【摘要】 目的观察玉米苞叶煎剂对AS家兔血管外各器官病变的形态学影响。方法选用大耳白家兔，雌雄各半，随机分为对照组、高脂组、玉米苞叶煎剂组，复制高脂食饵性家兔AS模型，观察玉米苞叶煎剂预防性用药后对家兔血脂及内脏各器官的病理形态学影响。结果玉米苞叶煎剂组TC、TG较高脂组明显降低(P<0.01);高脂组各脏器(心、肝、脾、肺、肾)与对照组相比均有明显病理变化，玉米苞叶煎剂组各脏器病变较高脂组明显减轻。结论玉米苞叶煎剂不但可以减轻AS家兔血管病变，且对心、肝、脾、肺、肾各脏器的高脂损伤同样有干预作用。
【关键词】 玉米苞叶;动脉粥样硬化;高血脂;血管外器官
实验发现，玉米苞叶煎剂可通过降低家兔高血脂，升高高密度脂蛋白(HDL)〔1〕，调节 p53、 Fas和 Bcl-2基因的表达，影响平滑肌细胞的增殖与凋亡，发挥抗动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)和显著缩小AS斑块面积〔2〕的作用。本实验进一步观察玉米苞叶煎剂对AS家兔血管外脏器病变的影响。
1材料与方法
1.1玉米苞叶煎剂的制备选用洁净成熟的玉米苞叶晒干、切碎。 每克玉米苞叶加蒸馏水100 ml，浸泡3 h，煮沸3 h，过滤后浓缩至含玉米苞叶1.4 g/ml的淡黄色液体备用。
1.2AS模型建立与分组大耳白家兔30只，体重约2.5 kg，雌雄各半，随机分成对照组、高脂组和煎剂组，每组10只。三组家兔每日喂等量基础饲料，高脂组和煎剂组同时在饲料中加入猪油5 g，胆固醇(TC)0.5 g。对照组饮用自来水，煎剂组每日每只喂70 ml的玉米苞叶煎剂。
1.3试剂及检测方法血清总TC酶法测定试剂盒，购自中国科学院微生物所发酵工程部，甘油三酯(TG)酶法试剂盒购自北京化工厂临床试剂分厂。于实验第4、8周后，分别于兔耳缘静脉取血，测定血脂。8 w后将家兔处死，立即取主动脉、心、肝、脾、肺、肾进行病理学检查，上述脏器经10%甲醛固定后，各取组织块逐级酒精脱水，石蜡包埋，常规连续切片(厚5 μm)，行苏木精-伊红(HE)染色，Olympus光学显微镜下观察。
1.4主动脉病变及分级
参考文献
〔3，4〕，将主动脉分别进行大体及镜下病变分级。1.5统计学处理应用SPSS13.0统计软件，计量资料用x±s表示，各组间实验数据的比较采用两样本均数的t检验。
2结果
2.1对血浆TC、TG的影响实验的第4周、第8周时，两次取血测定血脂，煎剂组TC明显低于高脂组(P<0.01)，但高于对照组(P<0.01);煎剂组的TG明显低于其他两组(P<0.01)。见表1。
2.2对主动脉病理形态学影响主动脉大体所见，对照组动脉内膜粉白色，光滑有光泽，弹性好。高脂组的10例主动脉均可见动脉内膜颜色变浅，表面不光滑，有细颗粒感;其中7例内膜可见淡黄色斑点及斑纹，达2级病变;3例动脉内膜弥漫性增厚，局灶性颜色灰白，达3级病变。玉米苞叶煎剂组仅有2例动脉内膜发生0.5~1级病变。镜下观察可见对照组动脉壁组织结构清晰，内皮连续无缺损;高脂组内膜3例达3级病变，7例达2级病变;玉米苞叶煎剂组仅2例内膜下可见少量泡沫细胞。表1玉米苞叶煎剂对家兔血浆TC、TG的影响
2.3对内脏器官病理形态学的影响
2.3.1各组家兔内脏各器官大体观察对照组：心、肝、脾、肺、肾大体观察，未见异常变化。高脂组：心脏未见明显病理变化;全部肝脏体积不同程度增大，包膜紧张，边缘钝圆，切面油腻，呈淡黄色;全部脾脏体积增大，包膜紧张，边缘钝圆;6例肺脏可见局灶性充血水肿;全部肾脏体积增大，包膜紧张。玉米苞叶煎剂组：心脏未见明显病理变化;肝脏呈红黄点状 相间，体积与高脂组比略小;脾脏、肾脏与对照组相比肉眼变化不明显;肺脏充血水肿少见。
2.3.2各组家兔内脏各器官镜下观察对照组：心、肝、脾、肺、肾镜下观察，未见异常变化。高脂组：3例心外膜冠状动脉主干可见以泡沫细胞为主的脂斑形成，心内膜表面内皮细胞部分脱落，近心内膜处心肌细胞轻度脂肪变性，其余7例未见明显异常;全部肝脏肝小叶结构完整，肝细胞弥漫性体积增大，肝细胞胞浆内可见大小不一、数量不等的脂肪空泡，肝血窦枯否细胞增生活跃，体积增大，以肝腺泡3区最为明显，其中2例汇管区及小叶界板可见淋巴细胞、单核细胞浸润及少量纤维组织增生;全部脾脏血窦淤血，巨噬细胞增生，淋巴滤泡扩大，淋巴细胞增生，脾小动脉壁增厚，管腔狭窄，其中6例被膜下泡沫细胞堆积，1例小血管可见血栓形成;6例肺内小血管有AS改变，3例达3级病变，2例达2级病变，1例达1级病变，发生病变血管周围肺泡壁增厚，毛细血管扩张充血，1例小血管内可见脂肪栓塞，肺泡腔内有水肿液，周围肺组织可见局灶性代偿性肺气肿;全部肾脏肾小球内单核细胞浸润，系膜细胞增生，系膜基质增多，肾小管上皮细胞脂肪变性，管腔狭窄，甚至闭塞，1例肾小管周围毛细血管内微血栓形成，1例肾小管上皮细胞坏死。玉米苞叶煎剂组：心肌细胞变性及冠状动脉病变较高脂组明显减轻，心内膜完整;肝脏肝细胞变性程度较高脂组减轻，表现为脂肪变性肝细胞数目减少，肝细胞内脂肪空泡数量较少、体积减小，肝血窦枯否氏细胞数量减少，体积减小;脾脏血窦淤血减轻，巨噬细胞、淋巴细胞增生程度减轻，脾小动脉壁变薄，仅2例可见脾被膜下泡沫细胞积聚，且数量较高脂组明显减少;肺内小血管仅2例有AS病变，且病变轻，其中1例达2级病变，1例达1级病变，病变血管周围肺泡壁较高脂组变薄，毛细血管扩张也略减轻，未见脂肪栓塞、肺水肿、肺气肿;肾小球增生性反应较模型组减轻，少见单核细胞浸润，肾小管上皮细胞脂肪变性轻或正常，肾小管周围毛细血管未见微血栓形成。
3讨论
玉米苞叶是食用农作物玉米棒的外包叶片，不在中药药典记载。前期实验研究发现，玉米苞叶煎剂可降低家兔和鹌鹑的食饵性高血脂，升高HDL〔1〕。本实验在成功复制家兔早期AS模型的基础上观察发现，玉米苞叶煎剂能明显改善高脂模型组家兔主动脉内膜肉眼及镜下的AS早期病变，进一步显示出玉米苞叶具有明显的降血脂、抗AS的药效作用。杜兴贵对家兔实验性AS的血管及血管以外心、肝、脾、肺、肾等脏器，进行了系统的病理形态学观察，结果证实，高TC血症不仅可以复制AS模型，而且也可以导致多个内脏器官高脂血症的相应病变〔5〕。本实验玉米苞叶煎剂预防性用药后，动物血脂降低，动脉内膜的AS病变明显减轻，同时各脏器的高脂损伤程度与动脉的形态改变呈典型的相关性。高脂血症对血管的损伤是通过脂质氧化损伤机制产生的〔6〕，因此降血脂、控制氧化应激可抑制AS的发生和发展。而玉米苞叶总黄酮是一种较好的天然自由基清除剂〔7〕，具有较强的抗氧化能力，推测玉米苞叶煎剂减轻高脂血症引起的血管氧化损伤，延缓AS进程，可能主要是玉米苞叶总黄酮的保护血管内皮，阻断AS早期事件链的活性反应。本实验结果显示，高脂血症在致家兔AS的同时引起心、肝、脾、肺、肾脏器高脂损伤，动脉的病变程度与各器官组织细胞的高脂损伤状态有着明显的相关性，显示出高血脂氧化损伤时局部与整体的关系，玉米苞叶煎剂在改善AS病变的同时亦对血管外器官、组织的损伤发生相应的影响，有效改善其损伤程度，提示，在降血脂、干预AS进展的过程中，应注意到血管外器官、组织对抗高脂氧化损伤药物的反应，同时关注保护器官的药用效应。
参考文献
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