关于乙肝产妇乳汁HBV DNA定量检测的意义

【摘要】目的 探讨乙肝产妇乳汁中乙肝病毒标志物（HBV-M）和HBV-DNA的关系，从而正确指导乙肝产妇产后母乳喂养。方法 采用时间分辨荧光免疫定量分析法（TRFIA）检测乙肝产妇血清中的HBV-M，采用荧光定量PCR 法（FQ-PCR）检测血清及乳汁中HBV-DNA含量情况。结果 100例乙肝阳性产妇大三阳的血清与乳汁HBV DNA阳性检出率为100%，二者HBV DNA含量为最高，小三阳组HBV DNA阳性率分别为87.2%和84.6%，HBsAg/HBcAb组的阳性率分别为88.9%和86.1%，后两组血清HBV DNA含量分别为4.57×105和5.84×106copy/ml，乳汁HBV DNA分别为4.40×105和5.98×106 copy/ml。结论 乙肝产妇产后能不能母乳喂养与产后产妇血清和初乳中HBV-DNA情况有关，根据检测结果决定喂养方式，以保证分娩婴儿的安全哺乳环境。
【关键词】乙肝病毒标志物 HBV-DNA 乳汁
　　乙型肝炎是世界上最常见的传染病之一，母婴乙肝病毒的传播途径为胎盘传播感染，分娩时经产道被感染或产后哺乳感染及母婴的密切接触感染[1]。了解乙肝表面抗原（HBsAg）阳性乳汁 中的HBV DNA含量，有利于指导母乳喂养。
　　1 对象与方法
　　1.1收集 2008年5月-2009年6月检测HBsAg阳性并在我院分娩的产妇100例，年龄20-35岁；健康产妇对照20例，是我院同期住院患者，年龄21-36岁。
　　1.2标本采集 血液标本：采用无菌操作技术采集产后2-7天内产妇血液3ml，置干燥试管中，3000r/min，离心5min，取血清；乳汁采集：产妇乳头用无菌生理盐水消毒后，用无菌干燥试管留取乳汁3-4ml，3000r/min，离心15min，取上清液检测。
　　1.3检测方法 HBV标志物检测采用酶联免疫法测定，使用上海实业科华生物技术有限公司试剂。严格按试剂说明书操作。HBV DNA定量使用美国ABI公司PE5700自动荧光PCR扩增仪，试剂盒由中山医科大学达安基因诊断中心提供，操作严格按说明书，临界阳性标准品1.0×103copy/ml，强阳性标准品为1.0×108copy/ml。
　　1.4统计学处理 HBV DNA定量结果用求对数平均值的方法来计算HBV DNA平均拷贝数，阴性结果不参加平均值的统计，采用SPSS11.0统计软件包进行t检验。　　　　　　
　　2 结果
　　对照组20例健康产妇的HBV DNA含量和乙肝标志物的检测结果均为阴性，100例产妇血清乙肝阳性产妇HBsAg(+)，HBeAg(+)，HBcAb(+)(大三阳)25例，占25%，HBsAg(+)，HBeAb(+)，HBcAb(+)(小三阳)39例，占39.0%，HBsAg(+)，HBcAb(+)36例，占36.0%。
　　100例乙肝阳性产妇大三阳的血清与乳汁HBV DNA阳性检出率为100%，二者HBV DNA含量为最高，小三阳组HBV DNA阳性率分别为87.2%和84.6%，HBsAg/HBcAb组的阳性率分别为88.9%和86.1%，后两组血清HBV DNA含量分别为4.57×105和5.84×106copy/ml，乳汁HBV DNA分别为4.40×105和5.98×106，两组相比差异有显著性（P&<0.01），乳汁HBV DNA含量与血清HBV DNA含量正相关（r=0.921）。 　　3 讨论
　　乙肝病毒携带者母乳传播问题一直是医务人员比较关注的重要问题之一，关于乙肝病毒标志物阳性产妇能否进行母乳喂养一直有争议。母婴传播是乙肝病毒感染流行的重要途径之一，约占HBV感染的1/3，新生儿感染HBV，则将有90%可转变为慢性HBsAg携带者，因此乙肝的传播已成为影响人口素质的重要问题[2]。
　　从100例乙肝产妇的乳汁HBV DNA检测中，血清HBV阳性的母亲，其乳汁可能存在HBV DNA。HBV携带者产妇乳汁和血清中HBV DNA差异无显著性（P&>0.05），血中HBeAg阳性产妇其初乳中HBV DNA含量更高[3]，本文也说明这一点。从检测结果来看，乙肝产妇乳汁HBV DNA含量，大三阳组&>HBsAg/HBcAb+组&>小三阳组，乳汁和血清HBV DNA含量呈正相关；血清大三阳产妇的乳汁HBV DNA含量最高，检出率为100%。大量资料表明，血清中HBeAg阳性率与HBV DNA阳性率之间有较好的相关性，HBeAg能基本反映HBV在体内的复制状态[4]。血HBeAg阳性产妇具有较大的潜在危险性，HBV DNA是HBV的遗传物质，是病毒复制的指标之一。HBV DNA定量测定的意义是判断HBV感染者病毒复制的水平，关于血液循环中HBV DNA浓度与患者传染性之间的关系，通常血浆HBV DNA浓度大于109copy/ml则日常生活中密切接触中具有较强的传染性，105-106copy/ml生活中密切接触中传染性较小，小于105copy/ml则日常生活中密切接触几乎无传染性[5]。
　　结果表明HBeAg阳性产妇体内HBV处于复制活跃期，传染性大，建议采取人工喂养。
　　血HBeAg阴性的HBV携带产妇不能排除HBV通过乳汁传播的可能[6]。本实验对其中36例HBeAg阴性HBV携带产妇乳汁HBV DNA检测时发现，有86.1%HBV DNA检出率。血HBeAg阴性产妇HBV携带者母乳喂养应慎重。
　　母乳喂养目前被公认为解决世界性儿童健康问题的主要途径。但是，对于血清HBsAg阳性产妇应慎重母乳喂养。根据乳汁中HBV及HBV DNA的检测可知：乳汁中HBsAg阳性的产妇，都可能具有一定的传染性，如果HBeAg阳性，其传染性最大。乳汁HBV DNA含量检测，可反映其乙肝病毒传染性的强弱，从而有针对地采取措施，降低母乳喂养的感染率，对于HBV复制活跃的母亲应及时阻止母乳喂养。HBsAg阳性血清产妇如果乳汁中HBV全阴，可进行喂养，如为HBsAg检测阳性，应尽量避免母乳喂养。
参 考 文 献
[1] 李甲芬.HBV标志物阳性者产妇乳汁HBV DNA检测[J].临床检验杂志.2005，23(2):119.
[2] 隋爱华，刘相萍，杨堃.乙肝血清学阳性产妇乳汁中HBV DNA检测的意义[J].实用医药杂志.2008，25(11):1329.
[3] 白艳丽，李建平，计玉仙.HBV DNA与HBV TRFIA检测结果比较分析[J].现代检验医学杂志，2004，19(5):43-44.
[4] 吴岷岷，唐引荣，郭彩玉，等.采用阻断措施的乙型肝炎病毒携带产妇哺乳结果的观察[J].中华妇产科杂志，2002，37 (4): 235.
[5] 杨萍.乙肝免疫球蛋白用作母婴阻断效果评定[J].职业与健康， 2007， 23 (6): 435.
[6] 陆德源主编.微生物学[M].第五版，北京:人民卫生出版社，2002:289-293.