复方贞术调脂方化学成分研究(Ⅰ)

　　　　　　 作者：谢蓉蓉，郭姣，张德志，严春艳

【摘要】 目的 研究复方贞术调脂方(FTZ)石油醚提取部位的化学成分，阐明FTZ的药效作用物质基础。方法 运用硅胶柱色谱对FTZ进行系统分离，根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果 分离得到7个化合物，分别鉴定为腊醇(1cerotol，1)，β谷甾醇(βsitosterol，2)，正二十六烷酸(hexacosanoic acid，3)，白术内酯Ⅲ(atractylenolideⅢ，4)，3O乙酰基齐墩果酸(3Oacetyl oleanolic acid，5)，齐墩果酸(oleanolic acid，6)，柠檬油素(citropene，7)。结论 化合物1～7均为首次从FTZ中得到。

【关键词】 复方贞术调脂方;化学成分;结构鉴定

　　Abstract:Objective To investigate the chemical constituents from compound Zhenzhu Tiaozhi(FTZ) petroleum ether extract.Methods Repeated silica gel chromatographies were employed for the isolation. IR，MS and NMR were used to elucidate their structures.Results Seven compounds were obtained and identified as，1cerotol(1)，βsitosterol(2)，hexacosanoic acid (3)，atractylenolide Ⅲ(4)，3Oacetyloleanolic acid(5)，oleanolic acid(6)，citropene(7) .Conclusion All the compounds were isolated from FTZ for the first time.

　　Key words:compound Zhenzhu Tiaozhi;chemical constituents;structure identification

　　复方贞术调脂方(FTZ)是由多味中药组方而成的降血脂的方剂。文献报道此方对于饮食性高脂血症大鼠肝脂酶有调节作用[1]，对非酒精性脂肪肝也有较好的防治作用[2]。为了阐明FTZ的药效物质作用的基础，本实验对复方贞术调脂方石油醚部位的化学成分进行系统的分离分析研究，从中分离得到7个成分：腊醇(1cerotol，1)，β谷甾醇(βsitosterol，2)，正二十六烷酸(hexacosanoic acid，3)，白术内酯Ⅲ(atractylenolideⅢ，4)，3O乙酰基齐墩果酸(3oacetyl oleanolic acid，5)，齐墩果酸(oleanolic acid，6)，柠檬油素(citropene，7)。以上化合物均为首次从FTZ中得到。

　　1 仪器和材料

　　FTZ浸膏由广东药学院中医药研究院提供。Kafler显微熔点测定仪(温度未校正，北京泰克仪器有限公司)，PerkinElmer Spectrum100型傅立叶变换红外光谱仪(KBr压片)，BRUKER AV 500 MHz超导核磁共振波谱仪(TMS内标)，柱色谱硅胶(200～300目，青岛海洋化工厂)，薄层色谱硅胶(G、H、GF254，青岛海洋化工厂)。薄层色谱检测用254 nm，365 nm紫外灯、固体碘和质量分数10%硫酸乙醇溶液。所用试剂均为分析纯。

　　2 提取分离

　　取FTZ浸膏8.5 L，用4倍量的体积分数95%的乙醇醇沉，静置24 h，醇沉液浓缩，然后依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取。石油醚部位浸膏18 g，拌200～300目硅胶上柱，用石油醚乙酸乙酯(体积比100∶1→0∶1)进行梯度洗脱，TLC薄层检识，合并相同部分，经反复硅胶柱柱色谱和重结晶得化合物得到化合物1-7。

　　3 结构鉴定

　　化合物1：白色片状固体(石油醚乙酸乙酯)，mp 76～78 ℃，IR(KBr) λ/cm-1: 3 306，2 917，2 848，1 473，1 462，1 122，1 072，1 061，730，719。1HNMR(CDCl3，500 MHz) δ：0.88(3H，t，J=7 Hz，CH3)，1.59～1.25(m， 48H，Ch3)， 3.65(2H，t，Ch3OH)。

　　13CNMR(CDCl3，500 MHz) δ：63.1(—Ch3OH)，32.8(—Ch3Ch3OH)，31.9(—Ch3Ch3Ch3OH)，29.7(—Ch3-)，14.1(—CH3)，以上波谱数据与文献[3]对照一致，故鉴定化合物为正二十六烷醇(腊醇，1cerotol)。

　　(Ⅰ) 化合物2：白色针状结晶(石油醚乙酸乙酯)，mp 138 ～140 ℃。IR ( KBr) λ/cm-1：3 435，2 937，2 867，640。用质量分数10%的硫酸乙醇110 ℃显示紫红色。与β谷甾醇对照品共薄层展开显示一个斑点，混熔点不降，故确定化合物2为β谷甾醇。

　　化合物3：白色片状固体(石油醚乙酸乙酯)，mp 79～80 ℃，IR(KBr) λ/cm-1: 3 434，2 917，2 849，1 707，1 472，1 463，1 297，1 072， 729，719。1HNMR(CDCl3，500 MHz)δ：0.89(3H，t，J=6.5 Hz，CH3)，1.25(m，46H，Ch3)，1.65(2H，q，—Ch3—Ch3—CO)，2.35(2H，t，J=7.5 Hz，Ch3—CO)。以上波谱数据与文献[4]对照一致，故鉴定化合物为正二十六烷酸(hexacosanoic acid Ⅲ)。

　　化合物4：白色针晶(石油醚乙酸乙酯)，mp 199～202 ℃，ESIMS m/z：271[M+Na]+，IR(KBr) λ/cm-1:3 351，1 743，1 701，1 641，944，921。 DEPT谱显示有6个Ch3，3个CH3和CH，6个季碳。1HNMR(CDCl3，500 MHz)δ：1.59(br，d，J=11 Hz，H-1)，1.64(m，H-2)，2.37(br，d，J=11 Hz，H-3)。

　　13CNMR(CDCl3，500 MHz)δ：41.3(C-1)，22.3(C-2)，36.1(C-3)，148.6(C-4)，51.7(C-5)，24.7(C-6)，161.3(C-7)，103.9(C-8)，51.1(C-9)，36.7(C-10)，121.9(C-11)，172.9(C-12)，8.2(C-13)，16.6(C-14)，106.8(C-15)，以上波谱数据与文献[5]对照一致，故鉴定化合物为白术内酯Ⅲ(atractylenolideⅢ)。

　　化合物5：白色针状晶体(石油醚-丙酮)，mp 265～266 ℃，ESIMS m/s：521[M+Na]+。IR(KBr) λ/cm-1:3 221，1 730，1 680，DEPT谱显示有10个Ch3，13个CH3和CH，9个季碳。1HNMR(CDCl3，500 MHz) δ：5.27(1H，t，J=3.5 Hz，H-12)，4.49(1H，t，J=9 Hz，H-3)，2.05(3H，s，OCOCH3)，0.74，0.85，0.86，0.90，0.93，0.94，1.12(each，3H，s)。13CNMR(CDCl3，500 MHz) δ：38.3(C-1)，27.6(C-2)，80.9(C-3)，39.2(C-4)，55.2(C-5)，18.1(C-6)，33.0(C-7)，38.0(C-8)，47.5(C-9)，36.9(C-10)，22.8(C-11)，122.5(C-12)，143.6(C-13)，41.5(C-14)，23.6(C-15)，23.5(C-16)，46.5(C-17)，40.8(C-18)，45.8(C-19)，30.6(C-20)，33.7(C-21)，32.5(C-22)，28.0(C-23)，16.6(C-24)，15.4(C-25)，17.2(C-26)，23.4(C-27)，171.0(C-28)，32.4(C-29)，21.3(CH3CO)，184.1(COCH3)。

　　化合物的红外光谱显示有羟基和羰基的存在，其13CNMR谱中共有32个碳信号，并显示有羧基(184.1)和一个乙酰基(171.0，21.0)存在，143.6和122.6的信号表明化合物结构中有碳碳双键，80.95的信号对应为连氧的次甲基，同时谱图中还有7个角甲基信号(其在谱中均对应为单峰)，由此推测该物为△12齐墩果酸类化合物。ESIMS m/z：521[M+Na]+，其分子离子峰为m/z 498，比齐墩果酸的分子量多42。以上波谱数据与文献[6]对照一致，故鉴定化合物为3O乙酰基齐墩果酸(3Oacetyl oleanolic acid)。

　　化合物6：白色无定形粉末(石油醚-丙酮)，mp 280～282 ℃，ESIMS m/z：479[M+Na]+，IR(KBr)λ/cm-1:3 439，2 942，1 692，DEPT谱显示有9个Ch3，12个CH3和CH，9个季碳。1HNMR(CDCl3，500 MHz) δ：5.28(1H，brs，12-H)，3.22(1H，m，3-H)，2.82(1H，m，18-H)，0.75(3H，s)，0.77(3H，s)，0.90(3H，s)，0.91(3H，s)，0.93(3H，s)，0.99(3H，s)，1.13(3H，s)。13CNMR(CDCl3，500 MHz) δ：38.3(C-1)，27.1(C-2)，79.0(C-3)，38.7(C-4)，55.1(C-5)，18.2(C-6)，33.0(C-7)，39.2(C-8)，47.6(C-9)，37.0(C-10)，22.9(C-11)，122.6(C-12)，143.5(C-13)，41.5(C-14)，27.6(C-15)，23.4(C-16)，46.4(C-17)，40.9(C-18)，45.8(C-19)，30.6(C-20)，33.7(C-21)，32.4(C-22)，15.5(C-23)，28.1(C-24)，15.3(C-25)，17.1(C-26)，25.9(C-27)，181.0(C-28)，32.5(C-29)，23.5(C-30)，以上波谱数据与文献[7]对照一致，故鉴定化合物为齐墩果酸(oleanolic acidⅥ)。

　　化合物7：白色晶体(石油醚乙酸乙酯)，mp 149～150 ℃，异羟酸铁反应呈阳性。IR(KBr) λ/cm-1: 1 711，1 611，1 496，1 455，1 421，1 222，1 153，818。1HNMR(CDCl3，500 MHz)δ：7.96(1H，d，J=10 Hz)，6.40(1H，d，J=2 Hz)，6.28(1H，d，J=2 Hz)，6.14(1H，d，J=10 Hz)，3.89，3.85(各3个H，s)。13CNMR(CDCl3，500 MHz)δ：163.7(s，C-2)，110.9(d，C-3)，138.7(d，C-4)，156.8(s，C-5)，94.8(d，C-6)，156.9(s，C-7)，92.7(d，C-8)，161.5(s，C-9)，103.9(s，C-10)，55.9(q，—OCH3)，55.8(q，—OCH3)，以上波谱数据与文献[8-9]对照一致，故鉴定化合物为5，7二甲氧基香豆素(柠檬油素，citropene)。

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