全自动加样系统出现样本拖带污染原因分析

【摘要】 目的：探讨全自动加样系统对检测结果准确性的影响。方法：将82份抗TP阳性标本OD值分3组：第1组OD值为0.105～1.000;第2组OD值为1.001～1.500;第3组OD值为1.500以上。将疑为拖带污染的标本进行双孔检测，分析拖带污染的原因。结果：82份阳性标本中，第1组20份(24.4%)，第2组20份(24.4%)，第3组42份(51.2%)，其中有拖带的标本22份(26.8%)，第2组2份(9.1%，2/22)，第3组20份(90.9%，20/22)。结论：全自动加样系统遇到高浓度抗原、抗体的标本加样时存在有拖带现象。

【关键词】 全自动加样系统;抗TP; 拖带;假阳性

　　[ABSTRACT] Objective: To investigate the effect of automatic sampling system on detection accuracy. Methods: pided 82 positive antiTP samples into 3 groups: the first group with OD 0.1051.000， the second group with OD 1.0011.500， and the third group with OD &>1.500. Made diplopore detection to suspected towing contaminative samples， and analyzed the possible cause. Results: 22 out of 82 samples showed towing phenomenon (26.8%)， including 2 samples in the second group (9.1%， 2/22) and 20 in the third group (90.90%， 20/22). Conclusion: Antigen and antibody at high concentration can lead to towing phenomenon in automatic sampling system.

　　[KEY WORDS] Automatic sampling system; AntiTP; Towing; False positive

　　为了保障临床用血安全，降低输血风险，全自动加样系统和全自动酶免分析系统在输血行业广泛使用，它能大大减少人为的误差，提高检测工作效率，增强结果可靠性和准确性。但由于RSP150加样仪的加样针是永久性加样针，当遇至强性标本加样时酶标板上该孔后同行相邻孔位出现拖带污染现象。笔者现就使用全自动加样系统RSP150进行样本处理时发生抗TP拖带现象报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 标本来源

　　选取2006年1月～2006年5月本中心无偿献血标本18 336 份，其中抗TP阳性82份。

　　1.2 试剂与仪器

　　加样系统及酶免分析系统为Genesis RSP150(瑞士帝肯公司)和BEPIII(德国贝灵)。ELISA试剂为两家不同厂家生物工程有限公司试剂。洗板机为美国BIOTEK公司及瑞士帝肯公司。酶标仪为ASCEN(雷勃公司)。

　　1.3 方法

　　抗TP一次检验、二次检验都使用ELISA方法，用不同厂家的试剂进行检测。两种试剂均呈阳性反应的标本有82份，根据OD值将82份标本分3组：第1组OD值为0.105～1.000;第2组OD值为1.001～1.500;第3组OD值为1.500以上。将疑为拖带污染的标本进行双孔检测。所有的酶联检测试验严格按照试剂说明书进行操作。

　　2 结果

　　ELISA 试剂都在有效期内使用，所有酶标板的阳性、阴性及室内质控均正常，COUFF值(二次检验)为0.105。82份抗TP阳性标本中第1组20份(24.4%)，第2组20份(24.4%)，第3组42份(51.2%)，其中有拖带的标本22份(26.8%)，第2组2份(9.1%，2/22)，第3组20份(90.9%，20/22)。

　　在酶标板上疑因高滴度阳性标本拖带污染该标本后面相邻孔位呈阳性反应。我们将有拖带污染的22组(同一行前后相邻呈连续阳性反应且前强后弱的2个或3个反应孔为一组)标本进行双孔检测，检测结果原为第1孔位的标本均阳性，第2孔位以及第3孔位的标本均为阴性。

　　3 讨论

　　本实验室后处理用BPIII全自动酶免分析系统，双排洗涤程序，且上述现象均为同行相邻孔污染，显然可排除洗板过程污染。Genesis ESP150系统的加样针是永久性加样针，不能实现一人一针加样。在正常情况下按照厂家和设备工程师的要求设置好仪器的参数后，一般不会发生加样的拖带现象。出现上述现象有可能是加样针反复使用造成外表不光滑和(或)针内壁可能附着血浆蛋白的污染，加上加强阳性标本的加样针未能彻底冲洗干净，造成了拖带污染。针对该种情况，除了做好仪器维护保养外，还在处理检测标本时按3 000 r/min离心15 min，调整RSP150相关参数，将加样本的后弃量由原来20 μL减至5 μL，可降低加样针中残留标本量在冲洗时降到最低水平，加大洗涤站的洗涤时间和洗涤量，来保证加样针冲洗干净。

　　目前本中心使用加样仪的洗涤站参数是洗液量为10 mL、冲洗时间是500 ms 、流速为120 μL/s、排水时间为500 ms。另外在日常的工作中，要做好室内质控并对每块酶标板的结果做出正确的分析，通过长期经验积累来解决实际工作中的问题，提高检测结果的可靠性。

参考文献