冠心舒对犬实验性心肌缺血及心肌氧代谢的影响

　　　　作者：于爽 察雪湘 冯国清 付润芳 黄晨征 李永军 胡香杰

【摘要】 　　目的 观察中药冠心舒对犬急性缺血性心肌的保护作用。方法 实验犬36只随机分为6组。通过结扎麻醉犬冠状动脉左前降支的方法，造成急性心肌缺血模型。经消化道给药后，测定心率、平均动脉压和冠脉血流量以及动静脉血氧含量，计算心肌耗氧量。免疫组化测定冠心舒对心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛 （MDA）的影响。结果 与模型组相比，中药冠心舒能降低心肌缺血犬的心率，使心肌耗氧量下降，增加其平均动脉压及心肌冠脉血流量，增加血供（P＜0.05，P＜0.01）。冠心舒能提高心肌SOD的含量，降低MDA的量（P＜0.05，P＜0.01）。结论 冠心舒能增加缺血心肌血供、降低氧耗，并有抗氧化作用。

【关键词】 冠心舒；犬；冠脉结扎；心肌缺血；心肌耗氧量

　　冠心舒主要成分为三七、丹参、黄芪等，具有益气活血、养心止痛等功效。本实验通过冠状动脉分支结扎法，复制麻醉犬心肌梗死模型，观察其对缺血心肌的保护作用。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 动物

　　杂种犬36只，体重（12.98±1.97）kg，雌雄各半。自由饮食，实验室温度控制在22℃～25℃，通风良好，湿度55%～60% ，正常饲养3 d后供实验用。

　　1.1.2 药品与试剂

　　冠心舒由郑州高新区义康药物研究所提供，批号：041125，每支含生药4.872 g。复方丹参滴丸（每丸27 mg）天津天士力制药股份有限公司出品，批号20040603；戊巴比妥钠，上海国药集团化学试剂有限公司出品，批号 F20041117；肝素钠，上海国药集团化学试剂有限公司出品，批号 F20040924。

　　1.1.3 仪器

　　可控人工呼吸机(上海)；MP150数据采集系统(美国BIOPAC公司)；JR6F心脏造影导管(美国Coydis公司)。

　　1.2 方法

　　1.2.1 分组

　　36只犬随机分为假结扎组、模型组、复方丹参滴丸（阳性对照药物）组、冠心舒大、中、小3个剂量组。

　　1.2.2 给药方法〔1〕

　　除假结扎组和模型组只喂食、水外，冠心舒按生药计算，大、中、小剂量组分别灌胃给予2.92、1.4、0.73 g·kg-1·d-1，复方丹参滴丸给药量按0.04 g·kg-1·d-1计算，药物每日量分2次喂服，连续5 d。

　　1.2.3 犬心肌缺血模型制备〔2〕

　　给药后各组犬静脉注射戊巴比妥钠(30 mg/kg)，麻醉固定于手术台上。 连续监测肢体Ⅱ导联心电图和心率(HR)；分离右侧股动脉、股静脉，0.5%肝素钠体内抗凝：股动脉插管连续监测动脉血压(BP)，股静脉建立输液通道。分离气管并插管，行人工呼吸机正压呼吸（频率16～18次/min，吸气∶呼气比1∶1.5，潮气量350～550 ml）；于胸骨左缘第3、4肋间开胸，打开心包膜，暴露心脏。分离左冠状动脉左旋支，连接血流量计，测定冠脉血流量；分离左冠脉前降支第一分支下方2 mm，除假结扎组只穿线不结扎外，其余各组均穿入两条1号丝线，一期结扎前5 min，静脉滴入利多卡因2 mg/kg。一期结扎时将一根直径为1 mm的9号针头置于结扎线和血管之间，结扎后将针头抽出，造成血管狭窄；30 min后，用第二条丝线进行血流阻断的二期结扎，完成模型的制备。

　　1.3 HR、平均动脉压（MAP）及冠状动脉血流量(CBF)测定

　　分别于结扎前、一期结扎10 min、二期结扎即刻、15 min、30 min、60 min、120 min测定并记录。

　　1.4 心肌耗氧量测定〔3，4〕

　　结扎前和二期结扎120 min时分别于冠状窦（静脉血）、颈总动脉各取血1 ml，测定血氧饱和度，按公式计算各组心肌耗氧量：心肌耗氧量（ml·min-1·100 g-1)=冠状动脉血流量(ml/min)×〔动脉血氧(ml%)-冠状窦血氧(ml%)〕÷100 g心肌重量。

　　1.5 心肌组织抗氧化酶测定

　　二期结扎120 min后立即取出心脏，用冰生理盐水冲洗、吸干、称重后取左心室心尖部心肌组织1 g，以生理盐水为介质，用匀浆器制成10%心肌组织匀浆，测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。

　　1.6 统计学处理

　　计量资料以x±s表示，采用统计软件SPSS 10.0进行方差齐性检验及两样本间的t检验。

　　2 结果

　　2.1 冠心舒对犬HR、MAP及CBF的影响

　　冠脉左前降支结扎前各组HR、MAP和CBF均无明显差异。冠脉结扎120 min后模型组与假结扎组相比，HR明显增快、MAP降低、CBF降低(P＜0.01）。与模型组相比，冠心舒大、中剂量组心率均变慢、小剂量组无变化；冠心舒各剂量组MAP、CBF均较模型组增加(P＜0.05，P＜0.01)。见表1。表1 冠心舒对犬HR、CBF、MAP的影响(略)

　　2.2 冠心舒对心肌耗氧量的影响

　　与假结扎组相比，模型组心肌耗氧量显著升高(P＜0.01)；而丹参滴丸与冠心舒大、中、小各剂量组心肌耗氧量均显著低于模型组。见表2。

　　2.3 冠心舒对心肌组织中SOD及MDA的影响

　　模型组与假结扎组相比心肌组织中SOD含量显著降低（P＜0.01），MDA含量显著升高（P＜0.01），而丹参滴丸与冠心舒大、中、小各剂量组心肌组织中SOD含量显著高于模型组（P＜0.05，P＜0.01），MDA含量显著降低（P＜0.05，P＜0.01）。见表2。表2 冠心舒对心肌耗氧量、SOD、MDA的影响(略)

　　3 讨论
　　
　　心肌缺血的最根本防治措施仍是改善冠状动脉血流，改善心脏供血，减少心脏的负荷和心肌耗氧量。本研究发现：结扎麻醉犬冠脉前降支后，犬心肌局部缺血、缺氧，组织供氧量减少。冠心舒能升高血压，扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量，使缺血心肌的供血增加。研究也发现冠心舒能使心率下降，心肌耗氧量降低，从而改善缺血心肌供氧/需氧失衡状态，达到改善心肌缺血缺氧的作用。
　　
　　目前已知心肌缺血的发病机制与氧自由基大量产生、脂质过氧化等因素有关〔5〕。本研究表明，冠心舒能明显提高自由基清除剂SOD 的含量，增强内源性氧自由基清除系统的功能，并明显减少脂质过氧化产物MDA 水平，保护缺血心肌组织免遭自由基损害，是其保护心肌细胞的机制之一。

参考文献

　　1 陈奇.中药药理研究方法学〔M〕.北京:人民卫生出版社，1996：4069.

　　2 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学〔M〕.第3版.北京:人民卫生出版社，2002：9651058.

　　3 周乐全，陈静平，罗荣敬，等.心痛乐对犬实验性心肌缺血及心肌氧代谢的影响〔J〕.现代西医结合">中西医结合杂志，2001;10（11）：100911.

　　4 李杨，赵丹，刘喜春，等.通脉益心胶囊对心肌缺血犬心功能、冠脉流量及超微结构的保护作用〔J〕.白求恩医科大学学报，2000;26（1）：710.

　　5 曹晓岚，任丽，臧运华.溶栓颗粒对脑缺血再灌注大鼠SOD、MDA的影响〔J〕.中西医结合心脑血管病杂志，2005;3(2):1434.