【摘要】 目的 探讨乳腺病变患者C-erbB-2的基因产物P185蛋白血清水平测定在临床中的应用价值。方法 酶联免疫吸附试验（ELISA）检测42例乳腺癌、29例乳腺良性病变及40例体检者血清中P185蛋白的含量。结果 乳腺癌和乳腺良性病变患者血清P185蛋白的平均水平分别是（22.67±12.61）、（8.34±5.70） mg/L，两者之间具有显著性差异（P&<0.05）；与正常体检者（5.79±4.47） mg/L相比，乳腺癌患者血清P185蛋白水平明显增高，具有统计学差异（P&<0.05）。以cut-off值为15.8 mg/L判断，乳腺癌组血清P185蛋白的阳性率为45.2%。结论 用ELISA法检测血清中C-erbB-2基因产物P185蛋白水平，有助于术前对乳腺病变的辅助诊断。
【关键词】 乳腺癌 C-erbB-2 酶联免疫吸附试验
Abstract: Objective To study the extracellular level of P185， a soluble oncoprotein fragment of C-erbB-2， in breast cancer patients. Methods Serum samples from 42 patients with primary breast cancer， 29 with benign breast diseases and 40 healthy controls， were assayed in an ELISA for P185. Results The serum level of P185 was higher in the cancer patients than in the patients with benign breast diseases and healthy controls ［（22.67±12.61） mg/L vs. （8.34±5.70） mg/L and (5.79±4.47） mg/L respectively， P&<0.05］. Let 15.8 mg/L be the cut-off value， the positive rate of P185 for breast cancer patients will be 45.2%. Conclusion Monitoring of serum C-erbB-2 level helps to appreciate the status of breast cancer before it is treated.
Key words: breast cancer； C-ebrB-2； ELISA
C-erbB-2又称为EGFR2、neu、HER2、NGL，是一种细胞来源癌基因，编码185×103的表皮生长因子受体样跨膜糖蛋白（P185），此糖蛋白有一个酪氨酸激酶活性的细胞外跨膜功能区和细胞内功能区，在血清中有其可溶性蛋白碎片存在［1-2］。在多种肿瘤组织中，C-erbB-2癌基因及其蛋白产物P185均有过表达和扩增［3-4］。运用定量病理学、免疫组织化学和分子生物学等方法研究发现，20%～30%乳腺癌患者的病变组织中有C-erbB-2癌基因扩增或过度表达。目前普遍认为，C-erbB-2蛋白的阳性表达可作为判断乳腺癌预后的独立指标［5-6］，并且与较多的腋窝淋巴结转移及较差的内分泌治疗和化学治疗效果相关［7］。本研究运用ELISA法定量分析乳腺癌患者血清中C-erbB-2蛋白碎片P185的水平。
1 材料和方法
1.1 一般资料 42例乳腺癌及29例乳腺良性病变患者为2005年6月—2006年9月来我院就诊的门诊患者，均为女性。乳腺癌组：患者年龄31～71岁，平均44.6岁，未经任何化疗和放疗。乳腺良性病变组：包括乳腺增生13例，乳腺导管内乳头状瘤5例，乳腺纤维腺瘤11例，患者年龄27～63岁，平均40.2岁。对照组40例来源于本院的体检者，均为女性，年龄32～53岁，平均42.2岁，经体格检查，未见乳腺有结节、硬块等情况。
1.2 试剂 C-erbB-2/c-Neu Rapid Format ELISA kit (QIA10)购于德国Merck公司。
1.3 方法 用BD公司的真空采血管（不含抗凝剂和促凝剂）采集患者或体检人群静脉全血3 ml，分离血清，-80℃保存。ELISA法参照试剂使用说明书，用酶标仪读取光密度值并换算成质量浓度。
1.4 统计学处理 PASS统计软件进行数据处理，计量数据以±s表示，采用单因素方差分析，P&<0.05为统计学差异有显著性。
2 结 果
乳腺癌、乳腺良性病变患者及正常体检者血清P185蛋白水平见表1。各组血清中P185蛋白的检测水平分别为：乳腺癌11.42～88.34 mg/L、乳腺良性病变2.44～30.92 mg/L，正常体检者0.88～24.53 mg/L 。如果以cut-off值为15.8 mg/L判断，正常体检组中只有1例P185蛋白阳性（1/40，2.5%），乳腺良性病变组中有2例阳性（2/29，6.9%），乳腺癌组有19例阳性（19/42，45.2%）。表1 乳腺癌、乳腺良性病变及体检者血清P185蛋白含量 与乳腺癌组比较：*P&<0.05
3 讨 论
近年来乳腺癌的发病率呈上升趋势，已成为威胁妇女生命的主要肿瘤之一。随着科研技术的飞速发展，对于乳腺癌癌基因的研究也不断深入，特别是对乳腺肿瘤相关抗原或特异性抗原的研究。1981年，Shinc等首次通过NIH/3T3细胞转染试验发现了neu基因。Schechter 等进一步证实neu瘤基因的表达产物为P185蛋白，并且该基因与编码表皮生长因子受体的癌基因一样与病毒癌基因 v-erbB具有同源序列，因此将neu癌基因命名为C-erbB-2。随着研究的深入，发现在多种腺癌细胞中C-erbB-2基因均有高水平表达，并可以用其蛋白产物P185的高表达间接反映。对P185的病理研究首先见于乳腺癌。Kalogeraki等［8］报道乳腺导管癌C-erbB-2基因表达率60%，P185的过量表达率为10%～30%。我们也发现C-erbB-2蛋白在乳腺导管内癌的细针抽吸物的阳性表达率为57.1%，浸润性导管癌为59.1%［9］。
C-erbB-2癌基因编码的185×103跨膜磷酸糖蛋白［2］，已确认在细胞外的磷酸糖蛋白作为一个受体而代表一个未确定的配体，在细胞内的部分有促进酪氨酸激酶活性的作用。Jukkola等［12］报道C-erbB-2阳性乳腺癌患者预后差，阳性晚期患者对激素治疗及含或不含蒽环类抗生素联合化疗的疗效均差，复发的概率也较大。近年来，用Herceptin药物治疗转移性乳腺癌是成功的一个例子，其实这种药物就是一种对抗C-erbB-2蛋白细胞外区域的单克隆抗体，对过度表达C-erbB-2蛋白的患者特別有效。
本研究结果提示，乳腺癌患者血清中C-erbB-2基因产物P185可视为癌症的早期标记物，有助于术前对乳腺病变的辅助诊断；另一方面，推测可以帮助医生选择适合做Herceptin治疗的患者，并可能用以追踪治疗的疗效，有待于进一步研究。
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