作者：陈健，王昕，姚凝，刘延祯，陈宁
【摘要】 目的 探讨归芪胶囊对家兔心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法 以家兔心肌组织中过氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(OFR)为指标进行实验观察。结果 归芪胶囊对心肌缺血-再灌注损伤家兔心肌组织中SOD的升高与OFR的降低有显著作用(P&<0.01)。结论 归芪胶囊通过对SOD与OFR含量的影响，对再灌注心肌损伤有保护作用。
【关键词】 归芪胶囊；心肌缺血-再灌注损伤；动物模型
Abstract：Objective To approach the protective actions of the rabbits of myocardial ischemia- reperfusion injury. Method To observe SOD and OFR of heart tissue of model rabbits. Result Guiqi Capsule compound can obviously increase SOD and decrease OFR to myocardial ischemia- reperfusion injury. Conclusion Guiqi Capsule Compound has obviously protective action to myocardial ischemia-reperfusion injury by the way of influencing the content of SOD and OFR of the rabbits' heart tissue.
Key words ：Guiqi Capsule Compound；myocardial ischemia-reperfusion injury；animal model
本实验以中医药理论为指导，在经典方剂补阳还五汤的基础上化裁进行组方，并制成归芪胶囊，观察了其对心肌缺血-再灌注损伤家兔心肌组织中氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(OFR)变化的影响作用。
1 实验材料
1.1 动物
青紫蓝家兔45只，雌雄兼用，体重(2.4±0.1)kg，兰州生物制品研究所提供(合格证：医动字第14-004号)。
1.2 药物
归芪胶囊由岷当归、红芪、川芎等药物组成，1 g药粉相当于原药材9.358 g；地奥心血康为成都地奥制药集团有限公司生产[(91)卫药准字Z-51号]。用温生理盐水配成体积分数为50%的混悬液。
1.3 试剂及仪器
SOD、OFR测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所；VIS-7220型分光光度计，北京第二光学仪器厂生产；H.H.S21-4型电热恒温水浴锅，上海医疗器械五厂生产；800型离心沉淀器，上海手术器械厂生产。
2 实验方法
2.1 心肌缺血-再灌注损伤家兔模型制作
以体重(2.4±0.1)kg家兔，用25%乌拉坦麻醉(4 mL/kg)，仰位固定，沿胸骨左缘剪断2～3肋软骨，用小开胸器撑开胸腔切口，可见搏动的心脏，剪开心包，用止血钳将左心耳提起，用持针器将小弯针在冠状动脉前降支根部(离冠状动脉起始约3～5 mm)穿一丝线结扎之，并同时结扎入1 cm长硅胶管一根，使家兔心肌缺血，观察40 min，然后将结扎丝线剪断，使实验家兔心肌开始再灌注，观察90 min。
2.2 分组及给药
实验家兔共分5组：假手术组、模型组、归芪胶囊小剂量组、归芪胶囊大剂量组及地奥心血康对照组，每组9只。其中假手术组只做家兔开胸、暴露心脏、剪开心包并在冠状动脉前降支根部穿线，但并不结扎；其余各组均按上述方法造模。假手术组与模型组以等量温生理盐水于实验家兔心肌缺血30 min时灌胃，其余各组均在实验家兔心肌缺血30 min时用温生理盐水溶解实验药物成混悬液灌胃，分别给予归芪胶囊小剂量(0.286 g/kg)、归芪胶囊大剂量(0.858 g/kg)以及地奥心血康(21 mg/kg)。
2.3 SOD、OFR测定方法
心肌缺血-再灌注90 min时经颈静脉抽血5 mL制备血清，测定方法按照试剂盒说明书严格操作。
2.4 统计学方法
所有实验数据以x±s表示，各组之间用F检验判断，组间对比用t检验。
3 结果
(见表1)表1 对心肌缺血-再灌注损伤家兔心肌组织中SOD活性的影响(略) 注：与假手术组比较，**P&<0.01；与模型组比较，▲P&<0.05，▲▲P&<0.01。
4 讨论
SOD的重要意义在于清除h3O2和羟自由基的前身超氧阴离子自由基，从而保护细胞不受毒性氧自由基的损伤。缺血心肌再灌注时，大量OFR产生[1]，其中h3O2可由超氧阴离子自由基自发歧化生成，而此刻产生的大量的活性氧不能被机体清除，导致脂质过氧化反应，形成一系列的脂质自由基及其降解产物如丙二醛(MDA)等，在体内能和各种细胞成分造成严重的细胞损伤[2]。这些自由基将进一步引起膜损伤，溶酶体破坏及溶酶体酶的释放[3-5]，加重机体损伤、甚至导致机体死亡。
本实验采用检测心肌组织中SOD活性及OFR含量的方法，观察归芪胶囊胶囊对实验性家兔心肌缺血-再灌注损伤的影响。结果显示，归芪胶囊胶囊可明显增加家兔心肌缺血-再灌注损伤时心肌组织内SOD活性，同时减少体内产生的OFR含量，通过对SOD活性升高与OFR的清除，达到保护缺血-再灌注心肌细胞，减轻缺血受损细胞在再灌注时进一步损伤甚至死亡的目的。
参考文献
[1] 郭平敬，张志仁，陈东辉，等.电子顺磁共振检测心肌缺血再灌产生的氧自由基及其保护的实验研究[J].心肺血管病杂志，2000，(1)：58.
[2] 邵 耕.现代冠心病[M].北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1995.60.
[3] 刘德麟.分子网络紊乱与调节[M].北京：清华大学出版社，1999.63.
[4] 金惠铭.病理生理学[M].第4版.北京：人民卫生出版社，1996.145－153.
[5] 杨惠玲. 高级病理生理学[M].北京：科学出版社，1998.24－30.