作者：阮兴朝，郭锡久，张奕杰
【摘要】 目的 探讨眼生素局部治疗RAU的作用机制，同时评价眼生素局部治疗RAU的实用性和有效性。方法 用眼生素局部治疗32只家兔口腔粘膜人工溃疡并按照实验设计作组织病理学研究，并以地塞米松作为对照药;同时以8只家兔口腔粘膜人工溃疡自然愈合的组织病理学研究作为空白对照。临床上用眼生素局部治疗68例RAU病人的溃疡作为实验组，用常用药物地塞米松局部治疗40例RAU病人的溃疡作为对照组。结果 局部使用眼生素治疗兔口腔粘膜人工溃疡，其促进溃疡临床愈合状况和组织病理学愈合状况与局部使用地塞米松治疗兔人工溃疡的效果极为相似;临床治疗RAU，实验组取得94.2%的总有效率，对照组取得95%的总有效率，经卡方检验，二者之间无显著性差异存在(P&>0.05)。结论 本研究结果表明，无论是动物实验还是局部临床应用，眼生素与地塞米松一样，均能缩短口腔溃疡的自然愈合病程，疗效较好;且副作用甚小、药物价廉、易得。眼生素是一种可推广应用的治疗 RAU的新生物制剂。
【关键词】 复发性阿弗它溃疡 ; 人工溃疡 ;局部治疗 ; 眼生素
Abstract Objective To study the mechanism of ocustilla in the local treatment of recurrent aphthous ulcera (RAU) and to evaluate the practicality and effectiveness.Methods Ocustilla was applied in the local treatment of 32 rabbits with artificial oral ulcers and a histopathological study was made according to the design of the experiment，dexamethasone was taken as the control drug; the histopathological study of 8 rabbits with natural healing from artificial oral ulcers was made as blank control; in clinic，68 cases，as the experimental group，were treated with ocustilla locally while 40 cases，as the control，were treated with dexamethasone.Result The effect of local treatment with ocustilla was similar to that with dexamethasone in healing state in clinic and in histopathological study; in clinical treatment，the total effective rate of experiment group was 94.2% while that of the control was 95%，and chi-square test showed no obvious difference between the 2 groups (P&>0.05).Conclusions Animal experiment and clinical local application both suggest that ocustilla is similar to dexamethasone in shortening the natural healing course of oral ulcers with good curative effect，and it is of less side-effect，low price and is worthy of wide application.
KEYWORDS recurrent aphthous ulcer artificial ulcer local treatment ocustilla
本文是作者系列研究《复发性阿弗它溃疡致病因素及针对性综合治疗临床应用研究》的第五部分，目的是通过对用生物制剂眼生素局部封闭治疗32只家兔口腔粘膜上人工溃疡的组织病理学研究，探讨和研究眼生素局部治疗复发性阿弗它溃疡(Recurrent Aphthous Ulcera， RAU)的作用机制;同时对将眼生素用于局部治疗68名RAU患者的 1～3个较大溃疡后的疗效进行分析，以评价该疗法的实用性和有效性。
1 动物实验研究
1.1 实验动物 选用体重2～4Kg健康雄性家兔42只作为实验动物。
1.2 人工溃疡形成方法 以1～2mm大小NaoH晶体置于家兔双上唇及双口底粘膜上10s，每只兔双唇及双口底分别各形成平均直径为3～5mm深达粘膜下层的1个人工溃疡。
1.3 分组 (1)正常对照组：2只兔，口腔粘膜在正常情况下处死，取其上唇和口底粘膜作为正常对照。(2)空白对照组(自然愈合组)：8只兔。每只兔双上唇及双口底粘膜分别各形成1个人工溃疡，不用任何药物，观察和记录溃疡愈合情况，并在溃疡形成后24小时、3日、5日、7日、9日、11日、13日、15日分别处死1只兔，取其4处溃疡及周围组织标本，光镜下观察溃疡组织自然愈合的组织病理学变化。(3)实验组：共32只兔，分为 8组，每组 4只，每只兔同空白对照组一样，形成 4个人工溃疡。
1.4 实验组用药方法
1.4.1 药物 (1)实验药物：眼生素2ml+2%普努卡因 1ml混合液。(2)对照药物：地塞米松5mg+2%普鲁卡因 1ml混合液。
1.4.2 用药方法 每组 4只兔编号分别为1#、2#、3#、和4#。每只兔口内4个溃疡，一个用眼生素局部治疗，一个用地塞米松局部治疗，另外两个不用任何药物作为空白对照。注射药物时，在无菌操作下，将药物用5号针头，从正常粘膜进针，多点注射，到溃疡基底发白为止。
1.4.3 用药次数 Ⅰ组局部注射药物1次，Ⅱ组2次，Ⅲ组3次，Ⅳ组4次，Ⅴ组5次，Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ组均用药6次。每次用药间隔24小时。根据设计要求，Ⅰ～Ⅵ组2#和4#兔均在用药24小时后处死，取溃疡及周围组织以待镜检。Ⅰ～Ⅵ组1#和3#兔则待溃疡临床愈合后(8～10天)处死，取溃疡及周围组织以待镜检。Ⅶ组4只兔于第11日处死，取标本待镜检。Ⅷ组4只兔于第13日处死，取标本待镜检。
试验过程中，每日下午观察实验兔口腔粘膜人工溃疡用药反应及组织临床愈合情况。
2 实验结果
2.1 肉眼观察
2.1.1 空白对照组(自然愈合组) 在人工溃疡形成后6～8天，溃疡明显变浅、缩小，渗出物减少，轻度充血，可见假膜，周围组织红肿减轻，出现愈合趋势。约在13～15日，溃疡面消失，创面发白，有瘢痕形成，触之不出血，与周围正常组织有较明显界线，达到临床愈合。实验组中作为空白对照的人工溃疡愈合过程同上。
2.1.2 实验组 局部用药 2～3次后(即 3～4天)，溃疡面明显缩小，水肿和渗出减少，充血环不明显，假膜存在，出现愈合趋势。用药4～5次后(即 5～6天)，溃疡面变浅，缩小，触之不出血，充血环消失。用药6次后(即7～9天)，溃疡面消失，创面发白，有瘢痕形成，与周围正常组织有较明显的界线，达到临床愈合。 10～13天，癍痕稍软，与正常组织仍有界线。眼生素同地塞米松促进溃疡愈合的过程无明显差别，用二者局部治疗人工溃疡，可缩短自然愈合病程 4～5天，用药次数与缩短病程时间关系密切，即在一定时间内，用药次数越多溃疡愈合越快。
2.2 组织病理观察
2.2.1 空白对照组 病变早期为淋巴，单核细胞浸润;溃疡发展，表面有坏死组织，中性多核白细胞出现及纤维素渗出，组织间毛细血管扩张充血，血管内白细胞充盈或玻璃样血栓形成，血管周炎细胞呈套袖状浸润，胶原纤维溶解消失，溃疡面周围上皮下方胶原纤维明显水肿，少许玻璃样变，很多组病变已累及腺体或肌束。9日后，炎性渗出物明显减少，部分上皮修复，有炎性肉芽肿形成。11～13日，排列紊乱的少许上皮增生覆盖创面，其下为肉芽组织和增生的纤维结缔组织。15日，排列紊乱的薄层上皮增生，其下为成熟的肉芽组织和增生的结缔组织。实验组中的空白对照溃疡的病理愈合过程同上。
2.2.2 实验组 早期病变同空白对照组相似，6～8日后排列稍乱，明显增生的上皮覆盖创面，其下为肉芽组织和增生的纤维组织，其间有散在的炎细胞浸润。9～13日后，见明显上皮增生，其下为成熟的肉芽组织和增生的纤维结缔组织。眼生素同地塞米松促进溃疡愈合的病理过程无明显差别。两者均可使溃疡病理愈合过程提前3～4日，用药次数越多，愈合越快。
3 临床应用研究
3.1 临床资料
3.1.1 观察对象 选择RAU患者108例，其中男性41例，女性67例，年龄15～58岁。病变部以唇内侧粘膜、颊粘膜、舌尖区为多;溃疡数目为1～3个，直径在0.2～2.2cm之间，一般2～3月内反复发作，间歇小于3周者。
3.1.2 分组及治疗方法 将108例患者随机分为2组，治疗组68人，对照组40人。治疗组用1m%利多卡因和 2 ml眼生素混合，在溃疡周边及溃疡基底注射，剂量以粘膜发白为度，每日一次，一般 2～3次为一疗程。对照组采用1ml%利多卡因和5mg地塞米松混合，方法和疗程同治疗组。
3.1.3 疗效评定标准 显效：用药3～4天疼痛基本消失，溃疡周围组织粘膜充血消退，溃疡面愈合，半年内无复发。有效：用药5～6天疼痛明显减轻，溃疡周围组织粘膜充血消退，溃疡面愈合，半年内复发次数减少。无效：用药7天后，病情无改变。
3.2 结果 治疗组和对照组病人均观察半年以上，两组治疗效果，见表1。表1 治疗组和对照组疗效比较治疗组总有效率与对照组总有效率经卡方检验，表明两者之间无显著性差异(P&<0.05)。
4 讨 论
眼生素是一种主要用于治疗青少年假性近视，角、结膜炎等眼科疾病的生物制剂，为猪牛羊鱼眼内容物提取的灭菌等渗溶液，含甘、谷、胱、赖、亮等17种氨基酸、多肽、核甘酸及较多维生素C、糖、磷、钙等。有生物催化作用，能补充眼病变组织营养的需要，促进其新陈代谢，增强免疫功能，促进角膜上皮组织再生作用[1～3]。考虑到眼生素的上述功能，作者将其用于局部注射治疗32只家兔口腔粘膜的人工溃疡，观察其促进兔口腔溃疡的临床愈合情况并作组织病理学研究。实验观察发现局部注射眼生素3～4天后，实验兔口腔溃疡明显缩小、水肿和渗出减小、充血环基本消失、出现明显愈合趋势。与实验兔口腔溃疡空白对照组7～8天组织愈合情况相似。局部使用眼生素7～8天后，溃疡面消失，创面发白、有瘢痕形成，与周围组织有明显界线，达到临床愈合。光镜下见排列稍乱、明显增生的上皮覆盖创面，其下为肉芽组织和增生纤维结缔组织。其临床愈合和组织学愈合情况与空白对照组 11～13天临床愈合和组织学愈合情况相似，表明局部使用眼生素治疗兔口腔人工溃疡，可缩短自然愈合病程 4～5天。作者还观察到局部用药次数越多，病变愈合越快的临床现象，估计多为病变部位眼生素浓度聚集较高所致。将地塞米松作为对照药物来局部治疗兔口腔人工溃疡，其促进溃疡临床愈合状况与组织病理学愈合情况与局部使用眼生素得到的观察结果极为相似，也能缩短兔口腔溃疡自然愈合病程4～5天。上述研究结果表明，用眼生素治疗兔口腔人工溃疡能明显缩短溃疡的愈合时间的机制，可能与眼生素生物催化和促进溃疡及周围组织的新陈代谢、增强粘膜上皮再生能力及提高机体免疫功能的生物特性有关，推测眼生素还可能具有地塞米松类似的抑制炎细胞、巨噬细胞和白细胞在溃疡部位的聚集，减少溶酶体的释放和炎症介质的合成和释放，减少炎症反应作用[4，5]。
作者用口腔界常规使用并公认有效的地塞米松[5，6]作为对照药物来局部封闭治疗40例病人的 RAU，取得95%的总有效率，得到与曹学军、乐福媛等局部使用地塞米松治疗 RAU相似的疗效[5，7]。用眼生素局部封闭治疗68例病人的 RAU，获得94.2%的总有效率。治疗组和对照组疗效经卡方检验，两者无显著性差异存在(P>0.05 )。临床局部应用眼生素治疗 RAU，可使 RAU自然愈合期10～14天缩短到一周左右或更短，与动物实验得到的观察结果相似，表明用眼生素局部治疗病人单个或2～3个较大的RAU是十分有效的，在临床应用有广阔的前景。
局部应用眼生素加速RAU愈合的机制应与动物实验得到的结论基本相似，即它的生物催化和促进溃疡及周围组织的新陈代谢，增强粘膜上皮的再生能力，提高局部免疫功能，抑制炎细胞在病变部位的集聚，减少溶酶体和炎症质的合成和释放，减少炎症反应，加速 RAU愈合。当然病因众多的 RAU比在口腔粘膜上造成的创伤性溃疡的愈合机制复杂得多，要进一步搞清眼生素促进 RAU的愈合机制，还需在搞清 RAU病因基础上深入作更多的研究，才能得到更准确的结论。
作者的系列研究表明，免疫调节生物制剂眼生素无论全身应用治疗发作频率，多种方法治疗无效的 RAU，还是局部应用治疗单个或2～3个面积较大的 RAU均能取得较好的疗效[8]，而且药物价廉、易得，副作用甚微，是一种可以推广应用的治疗 RAU的新的生物制剂。
参考文献
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[7] 曹 辉.粘膜下注射法治疗顽固性巨大溃疡[G].第四次全国口腔粘膜病学术会议论文.成都.1998.12.
[8] Guo Xijiu，Ruan Xingchao.The clinical study of symptomatic comprehensive treatment for Recurrent Aphthous ulcer(RAU) with immune regulating preparation ocustilla.The fourth asian symposium on biomedical materials[M].Sigappore 1999.