作者：牛艳艳，冯玛莉，武玉鹏，贾力莉，李培毅
【摘要】 目的 研究冬桑胶囊不同剂量给药对阿霉素肾病大鼠肾脏结构和功能的影响。方法 采用尾静脉注射阿霉素的方法，建立实验性肾病模型，观察冬桑胶囊对大鼠体重、血液生化学指标的影响及对肾组织的病理改变。结果 冬桑胶囊可明显增加阿霉素肾病大鼠体重；显著降低阿霉素肾病大鼠肾系数；显著提高阿霉素肾病大鼠血清总蛋白、白蛋白值，降低血清总胆固醇和尿素氮值；明显减轻阿霉素肾病大鼠肾组织病理改变。结论 冬桑胶囊对实验性肾病具有明显保护作用。
【关键词】 冬桑胶囊；阿霉素；肾疾病
Abstract：Objective To explore the effect of different dosage of Dongsang capsule on the structure and function of rat with nephropathy caused by doxorubicin. Method To establish nephritic model by injecting doxorubicin in caudal vein. Then the effect of Dongsang capsule on weight and blood indexes were observed. Results The weight of rats which were administered by Dongsang capsule was increased and kidney coefficient was decreased significantly. Total protein and ALB were increased. Total cholesterol and BUN were decreased. Dongsang capsule can abate the pathological changes of renal tissue of the model. Conclusion Dongsang capsule can protect the renal tissue of nephritic model cause by doxorubicin.
Key words：Dongsang capsule；doxorubicin；nephritic diseases
冬桑胶囊由冬虫夏草、桑白皮等4味中药组成，具有补肺益肾之功效，用于肺肾两虚所致咳喘、浮肿等症，亦可用于各类肾病、慢性支气管哮喘及肿瘤的辅助治疗。根据该药功能主治，制定其在治疗肾病方面的药效学试验，为临床用药提供依据。
1 实验材料
1.1 动物
Wistar大鼠，山西省中医药研究院实验动物室提供，符合GB14922-94 II 级标准，合格证号：晋动(证)字第A00-002号。
1.2 药物及试剂
冬桑胶囊，山西省中医药研究院制剂中心提供，批号041001，
每粒装0.25 g。用时以蒸馏水配制成1.875%、3.75%、7.5%的混悬液。强的松，山西三九同达药业有限公司生产，批号040601，每片5 mg，用时以蒸馏水配成25 mg/100 mL混悬液。注射用盐酸阿霉素，汕头经济特区明治医药有限公司，批号040301，每瓶10 mg，用时以生理盐水配成2.0 mg/mL溶液。总蛋白测定试剂盒：上海荣生生物技术有限公司，批号040129；白蛋白测定试剂盒：中生北控生物科技股份有限公司，批号200042；尿素氮测定试剂盒：中生北控生物科技股份有限公司，批号100093；肌酐试剂盒：北京北化康泰临床试剂公司，批号040527；总胆固醇测定试剂盒：浙江东瓯生物工程有限公司，批号2004070240。
1.3 仪器
电子天平：BP310P，德国赛多利斯。紫外可见光分光光度计： UV3000，日本岛津。
2 方法和结果
2.1 冬桑胶囊对阿霉素肾病大鼠一般状况的影响
取雌性大鼠，体重(150±15)g，随机分为6组，正常对照(A组)、阿霉素肾病模型对照组(B组)、强的松(0.005 g/kg，C组)、冬桑胶囊低剂量(0.375 g/kg，D组)、冬桑胶囊中剂量(0.75 g/kg，E组)、冬桑胶囊高剂量(1.5 g/kg，F组)。除A组外，其余各组大鼠尾静脉注射 2 mg/mL阿霉素(3、6 mg/kg) 1次，7 d后造成阿霉素肾病模型[1-2]。灌胃给药，20 mL/kg，每日1次，连续28 d，A、B组灌胃等量蒸馏水。于实验前后称体重，观察一般状况。造型后第4天起，各组大鼠均呈现活动量及进食量减少、身体倦缩、毛无光泽等现象。给药过程中，B组大鼠体质最差，C、D组大鼠逐渐转好，E、F组次之。实验结束杀检时，B组大鼠腹腔可见较多积水，冬桑胶囊各剂量组相对较少，剖取双侧肾脏称湿重，计算肾脏系数(g肾重/kg体重)。结果见表1。表1 冬桑胶囊对阿霉素肾病大鼠体重及肾脏系数的影响
2.2 冬桑胶囊对阿霉素肾病大鼠血清生化指标的影响
分组末次给药后禁食12 h，乌拉坦麻醉，下腔静脉取血，分离血清按文献[3]方法，双缩脲法测定血清总蛋白(TP)，溴甲酚绿法测定白蛋白(ALB)，三氯化铁法测定血清胆固醇(TC)，二乙酰一肟法测定尿素氮(BUN)，除蛋白-苦味酸法测定肌酐(Cr)[3]。结果见表2。表2 冬桑胶囊对阿霉素肾病大鼠血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇的变化(略)
2.3 冬桑胶囊对阿霉素肾病大鼠肾组织病理学的影响
杀检剖取左肾，10%甲醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，镜下组织病理学检查。正常对照组肾小球结构正常，近曲管上皮细胞、远曲管上皮细胞、肾间质未见增生及炎症性改变。模型对照组肾小球毛细血管扩张、充血，可见红细胞呈纸钱状，肾小球基底膜明显增厚，肾小球内细胞轻度增生；部分肾小管上皮细胞空泡样变性，可见少量蛋白管型；肾间质血管扩张、充血明显。冬桑胶囊低、中、高剂量组和强的松组肾小球毛细血管轻度扩张、充血，未见红细胞呈纸钱状，肾小球基底膜未见明显增厚，肾小球内细胞增生较模型组轻；部分肾小管仍可见有空泡变性；肾间质血管无明显扩张、充血。
3 讨论
阿霉素肾病模型制备简便，现已成为肾病综合症的常见研究模型之一。阿霉素属于蒽环类抗生素，对肾小球多种细胞具有毒性作用，致使红细胞、肾小管上皮细胞膜上的离子转运系统发生变化，进而出现肾病综合症的表现。本实验采用大鼠尾静脉一次性注射阿霉素6 mg/kg复制肾病，结果出现动物体重减轻，肾系数升高及血液生化指标的明显变化，模型对照组大鼠光镜下可见肾小球基底膜明显增厚，肾小管上皮细胞空泡样变性及少量蛋白管形。表明该模型复制成功。中医学认为，肺主呼吸、肾主纳气，肺肾同病，多为气阴两虚。症见气喘、乏力、腰膝酸软、水肿及小便失常等。冬桑胶囊以冬虫夏草和桑白皮为主药，经合理配伍，采用益气养阴、利水消肿法。药理实验证明，该药可改善大鼠的一般生活状况，使大鼠体重显著增加，肾脏系数明显增加，肉眼观察腹腔积水明显减少；该药可提高阿霉素肾病大鼠血清总蛋白、白蛋白，降低血清总胆固醇和尿素氮；病理组织学显示该药可明显减轻阿霉素肾病大鼠肾组织病理改变。综上所述，冬桑胶囊明显改善阿霉素肾病大鼠肾脏功能和结构，提示其对阿霉素性肾病大鼠具有明显的保护作用。
【参考文献】
[1] Bertani T.Adriamycin induced nepnrotic syndrome in rat[J].Lab Invest，1982，46(1)：16.
[2] 张 悦，魏 民，王 谦，等.阿霉素复制大鼠微小病变肾病模型的研究[J].北京中医药大学学报，2002，(25)：2.
[3] 朱忠勇.实用医学检验学[M].北京：人民军医出版社，1992.258，261， 301.