丹参川芎嗪治疗急性脑梗死及对血清IL6、MMP9水平的影响

　　　　 作者：张旭 江秀龙 陈兴泳 汪效松 雷惠新

【摘要】 　　目的 探讨丹参川芎嗪对急性脑梗死（ACI）患者血清白细胞介素6（IL6）、基质金属蛋白酶9（MMP9）水平的影响及临床疗效观察。 方法 选择95例发病<48 h的颈内动脉系统ACI患者，分为常规治疗组(n=46)、丹参川芎嗪治疗组（n=49）以及对照组（健康体检者，n=40）。于治疗前和治疗后第3，7，14天测血清IL6、MMP9水平，并进行神经功能评估等疗效观察。 结果 治疗前常规治疗组和丹参川芎嗪治疗组的 IL6、MMP9水平高于对照组（P<0.01），治疗后逐渐降低。治疗后第3，7天丹参川芎嗪组IL6、MMP9水平较常规治疗组明显降低(P<0.05)。丹参川芎嗪治疗组第7天，常规治疗组第14天血清IL6、MMP9水平与对照组无差异（P>0.05）。丹参川芎嗪治疗组出现进展型脑梗死比常规治疗组少；丹参川芎嗪治疗组总有效率（91.8％）高于常规治疗组（63.0％）。 结论 丹参川芎嗪可降低急性颈内动脉系统脑梗死患者血清IL6、MMP9水平，并可改善神经功能。

【关键词】 丹参； 川芎嗪； 急性病； 脑梗死； 白细胞介素6； 基质金属蛋白酶9
　　
　　ABSTRACT: Objective To investigate the effect of Tetramethyl pyrazine （TMPZ）on the levels of IL6， MMP9 of patients with acute cerebral infarction. Methods 95 patients with acute cerebral infarction of the internal carotid artery(ICA) system(<48 h) were selected randomly to TMPZ group (n=49) or control group (n=46) ， 40 health subjects were selected as normal controls. The serum levels of IL6、MMP9 were measured before treatment and 3th ， 7th， 14th day after treatment in both acute cerebral infarction groups and compared with health volunteers(normal group). The clinical therapeutic effect was evaluated by National Institute of Health Stroke Scale (NIHSS) . Results The serum levels of IL6、MMP9 in both TMPZ group and control group were remarkably higher than that in normal group (all P<0.01) before treatment ， and gradually decreased after treatment. In TMPZ group the serum levels of IL6 and MMP9 were significantly lower than those in control group at 3th，7th day after treatment(all P<0.05) and returned to normal earlier ，There was no significant difference of serum levels of IL6 and MMP9 between normal group and TMPZ group at 7th day or control group at 14th day after treatment(all P>0.05). The patients who experienced neurological worsening in the TMPZ group were fewer than those in the control group. The curative rate of the TMPZ group was higher than that of the control group. Conclusion TMPZ can significantly decrease the serum level of IL6，MMP9 in the patients with acute cerebral infarction of internal carotid artery system， and it is effective in treating acute cerebral infarction.
　　
　　KEY WORDS: salvia miltiorrhiza; tetramwthylpyraxine; acute disease; brain infarction； lnterleukin6;matrix metalloproteinase 9
　　
　　临床研究发现，炎症因子白细胞介素6（IL6）、基质金属蛋白酶9（MMP9）参与急性脑梗死（acute cerebral infarction， ACI）的发生发展过程并起重要作用。ACI时，神经组织损伤，小胶质细胞、淋巴细胞等释放IL6、MMP9等细胞因子介导的急性炎症反应构成缺血性脑血管病理反应的重要组成部分，并与神经功能恶化相关，影响ACI的病情及预后［1］。降低ACI患者IL6、MMP9水平，可起到保护神经功能作用。研究表明，丹参川芎嗪不仅具有血管平滑肌解痉作用，能增加冠状动脉和脑动脉血流量，改善心脑血液循环，还可抑制核因子κB（NFκB）表达［2］，NFκB表达增高与脑缺血损伤的炎症反应机制密切相关。为研究丹参川芎与抑制IL6、MMP9等细胞因子的关系，本课题观察笔者医院的95例ACI患者，比较常规治疗组和丹参川芎嗪组检测的血浆IL6、MMP9等炎症介质水平以及神经功能的影响，探讨丹参川芎嗪治疗脑梗死的机制。

　　1 对象与方法

　　1.1 对象

　　2009年5月-2010年6月在神经内科住院的ACI患者95例。所有患者均签署知情同意书，并符合下列标准：符合全国第四界脑血管病学术会议修订的诊断标准［3］，均经头颅CT或MRI证实，病程<48 h，首次发病，根据临床症状及影像学表现判定为颈内动脉系统脑梗死；美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分至少>1分。排除标准：排除近期内感染性疾病、免疫性疾病及慢性肝肾功能不全的笔者，排除NIHSS<1分，及危重病人迅速出现脑疝者的ACI患者。 进展性脑梗死的诊断标准为：入院后<7 d临床症状加重，NIHSS增加2分以上［4］，除外脑梗死后出血，发生其他新梗死灶或因严重的感染、高热、心功能不全所致的病情进展。
　　
　　全部病例按入组的先后根据随机数表分为常规治疗组和丹参川芎嗪组。常规治疗组：男性26例，女性20例，年龄（63.2±19.4）岁（50～78岁）；伴有高血压23例，糖尿病13例，高脂血症16例，治疗前NIHSS评分（7.37±4.1）分（3～17分）。丹参川芎嗪组：男性27例，女性22例，年龄（61.8±20.1）岁（48～83岁）；伴有高血压26例，糖尿病13例，高脂血症15例，治疗前NIHSS评分（8.15±4.78）分（4～18分）。另外选择40名来自体检中心的健康者为对照组，男性22名，女性18名，年龄（57.4±20.2）岁（40～80岁），无高血压、糖尿病、高血脂及脑卒中病史。3组的一般资料具有可比性。

　　1.2 方法

　　1.2.1 治疗方法

　　常规治疗组采用常规基础疗法，有高血压者应用降压药，中重度脑梗死和关键部位脑梗死患者静脉滴注适量20%甘露醇，并予拜阿斯匹林100 mg/d口服，有进展性脑梗死患者，根据病情给予东菱克栓酶（批号：国药准字h30030295，北京托毕西药业有限公司）降纤治疗（东菱克栓酶5 IU+0.9%生理盐水250 mL静脉滴注，隔天1次，每天3次）。丹参川芎嗪组在采用常规基础疗法的基础上加用丹参川芎嗪注射液（批号：国药准字H52020959，贵州拜特制药有限公司），每次10 mL(盐酸川芎嗪400 mg与丹参素8 mg)加入5%葡萄糖注射液或者0.9％氯化钠注射液100 mL缓慢静脉滴注，每天2次，14 d为1个疗程。

　　1.2.2 IL6、MMP9检测

　　ACI患者于治疗前及治疗后3，7，14 d清晨取空腹静脉血3 mL于干管中，以3 000 r/min离心10 min后获得上清液，置-70 ℃保存待测。IL6、MMP9检测使用芬兰丹尼WKⅡ型酶标仪、ELISA法测定，试剂盒由上海森雄科技实业有限公司提供。操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

　　1.3 病情及疗效判定

　　在患者发病第1，3，7，14天进行NIHSS评分。根据NIHSS评分差值比例分为治疗有效（减少>18%），无效（变化≤18%），恶化（增加>18%）。
　　
　　NIHSS评分差值比例=（发病第14天NIHSS评分-第1天的评分）/第1天的×100%

　　1.4 统计学处理

　　定量资料以x±s表示，采用SPSS 10.0统计软件处理。率的比较采用χ2检验，两组间比较采用t检验，多组间定量比较采用方差分析(F检验)。P<0.05为差别有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 一般情况

　　所有患者均完成治疗，无脱落。在治疗过程中，患者均无不良反应，血、尿常规，血糖，血脂及肝、肾功能无异常变化。

　　2.2 血清IL6、MMP9水平的比较

　　治疗前，丹参川芎嗪组和常规治疗组血清IL6、MMP9水平比较差别无统计学意义（P>0.05），且两组均显著高于对照组（P<0.01）。治疗后，两组患者血清IL6、MMP9水平逐渐降低，丹参川芎嗪组治疗后第3，7天血清IL6、MMP9水平显著低于常规治疗组（P<0.05）；治疗后7 d丹参川芎嗪组与对照组比较差别无统计学意义（P>0.05）。治疗后14 d，常规治疗组血清IL6、MMP9水平与对照组比较差别无统计学意义（P>0.05）。两组治疗前后比较见表1。表1 丹参川芎嗪组和常规治疗组患者治疗前后血清IL6、MMP9水平比较（略）

　　2.3 疗效比较

　　常规治疗组中，17例（36.96%）呈进展型脑梗死，其中9例加用东菱克栓酶治疗。丹参川芎嗪治疗组中，5例（10.2%）呈进展型脑梗死，其中2例加用东菱克栓酶治疗。丹参川芎嗪治疗组治疗>14 d NIHSS评分明显低于常规治疗组。丹参川芎嗪治疗组有效率91.8%，常规治疗组有效率63.0%，两组疗效比较差别有统计学意义(P<0.01，表2)。表2 丹参川芎嗪组和常规治疗组患者治疗14 d后 NIHSS比较（略）

　　3 讨论
　　
　　IL是细胞因子家族中主要成员，主要介导和调节免疫应答及炎症反应，刺激造血功能并参与组织修复等，其中IL6是重要的炎症介质之一。IL6通过诱导可溶性细胞间黏附分子1产生，可使嗜中性粒细胞粘附、聚集，致使脑血管闭塞，IL6还促进MMP9表达增高，加重血脑屏障破坏，通透性增加，加剧脑水肿，此外IL6在凝血和内皮损伤反应中有重要作用［58］。病理证实，ACI后缺血半暗带脑组织中表达IL6明显增高［9］。动物实验也证实，脑梗死后脑组织及血中IL6增高［10］。MMP9是一类能够降解细胞外基质、结构相似的一类蛋白酶的总称，其活性依赖于内源性Zn2＋及Ca2＋的存在。IL6、MMP9作为炎性因子网络的重要组成部分，在炎性反应的发生发展中扮演重要角色。研究认为，ACI后IL6、MMP9等炎症介质的释放，出现以急性炎症反应构成脑缺血病理反应的重要组成部分在脑损伤中起重要作用，与脑梗死进展相关，影响ACI的病情及预后［11］。
　　
　　脑梗死病灶周边存在的缺血半暗带是脑梗死现代治疗的基础，半暗带的损伤程度对后期神经功能的恢复起着决定性的作用，若能及时恢复血流和改善组织代谢，就可以抢救梗死周围仅有功能改变的损伤组织，避免形成坏死［12］。阿司匹林对血小板聚集有抑制作用，阻止血栓形成，能有效地减少缺血性脑血管病的再发生率及死亡率［13］， 是目前脑梗死常规用药之一。近年来，丹参川芎嗪已逐渐广泛运用于急性脑梗死治疗，取得良好的疗效。丹参川芎嗪治疗脑梗死药物机理主要在于该药含有丹参素和盐酸川芎嗪两种有效成份。丹参素为丹参中提取的化学成分，丹参素分子量为198.17 u，因分子量小，能透过血脑屏障；丹参素药理作用具有改善微循环，促进纤维蛋白溶解，降低全血黏滞度，改善血液流变性及微循环障碍等［14］。盐酸川芎嗪是从川芎的生物碱中提取的甲基吡嗪，命名为川芎嗪，为脂溶性成分，分子量208.69 u，也能够透过血脑屏障；川芎嗪药理作用具有扩张脑血管增加血流量、降低耗氧量、具有抗氧化、抑制自由基作用，减轻脑缺氧、缺血后再灌注的损伤、增加脑血流和活血化瘀作用［15］。
　　
　　本研究显示，脑梗死急性期血清IL6、MMP9水平明显升高，显著高于对照组（P<0.01）。治疗后下降，与常规治疗组相比，丹参川芎嗪组患者的血清IL6、MMP9水平升高持续时间短，且下降快；丹参川芎组治疗后第7天IL6、MMP9恢复正常，而常规治疗组第14天恢复正常。进展性脑梗死常与不良预后相关，丹参川芎嗪组发生进展性脑梗死明显低于常规治疗组，因此，丹参川芎嗪可作为进展性脑梗死有效的干预措施。此外，丹参川芎嗪可有效的改善ACI患者神经功能。本组资料显示，丹参川芎嗪治疗组NIHSS明显低于常规治疗组，有效率91.8%，而常规治疗组有效率为63.0%，两组疗效比较差异有显著性。推测，丹参川芎嗪可能通过降低患者血清IL6、MMP9水平，减轻IL6、MMP9引起的炎症反应，减少进展性脑梗死的发生，改善神经功能缺损。本研究两组病人均采用阿司匹林作为基础治疗，而丹参川芎嗪组加用丹参川芎嗪治疗后IL6、MMP9水平升高明显较常规组低，提示丹参川芎嗪具有抗血小板活化以外的功能。由于本研究样本还不是很大，远期结果有必要进一步做大样本的重复和证实。

参考文献

　　［1］江秀龙，张旭，雷惠新. 进展性缺血性脑卒中患者血IL6、TNFα、S100b蛋白水平的变化及临床意义［J］. 疑难病杂志， 2007，6(11):658661.

　　［2］秦爱菊，狄政莉，田晔，等. 川芎嗪对原代神经细胞缺血再灌注后核因子кB表达的影响及其意义［J］. 疑难病杂志， 2007，6(11):644645.

　　［3］全国第4届脑血管病学术会议. 各类脑血管疾病诊断要点［J］. 中华神经科学杂志， 1996，29(6):379380.

　　［4］全国第四届脑血管病学术会议. 卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准(1995)［J］. 中华神经科杂志， 1996，29(6):382．

　　［5］Selzner N，Selzner M，Odermatt B，et al. ICAM1 triggers liver regeneration through leukocyte recruitment and kupffer celldependent release of TNFalpha/IL6、MMP9 in mice［J］. Gastroemerology， 2003，124(3):692700.

　　［6］刘尊敬，杨期东，刘运海，等. 脑梗死患者血清IL6、MMP9和sICAM1变化及临床意义［J］. 中南大学学报医学版， 2004，29(3):326329.

　　［7］Kouwenhoven M，Carlstrom C，Ozenci V，et al. Matrix metalloproteinase and cytokine profiles in monocytes over the course of stroke［J］. J Clin Immunol， 2001，21(5):365375.

　　［8］Vilan N，Reverter J C，Yague J，et al. Interaction between interleukin6 and the natural anticoagulant system in acute stroke［J］. J Interferun Cytokin Res， 2000，20(3):325329.

　　［9］钟照平，李国忠，李呼伦. 人缺血脑组织中TNFα和IL1β的表达［J］. 细胞与分子免疫学杂志， 2003，19(4):349350.

　　［10］Offner H，Subramanian S，Parker S M，et al. Eperimental stroke induces massive， rapid activation of the peripheral immune system［J］. J Cereb Blood Flow Metab， 2006，26(5):654665.

　　［11］Vila N，Castillo J，Davalos A，et al. Proinflammatory cytokines and early neurological worsening in ischemic stroke［J］. Stroke， 2000，31(10):23252329.

　　［12］黄如训， 朱良付. 脑梗死急性期脑保护剂作用之浅见［J］. 临床急诊杂志， 2004，5(4):13.

　　［13］Awtry E H，Loscalzo J. Aspirin［J］. Circulation， 2000，101:12061218.

　　［14］杨继英．丹参素的药理作用研究进展［J］. 中华临床医学杂志，2007，8(4):4546.

　　［15］赵玉清. 磷酸川芎嗪注射液药理毒理研究综述［J］. 时珍国医国药， 2007，l8(7):17801781.