老年代谢综合征患者血清ApoA5水平与血脂、血糖的相关性

　　　　 作者：马文健 陈焕芹 刘向群 于昕 杨娜

【摘要】 目的 探讨载脂蛋白A5(ApoA5)水平能否作为老年代谢综合征(MS)患者的血清标志物。方法 应用ELISA法对82例老年MS患者和50例老年对照者的血清ApoA5浓度进行测定，并用全自动生化仪测定血脂、血糖、载脂蛋白A1、载脂蛋白B100等，分析ApoA5与体重指数(BMI)、血压、血脂、血糖等的关系。结果 老年MS的ApoA5、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和载脂蛋白A1(ApoA1)明显低于对照组，而总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、空腹血糖(FPG)、收缩压(SBP)和BMI水平明显高于老年对照组(P<0.05或P<0.01)。相关分析显示：血清ApoA5水平与血清TG、TC水平及BMI之间呈显著的负相关(r分别为-0.987、-0.361和-0.445，P<0.01)，与HDLC呈显著的正相关(r=0.278，P<0.01)与年龄、LDLC、ApoA1、ApoB100和血糖无相关性。结论 在老年MS患者中ApoA5明显降低，其与TG、TC、HDLC和BMI密切相关，低ApoA5可作为老年MS的一个血清标志物。

【关键词】 载脂蛋白A5;代谢综合征;老年人

代谢综合征(MS)是中心性肥胖、高甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDLC)、空腹血糖(FPG)水平异常以及高血压等的集合，是当前重要的社会公共卫生问题。有动物实验证明〔1〕，载脂蛋白A5(ApoA5)对血浆TG代谢有明显的调节作用，ApoA5转基因小鼠其TG减少至野生型的1/3，而ApoA5基因敲除小鼠其TG却增加了4倍。载脂蛋白多态性研究显示〔2～4〕，ApoA5具有降低血浆TG的调脂保护作用。本文通过测定MS患者血清ApoA5水平，并对血压、血脂、血糖、体重指数(BMI)等相关因素测定进行了分析，旨在了解ApoA5在MS发病中的作用，能否作为老年MS的一个血清标志物，从而为冠心病等动脉粥样硬化性疾病的防治提供思路。

　　1 资料与方法

　　1.1 研究对象 老年MS组 82例，男50例，女32例，年龄60～88岁，平均(75.3±4.9)岁。均为我科的住院患者、门诊患者和健康查体者。按2004年中华医学会糖尿病分会诊断MS标准〔5〕：具备下列4个组成成分中的3个或全部者可诊断为MS，①肥胖：BMI≥25.0 kg/m2;②高血糖：FPG≥6.1 mmol/L，餐后2 h血糖≥7.8 mmol/L及(或)已确诊为糖尿病者;③高血压：收缩压/舒张压(SBP/DBP)≥140/90 mmHg及(或)已确诊为高血压者;④血脂紊乱：空腹血TG≥1.7 mmol/L及(或)空腹HDLC女性<0.9 mmol/L，男性<1.0 mmol/L。排除有冠心病、脑血管病、肝肾功能不全、急慢性感染、严重的电解质紊乱、自身免疫性疾病、恶性肿瘤和应用激素治疗者。老年对照组 50例，男30例，女20例，年龄60～83岁，平均(74.38±5.83)岁。均为干部保健门诊健康查体者。经询问病史、体格检查以及心电图、动态心电图、空腹血糖、餐后2 h血糖、糖耐量试验、肝肾功能检查等排除有冠心病、糖尿病、高血压、脑血管病等。与老年MS组间年龄比较无统计学差异(P>0.05)。

　　1.2 研究方法

　　1.2.1 实验仪器及试剂 ①离心浓缩系统：Thermo Savant生产，型号为Radiant Cover RC110B;②全自动酶标测定仪：深圳雷杜电子有限公司生产，型号为RT2100C;③CO2培养箱：德国Heraeus 公司生产，型号为BB5060UV;④自动生化分析仪：日本Olympus公司生产，型号为AU1000/2700;⑤ApoA5鼠抗人一抗，兔抗鼠二抗、阳性重组蛋白(浓度为1 mg/ml)、10%BSA母液、96孔板、显色底物均购自湖南远泰生物科技有限公司;⑥脂联素试剂盒，购自深圳依诺金生物科技有限公司;⑦洗板液用0.01 mol/L的TBS;终止液为1 mol/L的h3SO4。

　　1.2.2 样本留取及测定 所有研究对象均在清晨空腹自肘正中静脉采血5 ml，加入普通玻璃试管，37℃放置2 h，3 000 r/min离心5 min，留取血清。取其中1 ml血清于-80℃保存用于ApoA5的测定，其余血清于当日送检。

　　1.2.3 血清各项指标测定 用AU1000/2700型自动生化分析仪(日本OLYMPUS)进行总胆固醇(TC)、TG、HDLC、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B100(ApoB100)和FPG的检测。TC、TG分别采用胆固醇氧化酶过氧化酶4氨基安替比林和酚法和脂蛋白脂肪酶甘油磷酸氧化酶过氧化酶4氨基安替比林和酚法测定，HDLC、LDLC采用直接匀相法测定。

　　1.2.4 ApoA5测定 离心浓缩系统浓缩血清，采用ELISA法进行测定(根据试剂盒说明书进行)。

　　1.3 统计学处理 数据处理采用SPSS13.0统计软件，结果以x±s表示，不同组别之间比较采用t检验。ApoA5与各指标之间的关系用双变量相关分析。

　　2 结 果

　　2.1 两组间ApoA5、血脂、血糖、血压、BMI等指标的比较 见表1。老年MS组的ApoA5和HDLC明显低于对照组，而TC、TG、LDLC、FPG、收缩压(SBP)和BMI水平明显高于老年对照组(P<0.05或P<0.01)。

　　2.2 ApoA5水平与其余各项指标间的相关分析 将所有研究对象作为一个整体，进行血清ApoA5水平与TC、TG、HDLC、LDLC、ApoA1、ApoB100、血糖、血压、BMI之间的双变量相关分析。结果显示：血清ApoA5水平与血清TG、TC水平及BMI之间呈显著负相关(r分别为-0.987、-0.361和-0.445，P<0.01)，与HDLC呈显著正相关(r=0.278，P<0.01);血清ApoA5的水平与年龄(r=-0.152，P=0.157)、血清LDLC(r=-0.110，P=0.310)、血清ApoB100(r=-0.044，P=0.684)、ApoA1(r=0.037，P=0.734)和血糖(r=0.170，P=0.113)水平之间无显著相关关系(P>0.05)。表1 两组ApoA5、血脂、血糖、血压、体重指数等指标的比较与对照组比较：1)P<0.01，2)P<0.05

　　3 讨 论

　　ApoA5基因是新近发现的与TG代谢有关的基因，是通过与小鼠基因组的一个序列比较找到的〔6〕，其定位于11q23染色体上，与ApoA1/C3/A4基因簇相距约30 kb。Vliet等〔7〕研究发现ApoA5过表达的小鼠血浆TG显著下降(70%)，而且发现随着在HDL部分的最大团块的缩减，TC水平下降了40%。这些发现提示了ApoA5在调控循环中的TG和TC水平中的重要地位。Ishihara等〔8〕研究发现，血清ApoA5含量与TG浓度呈负相关，而与HDLC、ApoA1、ApoE浓度呈正相关。本研究结果显示，血清ApoA5含量与TG、TC浓度及BMI，与LDLC、ApoA1、ApoB100浓度及年龄、血糖之间无明显的相关性。ApoA5可能通过PPARα起到降低血浆TG的作用，胆汁酸、法尼醇X活化受体(FXR)、肝X受体(LXR)配体T0901317以及胰岛素可能起到调控ApoA5基因表达的作用〔9～12〕。

　　由于ApoA5与TG代谢密切相关，在肝脏中表达，并受PPARα、胆汁酸、胰岛素等调控，而MS是肥胖、糖尿病、高TG及高血压等多因素的综合，其发生与胰岛素抵抗有关。Dallongeville等〔13〕研究发现，ApoA5 Trp19等位基因升高能敏感性地改善MS患者血浆TG水平。Grallert等〔14〕对高加索人进行研究发现，ApoA5变异体c.56C>G而不是1131T>与MS有联系。本研究结果显示，老年MS组的ApoA5和HDLC明显低于对照组，而TC、TG、LDLC、FPG、SBP和BMI水平明显高于老年对照组(P<0.05或P<0.01)。Nowak等〔12〕研究发现，胰岛素调节ApoA5基因表达，用胰岛素处理过的细胞系和小鼠ApoA5表达下调，并呈剂量依赖性。还有研究发现，胰岛素降低人ApoA5启动子的活性，可能通过磷脂酰肌醇(3)激酶(PI3K)途径。我们认为老年MS患者的ApoA5降低可能与MS患者的胰岛素抵抗有关，但具体的联系及其机制尚不十分清楚，仍需在今后的研究中不断探讨。

　　总之，随着社会经济的发展，人口老龄化趋势的严峻，人们的生活方式也日渐发生改变，MS的发生率大大增加。新近发现的ApoA5与血清TG关系密切，认为其是调节TG代谢的重要因子，同时ApoA5降低是冠心病的危险因素之一。在本研究中，老年MS患者血清ApoA5水平与TG、TC、HDLC和BMI密切相关，说明低ApoA5可作为老年MS的一个血清标志物。

参考文献

　1 Van der Vliet HN，Sammels MG，Leegwater AC，et al.Apolipoprotein A V：a novel apolipoprotein associated with an early phase of liver regeneration〔J〕.J Biol Chem，2001;276(44)：51220.

　　2 Pennacchio LA，Olivier M，Hubacek JA，et al.An apolipoprotein influencing triglycerides in humans and mice revealed by comparative sequencing〔J〕.Science，2001;294(5540):16973.

　　3 Hubacek JA，Skodova Z，Adamkova V，et al.The influence of ApoA5 polymorphisms (T1131>C and S19>W) on plasma triglyceride levels and risk of myocardial infarction〔J〕.Clin Genet，2004;65(2):12630.

　　4 Talmud PJ，Martin S，Taskinen MR，et al.ApoA5 gene variants，lipoprotein particle distribution，and progression of coronary heart disease：results from the LOCAT study〔J〕.J Lipid Res，2004;45(4):7506.

　　5 中华医学会糖尿病分会代谢综合征研究协作组.中华医学会糖尿病分会关于代谢综合征的建议〔J〕.中华糖尿病杂志，2004;12(2)：15661.

　　6 Pennacchio LA，Rubin EM.Genomic strategies to identify mammalian regulatory sequences〔J〕.Nat Rev Genet，2001;2(2)：1009.

　　7 van der Vliet HN，Schaap FG，Levels JH，et al.Adenoviral overexpression of apolipoproteion AV reduces serum levels of triglycerides and cholesterol in mice〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2002;295(5)：11569.

　　8 Ishihara M，Kujiraoka T，Iwasaki T，et al.A sandwich enzymelinked immunosorbent assay for human plasma apolipoprotein AV concentration〔J〕.J Lipid Res，2005;46(9):201522.

　　9 Jakel H，Nowak M，Moitrot E，et al.The liver X receptor ligand T0901317 downregulates ApoA5 gene expression through activation of SREBP1c〔J〕.J Biol Chem，2004;279(44):454629.

　　10 Genoux A，Dehondt H，HelleboidChapman A，et al.Transcriptional regulation of apolipoprotein A5 gene expression by nuclear receptor ROR alpha〔J〕.Arterioscler Thromb Vas Biol，2005;25(6):10979.

　　11 Prieur X，Huby T，Coste H，et al.Thyroid hormone regulates the hypotriglyceridemic gene ApoA5〔J〕.J Biol Chem，2005;280(30):2753343.

　　12 Nowak M，HelleboidChapman A，Jakel H，et al.Insulinmediated downregulation of apolipoprotein A5 gene expression through the phosphatidylinositol 3kinase pathway：role of upstream stimulatory factor〔J〕.Mol Cell Biol，2005;25(4):153748.

　　13 Dallongeville J，Cottel D，Wagner A，et al.The ApoA5 Trp19 allele is associated with metabolic syndrome via its association with plasma triglycerides〔J〕.BMC Medical Genetics，2008;84(9):14712350.

　　14 Grallert H，Sedlmeier EM，Huth C，et al.ApoA5 variants and metabolic syndrome in Caucasians〔J〕.J Lipid Res，2007;48:261421.