（P&<0.01）。
2.3 各组左室内压最大上升速率、最大下降速率和最大变化速率的比较由表3可知，经过1周治疗后，各给药组+dp/dt max 、-dp/dt max 、±dp/dt max 值均显著升高，与模型组比较具有显著性差异（均P&<0.05或P&<0.01）。
2.4 各组血清SOD、MDA水平的比较 由表4得知，模型组血清SOD水平降低，MDA水平升高（P&<0.01）;各给药组均可升高SOD水平，降低MDA水平，与模型组比较具有显著性差异（均P&<0.05或P&<0.01）。 表1 各组体质量与心率的比较表2 各组主动脉收缩压与舒张压、左心室收缩压与舒张压的比较表3 各组左室内压最大上升速率、最大下降速率和最大变化速率的比较 表4 各组对心衰模型兔血清SOD、MDA水平的影响 转贴于 3 讨论
CHF是多种心脏疾患的最后阶段。男性CHF患者生存期仅1.7年，女性也仅3.2年 ［3］ 。目前由于我国人民生活水平的普通提高，饮食结构的改变，CHF的发病率也逐年上升，所以如何建立一个与临床实际相符的心衰模型具有重要意义。
有文献报道 ［4］ ，家兔的心衰标准应以+dp/dt max ≤66.66kPa/s为宜，如果持续使+dp/dt max 水平降至40kPa/s以下，则模型兔虽可达到心衰水平，但往往导致病变不可逆，使家兔因抢救无效而死亡。我们经过多次摸索验证后认为该标准不够精确。因为每只兔最大上升速率及最大下降速率不尽相同，以一个固定的数值来确定其心衰标准不能充分说明问题。经多次摸索验证后，我们认为兔心衰标准应综合考虑以下两个参考标准:①±dp/dt max 较造模前下降≥40%;②LVDP较造模前下降≥1/3，这样才较为妥当。
强心方是著名西医结合">中西医结合专家陈镜合教授根据长期临床实践选用的一种起效快，以攻为主、攻补结合的中药复方制剂 ［5］ 。该方以十枣汤为基础方，以甘遂祛经隧水湿，大戟泄脏腑水湿，芫花消胸胁伏饮痰癖，又配以具苦降辛散之性的葶苈子清热平喘、利水消肿。由于以上诸药药性峻烈，易伤正 气，故本方又配以大枣甘温调胃，缓和诸药之峻烈及毒性，使攻不伤正，共奏攻补兼施之功。有研究表明 ［5］ ，由于长期的前后负荷过重，心肌张力显著升高，另外由于心肌肥厚，代偿机制中的Frank―Starling效应以及儿茶酚胺（CA）分泌增多均可加重心肌缺血。而心肌缺血首先使得细胞内一系列能催化氧自由基（OFR）产生的酶激活，从而引起细胞脂质过氧化损伤，使心肌细胞结构发生变性、坏死，心肌兴奋收缩耦联功能降低，心肌收缩力下降，最终导致CHF。过量的OFR作用于生物膜系统磷脂中的不饱和脂肪酸，产生一系列的脂质过氧化物（LPO），包括醛基（丙二醛，MDA）等，因此血液中起清除OFR作用的超氧化物歧化酶（SOD）及MDA含量的高低可以真实地反映机体脂质过氧化损伤的严重程度。从本文结果来看，心衰兔经过强心方治疗后，SOD酶活力均较前有明显上升，且脂质过氧化物MDA的积聚较前有明显减少，从而进一步证明该方具有一定的抗缺血、抗缺氧能力。±dp/dt max 、+dp/dt max 和-dp/dt max 的变化可敏感地反映心肌收缩力，SBP、DBP、LVSP、LVDP等指标也反映了心脏左室收缩、收缩期心房―室环移动的幅度，直观地表达了心脏心缩的整体动能状态。
本研究结果显示，与模型组相比，中药组、西药组、中西药组在1周的观察时间内，可以明显降低心衰兔的心率，提高心衰兔的左室舒张压，对代表心肌舒张和收缩功能的最大下降、上升速率两项指标也有良好的改善作用。尤其是中西药组，其体质量、LVDP、±dp/dt max 及-dp/dt max 等指标与模型组具有显著性差异。虽然各组均存在着体质量下降趋势，但以西药组最为明显，可见西药的副作用较为明显。以上结果证明了中药抗心衰的机制可能与直接加强心肌收缩力，扩张外周血管，减轻心脏前后负荷，从而改善心脏舒缩功能有关。也提示在心衰急症传统西药占优势的治疗领域中，中药复方的应用不但可以提高疗效，而且还能有效地减轻西药的副作用。
参考文献
［1］谢强，王萧.强心方对充血性心力衰竭的临床疗效观察［J］.临床军医杂志，2001，29（3）:34.
［2］徐叔云.药理实验方法学［M］.第2版.北京:人民卫生出版社，1985:456.
［3］ Joshi P P，Mohanan C J，Sengupta S P，et al.Factors precipitating congestive heart failure―role of patient non-compliance ［J］.J Assoc Physicians India，1999，47（3）:294.
［4］刘勤社，曹贵民，王朝宏.戊巴比妥钠致家兔心衰模型的方法 探讨［J］.陕西中医学院学报，1993，16（2）:38.
［5］王萧，谢强.强心方治疗充血性心力衰竭的临床观察［J］.中国自然医学杂志，2001，3（2）:78.
［6］孙文娟，刘洁，杨世杰，等.毒毛旋花子甙K对两种整体心衰模型的作用比较［J］.白求恩医科大学学报，1997，23（6）:617.转贴于