作者：龙桂先，谭雪微，蓝斯莉，黄英兰，何显教，黄彦峰，赵善民
【摘要】 目的 探讨锁阳水提取液对小白鼠心肌缺血的保护作用。方法 将小白鼠随机编号为1～40号，偶数为锁阳水提取液组，奇数为生理盐水组，两组连续灌胃16天，第16天尾静脉注射垂体后叶素后，尾部负载体重5%，分别放入10℃冷水、38℃温水中，记录其游泳耐力时间。结果 锁阳水提取液组在38℃温水中游泳耐力时间比生理盐水组长（P＜0.05）。结论 锁阳水提取液对垂体后叶素导致小白鼠心肌缺血有一定的保护作用。
【关键词】 锁阳；心肌缺血；游泳耐力；小白鼠；动物，实验
锁阳(Cynomorium songaricum Rupr，CSR)又名锈铁棒，不老药，具有补肾阳、益精血、调肠通便等功效。现代医学研究发现锁阳还具有多种药理活性，如提高免疫功能，抗缺氧、抗应激作用，抑制血小板聚集，抗癌及抑制艾滋病病毒的增殖等作用［1］。心肌缺血的病例在现实生活中很常见，因心肌缺血而卒死是临床上心血管病常见的死因之一。心肌缺血时自由基增多［2］，可加重缺血心肌的损伤程度。为了降低心肌缺血的发病率，降低死亡的风险，人们正在积极寻找保护和治疗心肌缺血的药品。为探讨锁阳抗缺氧、消除自由基作用，笔者通过注射垂体后叶素致心肌缺血后再观察小白鼠游泳运动耐受能力，以观察锁阳对心肌缺血的保护作用，为临床应用提供参考。
1 材料和方法
1.1 动物选择 挑选在没有负重下能持续游泳20 min以上的小白鼠40只，雌雄不拘，体重25～35g，随机编号为1～40号，以偶数编号为锁阳水提取液灌胃组，以奇数编号为生理盐水灌胃组，每组20只。两组互为对照。
1.2 实验方法
1.2.1 锁阳水提取液的制备 称取200g的锁阳中药干片（产地内蒙古，购自广西一心药业股份有限公司，批号20040401），用10%盐水浸泡24h，洗去盐水，加入2000ml蒸馏水，置于文火上煎1h，共2次；然后提取滤液，经抽滤、浓缩、最后制成1g/ml的锁阳水提取液，然后低温保存备用，超过10天后弃去重新制备。
1.2.2 心肌缺血模型的建立 动物仰卧固定，按小白鼠体重0.001u/g由尾静脉注射垂体后叶素，20s后用心电图机记录小白鼠肢体标准Ⅱ导联心电图，出现心率明显变慢，心电图上ST段异常引起J点上抬［3］（J点为QRS波群与ST段交接处），或者出现室性心律失常，说明心肌缺血模型建立成功，可用于实验。
1.2.3 小白鼠游泳池的建立 将小白鼠放入深为32cm、四壁光滑、水温不同的水桶（Φ32cm）中游泳，游泳过程中用玻棒不断刺激防止小白鼠附于池壁或休息。
1.2.4 实验方法 锁阳水提取液灌胃组，按每只0.3ml锁阳水提取液连续灌胃16天，第16天尾静脉注射垂体后叶素造成小白鼠心肌缺血，然后将其尾部负重为自身体重的5%，分别放入水温为10℃、38℃的小白鼠游泳池中观察，以小白鼠全身下沉15s后不能浮出水面为游泳耐力终止时间，记录其游泳耐力时间。生理盐水灌胃组，用生理盐水代替锁阳水提取液，其方法与锁阳水提取液灌胃组一样。
1.2.5 统计学方法 计量数据以±s表示，采用SPSS 13.0统计软件处理。
2 结果
不管是生理盐水灌胃组，还是锁阳水提取液灌胃组，对心肌缺血小白鼠在不同水温时游泳耐力时间影响不同，水温越低，游泳耐受时间越短，即游泳耐力越差。在10℃水温中锁阳水提取液组游泳耐受时间比生理盐水组长，但两组比较差异无显著性。在38℃温水中，锁阳水提取液灌胃组比生理盐水灌胃组长，两组比较差异有显著性（P＜0.05），见表1。
表1 锁阳水提取液灌胃对心肌缺血小白鼠游泳耐受时间的影响 （略）
a:与生理盐水灌胃组比较，t=2.65，P＜0.05
3 讨论
3.1 自由基引起心肌缺血损伤的机制 大量的垂体后叶素可作用于血管平滑肌的V1受体，使全身小血管收缩，外周阻力增加，血压升高，加重心脏负荷，心肌耗氧增加；垂体后叶素也能使冠状动脉痉挛收缩，导致急性心肌缺血。因此常常通过注射垂体后叶素制备心肌缺血模型，以研究药物对心肌缺血的影响。
垂体后叶素注射后，可引起血清超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）下降，丙二醛（MDA）升高，出现自由基代谢紊乱［4］。静注垂体后叶素后引起血管收缩的作用时间不很长，几分钟后垂体后叶素作用开始下降，就引起冠状动脉恢复供血，造成心肌缺血再灌注损伤。不管是在心肌缺血或心肌缺血再灌注过程中，都能引起自由基产生增多，氧化与抗氧化平衡失调，造成一定程度的心肌损伤作用。自由基对心肌损伤可通过以下机制［5］：①细胞膜脂质过氧化增强；②细胞内的钙离子超载；③诱导前列环素等炎症介质产生；④损伤血管内皮。在引起心肌缺血再灌注损伤中，自由基起了重要作用。因此，降低自由基的损伤，对心肌缺血性损伤具有一定的保护作用。
目前认为，运动特别是力竭运动，通过线粒体机制和黄嘌呤氧化酶机制产生大量的自由基［6，7］，自由基的增加是导致运动性疲劳发生的一个重要因素。
3.2 锁阳水提取液清除自由基、保护心肌的作用 锁阳为锁阳科植物，具有多种药理活性，其含有丰富的化学成分，如黄酮类化合物、油酸、乙酸、多种氨基酸、多种微量元素等，为锁阳的生理学功能奠定基础。大量研究证实［8，9］，锁阳具有抗氧化、抗自由基的作用，是一种良好的自由基消除剂，可延缓运动性疲劳的产生。
本实验研究发现，锁阳水提取液灌胃组，在38℃水温下心肌缺血小白鼠的游泳耐受时间比生理盐水灌胃组明显延长。这可能是锁阳通过清除自由基的损伤作用，延缓运动性疲劳的发生，也可在一定程度下保护心肌缺血的自由基损伤作用，降低休克死亡的发生。在10℃水温下，心肌缺血小白鼠的游泳耐受时间很短，尽管锁阳水提取液灌胃组游泳耐受时间也比生理盐水灌胃组稍延长，但差异不显著。这是因为在寒冷刺激下，机体处于应激刺激状态，大量的儿茶酚胺分泌，增加冠状动脉收缩程度，造成心肌严重缺血，出现休克死亡。此时，锁阳通过消除自由基作用并不能起到保护心肌缺血的作用。这就提示锁阳水提取液通过消除自由基作用可以在一定限度上降低心肌缺血性损伤的风险性，表现其对心肌的保护作用。
参考文献
［1］ 梅全喜，毕焕新.现代中药药理手册［M］.北京：中国中医药出版社，1998：565-566.
［2］ 娄振宇，郝克倚，尚贵民，等.氧自由基与心肌损伤［J］.心血管康复医学杂志，2001，10（1）：82-84.
［3］ 胡代菊，马王君，赵晶晶，等.参麦注射液对垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血的保护作用［J］.蚌埠医学院学报，2004，29（3）：209-210.
［4］ 司秋菊，邸淑珍.垂体后叶素致小鼠心肌损伤自由基代谢的初步观察［J］.中华现代中西医杂志，2003，1（4）：303-304.
［5］ 孙涛.自由基与心肌缺血／再灌注损伤［J］.实用临床医学杂志，2006，3（4）：94-96.
［6］ 王家力，齐家玉，陈芳.运动与自由基［J］.四川体育科学，2006(1)：25-29.
［7］ 李刚，门绵.自由基与运动性疲劳［J］.井冈山医专学报，2007，14（1）：3-4.
［8］ 罗军德，张汝学，贾正平.锁阳抗应激药理作用及机理研究进展［J］.中药材，2006，29（7）：744-747.
［9］ 王宗兵，郭层城，伏育平，等.锁阳对小鼠耐力及骨骼肌抗氧化能力的影响［J］.西北师范大学学报：自然科学版，2006，42（4）：100-102.