调脂康胶囊不同提取部位对高血脂大鼠脂质水平的影响

　　　　　　 作者：姚红霞，王亮，杨超燕，韦燕萍，唐春萍

【摘要】 目的 探讨调脂康胶囊对高血脂大鼠脂质水平影响的有效部位。方法 采用饮食性高血脂大鼠模型，用极性由小到大的3种有机溶剂和水依次萃取调脂康胶囊，所得各提取部位组分别给大鼠ig给药，测定血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和肝脏TG、TC的变化。结果 大鼠灌高脂乳剂4周后，模型组大鼠血清TC、TG、LDLC均较正常组明显升高，肝中TC、TG均明显升高;给药4周后，调脂康胶囊氯仿提取部位组、乙酸乙酯提取部位组、正丁醇提取部位组、水部位组、全方组均能显著降低血清TC、LDLC水平(P<0.05或P<0.01);正丁醇提取部位组、全方组能显著降低血清TG水平;正丁醇提取部位组能显著降低TC、TG、LDLC，且与全方比较差异无显著性 (P>0.05);正丁醇提取部位组、水部位组、全方组与模型组比较，肝中TC明显降低(P<0.05或P<0.01)，乙酸乙酯提取部位组、全方组与模型组比较，肝中TG明显降低(P<0.05)。结论 调脂康胶囊乙酸乙酯和正丁醇提取物对高血脂大鼠有降脂作用。

【关键词】 调脂康胶囊;高血脂症模型;有效部位

)Abstract:Objective To study lipidlowering effects of extractions of Tiaozhikang capsules extracted with chloroform，acetic ether，nbutyl alcohol，water.Methods Extractions of Tiaozhikang capsules were extracted with four organic solvents in sequence according to their polarities from higher to lower. Then the extractions were intragastrically administered to dietinduced hyperlipidemic rats，and changes in serum triacylglycerol level (TG)，serum total cholesterol level (TC)，serum high density lipoprotein cholesterol level (HDLC)，low density lipoprotein cholesterol level (LDLC)，liver triacylglycerol level，and liver total cholesterol level were measured.Results 72 Sprague Dawley (SD) rats were administered with high fat emulsion for four weeks，and serum TG level，serum TC level，serum LDLC level，liver TC level，and liver TG level were higher than those in the control group. Serum TC levels and serum LDLC level in the groups administered intragastrically with extractions of Tiaozhikang capsules respectively extracted with chloroform，acetic ether，nbutyl alcohol，water，and Tiaozhikang capsules decreased significantly (P<0.05 or P<0.01); serum TG levels in the groups intragastrically administered with extractions ofTiaozhikang capsules extracted with nbutyl alcohol and Tiaozhikang capsules decreased significantly; serum TC level，serum TG level，serum LDLC level decreased significantly in the group intrastrically administered with extractions of Tiaozhikang capsules extracted with nbutyl alcohol，and the decline was statistically insignificantly with P>0.05 compared with that intragastrically administered with Tiaozhikang capsules; liver TC levels decreased in the groups intragastrically administered with extractions of Tiaozhikang capsules extracted with nbutyl alcohol，water，and Tiaozhikang capsules compared with model group (P<0.05 or P<0.01); liver TG levels in the groups intragastrically administered with extractions of Tiaozhikang capsules extracted with acetic ether and Tiaozhikang capsules decreased significantly compared with that in model group (P<0.05).Conclusion Extractions of Tiaozhikang extracted with acetic ether and nbutyl alcohol had lipidlowering effects on dietinduced hyperlipidemic SD rats.

　　Key words:Tiaozhikang capsules;dietinduced hyperlipidemia;extraction

　　高脂血症是一种常见病、多发病，是心脑血管疾病的独立危险因子。目前治疗高脂血症的中药较多，但发挥药效的具体成分尚未明确。调脂康胶囊(原名调脂灵)是我院郭姣教授在多年反复临床实践基础上总结并经临床证实疗效确切而无明显毒副作用的一种纯中药复方制剂，由女贞子、白术、三七、丹参、黄连等组成，前期的研究工作表明该方有明显的降低总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、apoB及升高高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、载脂蛋白A Ⅰ(apoA Ⅰ)、脂蛋白酯酶(LPL)、肝脂酶(HL)的作用[1]，但其治疗高脂血症的物质基础仍不清楚。本研究采用饮食性高脂血症大鼠模型，通过研究调脂康胶囊不同提取部位对饮食性高脂血症大鼠血清TC、TG及LDLC、HDLC和肝中TC、TG的影响，初步明确其调血脂的主要物质基础。

　　1 试验材料

　　1.1 试剂

　　脱氧胆酸钠(中国医药集团上海化学试剂公司，批号F20080621);丙硫氧嘧啶(广东华南药业有限公司，批号0806012);胆固醇(天津市大茂化学试剂厂，批号080619);吐温80(上海审宇医药化工有限公司，批号081001);1，2丙二醇(广州化学试剂厂，批号200811021);TC试剂盒(中生北控科技股份有限公司，批号 081091);TG试剂盒(中生北控科技股份有限公司，批号 081171);HDLC试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号 081181)。

　　1.2 药物

　　调脂康胶囊，内容物为棕褐色粉末，1.848 g生药/粒，批号：080520，广东药学院药物研究所提供;非诺贝特微粒化胶囊(法国利博福尼制药公司，批号79498)。

　　1.3 主要仪器

　　RE52AA旋转蒸发器(上海嘉鹏科技有限公司);DKS26型电热恒温水浴锅(上海精密实验设备有限公司); 低温高速离心机(上海安亭科学仪器厂，型号TGL16G);UV1800紫外可见光光度计(北京瑞利分析有限公司)。

　　1.4 实验动物

　　SD大鼠，合格证号2008A020，雌性，体质量180～220 g，广东省医学实验动物中心提供，符合SPF级标准，正常饲养3 d后供试。

　　2 方法

　　2.1 调脂康胶囊不同萃取部位制备

　　取调脂康胶囊内容物665 g，加入10倍量95%(φ)乙醇提取2次，合并提取液。提取液减压浓缩成浸膏，浸膏用热水分散，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩，即得到不同的萃取部位：石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水提取部位，各部位每毫升相当于原生药0.6 g。

　　2.2 动物分组与模型建立

　　取SD大鼠72只，按体质量随机分成9组，即正常对照组、高脂乳剂组(模型组)、高脂乳剂+非诺贝特组、高脂乳剂+石油醚部位组、高脂乳剂+氯仿部位组、高脂乳剂+乙酸乙酯部位组、高脂乳剂+ 正丁醇部位组、高脂乳剂+水部位组、高脂乳剂+调脂康全方组，每组8只。除正常对照组自由摄取普通饲料外，其余组分别在此基础上每天上午按10 mL/kg量灌胃给予高脂乳剂，4 h后给予相应的药物，正常组、模型组给予等量生理盐水，连续给药4周，于末次给药1 h后(实验前禁食不禁水12 h)从大鼠眼眶静脉丛取血，离心、分离血清，以酶法测定血清TC、TG，以磷钨酸镁沉淀法测定血清HDLC，计算LDLC。然后脱臼处死大鼠，立即摘取肝脏，称取相同部位组织0.5 g，并剪碎，用提取液(氯仿∶甲醇=1∶1体积比)制成匀浆后，提取液定容至5 mL，混匀。经24 h不断震荡抽提，最后3 000 r/min离心5 min得上清液，采用氧化酶法测定TC，采用磷酸甘油酶比色法测定TG。

　　2.3 统计学处理

　　采用SPSS13.0统计软件，实验数据用(±s) 表示，两组均数间比较采用t检验，以P<0.05为差异有显著性。

　　3 结 果

　　3.1 调脂康胶囊不同提取部位对饮食性高脂血症大鼠血脂水平的影响

　　表1结果表明，模型组血清TC、TG、LDLC水平比正常对照组明显升高，HDLC比正常对照组明显降低，表明高血脂模型造模成功。给药4周后，调脂康胶囊氯仿萃取部位组、乙酸乙酯萃取部位组、正丁醇萃取部位组、水部位组、全方组均能显著降低血清TC、LDLC水平(P<0.05或P<0.01);正丁醇提取部位组、全方组能显著降低血清TG水平;非诺贝特组能非常显著降低血清TC、TG、LDLC水平及升高HDLC水平。正丁醇提取部位组能显著降低TC、TG、LDLC水平，且与全方比较差异无显著性 (P>0.05)。

　　3.2 调脂康胶囊不同提取部位对饮食性高脂血症大鼠肝脂质水平的影响

　　3.2.1 肉眼观察 正常对照组大鼠肝脏大小正常，外观光滑，呈鲜红色;模型组大鼠肝脏体积增大，呈土黄色，油腻感，肿胀程度明显，为脂肪肝外观;其余各给药组大鼠肝脏颜色，质地较模型组有明显改善，无明显病变迹象。见图1。表1 调脂康胶囊不同提取部位对饮食性高脂血症大鼠血脂水平的影响

　　3.2.2 肝脏脂质变化 结果如表2所示，高脂模型组肝中TC、TG均明显升高;正丁醇萃取部位组、水部位组、全方组与模型组比较，TC明显降低(P<0.05或P<0.01);乙酸乙酯萃取部位组、全方组与模型组比较，TG明显降低(P<0.05)，表明正丁醇萃取部位组、水部位组、全方组能减少TC在肝脏中的沉积，其中正丁醇萃取部位组降肝中TC作用较强，与全方比较差异无显著性 (P>0.05);乙酸乙酯萃取部位组降低肝脏中的TG沉积，与全方比较差异无显著性 (P>0.05)。表2 调脂康胶囊不同提取部位对饮食性高脂血症大鼠肝组织中TC、TG的影响与正常组比较:▲ P<0.05，▲▲P<0.01;与模型组比较:﹡P<0.05，**P<0.01

　　4 讨 论

　　中药具有多环节、多靶点且副作用少等治疗优势，但中药尤其是复方发挥作用的具体成分尚未明确，一直困扰着中医药走向世界。本研究以调脂疗效明确的临床经验方调脂康为研究对象，采用不同极性溶剂萃取，选择血清和肝中脂质水平变化为药效学指标，研究石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位调脂作用。研究结果表明，正丁醇提取部位组能显著降低血清TC、TG、LDLC，且与全方比较差异无显著性，提示该部位作用强度等同全方，并且正丁醇提取部位组降低肝中TC的作用较强，与全方比较差异无显著性;乙酸乙酯提取部位组降低肝脏中的TG沉积，与全方比较差异无显著性。表明正丁醇提取部位可能是代表全方影响高脂血症动物模型的血脂水平的主要部位。

　　调脂康由女贞子、白术、三七、丹参、黄连组成。现代药理学研究表明，女贞子能降低喂饲胆固醇和猪油家兔的血清胆固醇及三酰甘油，可预防和消减动脉粥样硬化斑块，减轻斑块厚度，减少冠状动脉粥样硬化病变数，降低血管的阻塞程度[2];白术可使自发性高血压脑卒中大鼠TG明显降低，体质量增长受到抑制，脂肪沉着量减少[3];三七能降低血清总胆固醇，对主动脉壁的总胆固醇和总脂质也有减少作用，使斑块消退[4]。丹参所含的丹参素能降低血液中的三酰甘油和总胆固醇含量，抑制低密度脂蛋白的形成[5];黄连的主要成分为小檗碱，能明显降低血清TG、TC及VLDLC的含量[6]。实验结果表明，调脂康正丁醇、乙酸乙酯部位能明显降低血脂和肝中TC、TG，故可推测正丁醇部位、乙酸乙酯部位是调脂康胶囊发挥调脂功效的主要物质基础，即发挥调脂功效的物质的极性主要集中在乙酸乙酯和正丁醇部分的极性较大的区间，该极性区间的物质可能主要是三七皂苷类、丹参水溶性物质、小檗碱等，具体有效成分有待进一步探讨。

参考文献

　　[1] 唐春萍，郭 姣，杨超燕.调脂灵对高脂血症大鼠脂代谢酶及载脂蛋白的影响[J].广东药学院学报，2007，23(3)：175-177.

　　[2] 孙玉文，张英杰.女贞子治疗高脂血症及其实验研究[J].中医杂志，1993，34(8):493-494.

　　[3] 贺玉琢 摘译.五苓散预防脑中风的效果(2)[J].国外医学:中医中药分册，1996，18(1):41.

　　[4] 严学维.三七总苷片对高血粘度、高脂血症的疗效观察[J].上海中医药，1999，6(5):19.

　　[5] 胡小戎，曹凤梅.丹参的药理、临床应用与制剂研究[J].中国新医药，2003，2(6):54-56.

　　[6] 宋鲁成，陈克忠，朱家雁，等. 黄连对大鼠高血脂脂质过氧化物、血脂及体外血栓形成的影响[J].陕西中医，1996，17(3):137