关于山楂水提物对阿霉素诱导的心衰大鼠血清CK、LDH的影响

【摘要】 目的 研究山楂水提物对阿霉素诱导的心衰大鼠心功能保护作用，初步探讨其机制。方法 腹腔注射阿霉素复制心衰大鼠模型。随机分为模型组、空白组、卡托普利组、山楂水提物高、中、低剂量组，给药4周后，检测各组大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果 与模型组比较，山楂水提物组可以使心衰大鼠血清CK和LDH活性明显降低 (P&<0.01；0.05)。结论 山楂水提物对阿霉素诱导的心衰具有保护作用，其作用可能是通过降低血清心肌酶活性实现的。
【关键词】 山楂水提物 心衰 CK LDH
　　心衰（heart failure，HF)亦称为心功能不全，指在有足够回血量的情况下，由于心脏功能障碍，输出血量不足以维持正常代谢需要的疾病。常用强心药及扩血管、利尿药等改善症状，同时多采用神经内分泌拮抗剂阻断心肌重塑，修复衰竭心肌的生物学功能。山楂为传统常用中药，来源于蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatif ida Bge. Var. major N. E.Br.的干燥成熟果实。性温，味酸、甘， 具有活血化瘀之功效，近年来临床常用于心衰、冠心病及高脂血症等疾病的治疗。本实验就山楂水提物对阿霉素诱导的心衰大鼠心功保护作用进行了实验研究，通过观测其对大鼠血清CK、LDH的影响，探讨其对心肌的保护作用。
　　1 材料与方法
　　1.1 实验材料
　　1.1.1 实验动物 SD大鼠60只，雄性，体重180～200g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号SCXK(黑)2008004。实验环境：温度20-22℃，相对湿度：30-35%。
　　1.1.2 实验药物及试剂 山楂(北京同仁堂制药集团哈尔滨药店)将山楂药材1000g加水10L，煎煮1h，过滤。重复一次，合并滤液浓缩至1000mL，定容，为山楂水煎组的供试药液。每毫升药液相当于1g山楂原药材，保存于4℃冰箱。临用前，按生药量计算，加蒸馏水配制成0.25g/ml(低剂量组)、0.5g/ml(中剂量组)、1g/ml(高剂量组)。阳性对照药：卡托普利（海南普利制药有限公司，批号5103-10-047A）研磨成粉末，加蒸馏水配制成1mg/ml的混悬液，每次使用前摇匀。注射用盐酸阿霉素(深圳万乐药业有限公司，批号: 0905E1)用生理盐水配制成2mg/ml溶液。CK、LDH试剂盒（均购自南京建成生物工程研究所）。
　　1.1.3 实验仪器 HUMALYZER 2000型半自动生化分析仪；恒温水浴箱；高速低温离心机R21(均由黑龙江中医药大学实验中心提供)。
　　1.2 实验方法
　　1.2.1 模型制备 随机抽取SD大鼠50只，按阿霉素诱导心衰方法[1]复制模型。以2mg/kg盐酸阿霉素腹腔注射，每周1次，共6周，复制大鼠心衰模型。
　　1.2.2 分组及给药 将造模大鼠随机分成模型组、阳性对照组、山楂水提物高、中、低剂量组，每组10只，并将未造模大鼠10只设为空白组。于大鼠开始造模的第5周开始灌胃给药（继续给予2周阿霉素），阳性对照组每天给予卡托普利水溶液20mg/kg（20ml/kg）、山楂水提物高、中、低剂量组分别按20ml/kg给予相应浓度药液，空白组和模型组同步给予等体积生理盐水，1次/d，给药4周，至第8周检测指标。于末次给药后，将实验大鼠断头取血。血浆离心后取上清液，分装后存于低温冰箱备用。
　　1.2.3 血清CK测定 采用N-乙酰半胱胺酸法测定。肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸，生成磷酸肌酸，磷酸肌酸很快水解为磷酸，此时三磷酸腺苷加入钼酸铵可成磷钼酸，再进一步还原成钼蓝，通过生成的无机磷的量可计算出酶的活力。
　　1.2.4 血清LDH测定 采用丙酮酸法检测。乳酸能被乳酸脱氢酶催化生成丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼反应生成二硝基苯胺，其在碱性溶液中呈现棕红色，通过比色可计算出酶的活力。
　　1.2.5 统计学处理
　　计量资料用x-±s表示。用SPSS13.0统计软件进行统计学处理，组间比较用t检验。实验过程中有个别大鼠死亡，不纳入统计计算，n值见各表。
　　2 结果
　　2.1 对血清CK的影响
　　模型组与空白组比较，血清CK活性明显升高，差异有显著性意义（P&<0.01）。各给药组与模型组比较，CK活性均有所下降，其中，阳性组差异有显著性意义 (P&<0.01)，高剂量组、中剂量组与模型组比较，差异有显著性意义 (P&<0.05)；山楂各剂量组与阳性组比较，CK活性差异无显著性意义 (P&>0.05)。见表1。
表1 血清CK组间比较（）
　　组别　　 数量（n）　　 CK(U/L)
　　高剂量组　　9　　　　921±15.1△▲
　　中剂量组 10　　 923±17.7△▲
　　低剂量组 10　　 926±17.7▲
　　阳性组　　 10　　 910±17.8△△
　　模型组　　9　　　　941±16.9
　　空白组　　 10　　 594±14.6△△
　　注：1）与模型组比较 △P&<0.05 ，△△P&<0.01；2)与阳对组比较▲P&>0.05 转贴于 　　 2.2 对血清LDH的影响
　　模型组与空白组比较，大鼠血清LDH活性明显升高，差异有显著性意义（P&<0.01）。各给药组血清LDH与模型组比较均有降低，其中，阳性组、山楂高剂量组、中剂量组与模型组比较，差异有显著性意义 (P&<0.05)；山楂各剂量组与阳性组比较，差异均无显著性意义(P&>0.05)。见表2。
　　表1　　 血清LDH组间比较（）
　　组别　　　　　　数量（n）　　　　 LDH(U/L)
　　高剂量组　　　　 9　　　　 921±14.0△▲
　　中剂量组　　　　 10　　　　 917±16.4△▲
　　低剂量组　　　　 10　　　　 917±15.6▲
　　阳性组　　　　　　 10　　　　 914±14.5△
　　模型组　　　　　　 9　　　　 933±14.6
　　空白组　　　　　　 10　　　　612±13.4△△
　　注：1）与模型组比较 △P&<0.05，△△P&<0.01；2)与阳对组比较▲P&>0.05
　　3 讨论
　　阿霉素诱导心衰的机制目前尚无定论。一般认为，是多因素多途径毒理作用的结果，阿霉素能使自由基增多、钙超载、线粒体损伤、肾上腺功能异常等，从而产生心脏毒性导致心衰。阿霉素引起细胞损伤甚至死亡，会导致血清CK、LDH等酶类含量升高、心肌组织出现一系列病理性改变[2-4]，研究发现，阿霉素对心肌造成损伤的的程度与心肌酶的漏出以及心脏功能的恢复明显相关[5]。本实验结果表明，模型组的CK、LDH含量较对照组显著升高，与文献报道相吻合[6-7]。
　　现代药理研究表明，山楂含有的三萜类和黄酮类，对心血管系统的作用是多方面的，具有明显的扩张冠状动脉、舒张血管、增加冠脉血流量，降低血压、改善心脏活力、强心、抗心律不齐的作用[8-10]。本研究发现，山楂水提物可抑制心衰大鼠血清中的CK、LDH升高，提示山楂水提物具有抑制心肌损伤时CK释放及LDH溢出，降低血清中CK、LDH含量， 减少心肌酶的漏出，改善心肌细胞的能量代谢，保护心肌细胞膜的作用。
参 考 文 献
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