作者：韩永正 刘刚 徐小林 钱莹 戴体俊 韩连云
【摘要】 目的 观察小剂量纳洛酮对小鼠学习记忆功能的影响。方法 小鼠分为生理盐水(NS)组、纳洛酮(NL)组，根据纳洛酮剂量的不同，NL组又分为NL1、NL2、NL3、NL4和NL5组(剂量分别为1000、100、10、1和0.1 ng· kg-1)，每组10只。用跳台法和避暗法分别观察各剂量纳洛酮对小鼠学习记忆功能的影响。结果 给药后第1、2天各组跳台法和避暗法的错误次数、潜伏期无显著性差异(P&>0.05) 。结论 在本实验条件下，小剂量纳洛酮对小鼠学习记忆功能无明显影响。
【关键词】 纳洛酮;跳台实验;避暗实验;学习记忆
纳洛酮(naloxone)是特异性阿片受体竞争性阻断药，可有效、全面拮抗天然或合成的麻醉性镇痛药，能拮抗吗啡等麻醉镇痛药的药理作用和不良反应，特别是逆转麻醉镇痛药对中枢神经系统和呼吸的抑制［1］。阿片类药物成瘾之后，其记忆十分强烈，而且可导致终生难忘，说明学习记忆功能参与了阿片的成瘾过程［2］。如果小剂量纳洛酮能增强吗啡的遗忘作用，将更有临床意义。为阐明这一问题，必须首先明确小剂量纳洛酮对学习记忆功能的影响。小剂量纳洛酮对学习记忆功能有何影响，国内外鲜见报道。本实验用跳台法和避暗法观察小剂量纳洛酮对小鼠学习记忆功能的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物 昆明种小鼠60只，体重18～22 g，雌雄各半，由徐州医学院实验动物中心提供。实验前2天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水。
1.2 实验药品 纳洛酮注射液，北京凯因生物技术有限公司，批号20071105。用生理盐水稀释成所需浓度。
1.3 主要仪器 YLS-3T型跳台仪，安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司研制，用不透明深灰色塑料分隔成5室，每室120 mm×20 mm×180 mm，电栅电压100 V，电流0.05～2.0 mA。每间室右后角置一绝缘平台(高4.5 cm)作为动物回避电击的安全台。BA-200型小鼠避暗仪，成都泰盟科技有限公司研制，实验装置分明暗两室，两室之间有一直径为3 cm大小的圆洞，两室底部均铺以铜栅，暗室接电。
1.4 实验方法
1.4.1 跳台实验［3］ 正式实验前先把小鼠放入反应箱内适应3 min，通以0.25 mA电流电击。训练时跳台潜伏期大于180 s者弃去不用。记录小鼠5 min内第1次从平台跳下的时间(潜伏期)和跳下的次数(错误次数)，将其作为基础成绩将小鼠分成6组，使各组小鼠智力水平接近。然后按分层随机区组设计，将小鼠分为生理盐水组（NS组）和纳洛酮组（NL组），根据纳洛酮剂量的不同(1000、100、10、1和0.1 ng·kg-1)，NL组又分为NL1、NL2、NL3、NL4、NL5组，使各组小鼠平均体重和性别比例无显著性差异。分组结束24 h后，NS组以0.1 ml·10 g-1腹腔注射生理盐水，NL组分别以1000、100、10、1和0.1 ng·kg-1腹腔注射相应剂量的纳洛酮。各组注药10 min后重新测试。记录小鼠第1次跳下平台的潜伏期和3 min内跳下平台的错误次数。若小鼠在平台上超过3 min，其潜伏期以180 s计。用药第2天重新测试各小鼠， 记录潜伏期和错误次数。
1.4.2 避暗实验［3］ 训练时先将小鼠放入反应箱中适应3 min，然后暗室底部铜栅通40 V、50 Hz交流电。将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室则受到电击。训练时避暗潜伏期大于180 s者弃去不用。记录5 min内第1次进入暗室的时间(潜伏期)和进入次数(错误次数)作为基础成绩。各组注药10 min后重新测试。记录小鼠第1次进入暗室的潜伏期，5 min内进入暗室的错误次数。如5 min内小鼠仍未进入暗室，错误次数计为0次，潜伏期计为300 s。用药第2天重新测试各小鼠。
2 结 果
见表1、2。表1 小剂量纳洛酮对小鼠学习记忆的影响表2 小剂量纳洛酮对小鼠学习记忆的影响从表1和表2中可见，在用药前各组小鼠的错误次数和潜伏期无显著性差异(P&>0.05)，表明各组小鼠基础智力相似。用药第1、2天，无论是跳台实验还是避暗实验，各组小鼠的错误次数和潜伏期亦无显著性差异（P&>0.05），表明小剂量纳洛酮对小鼠的学习记忆无明显的影响。
3 讨 论
记忆是人类和动物赖以生存所不可缺少的重要脑功能之一。一般把记忆分为3个阶段，即获得、巩固和再现。本实验是以训练后给药测定记忆的获得过程。
人和动物的内在心理过程是无法直接观察到的，只能根据可观察到的刺激反应来间接推测。跳台实验和避暗实验是常用的研究动物记忆的实验方法，用于观察回避性反应［3］。
本组实验结果表明：在本实验条件下，小剂量纳洛酮对小鼠学习记忆功能无明显影响。
研究显示，阿片受体与记忆密切相关［4］。纳洛酮作为临床上常用的催醒药，可以缩短氯胺酮麻醉持续时间［5］，但其所用剂量较大（2 mg· kg-1）。本实验所用剂量为1000、100、10、1和0.1 ng·kg-1，剂量较小，对学习记忆功能无明显影响。至于小剂量纳洛酮合用吗啡对学习记忆功能有何影响及其机制尚待进一步研究。
参考文献
［1］ 刘俊杰，赵 俊.现代麻醉学［M］.第3版.北京:人民卫生出版社，1987:227.
［2］ 李 竹，吴春福.阿片系统与学习记忆［J］.沈阳药科大学学报，2000，17(5):383-386.
［3］ 张均田.学习、记忆实验法［M］//徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学.第3版.北京:人民卫生出版社，2002:826-834.
［4］ Omrani A， Ghadami MR， Fathi N， et al. Naloxone improves impairment of spatial performance induced by pentylenetetrazol kindling in rats ［J］. Neuroscience，2007，145(3):824-831.
［5］ 张法强，王宏刚，纪振华，等.不同催醒药对氯胺酮麻醉小鼠的催醒效果［J］.徐州医学院学报，2008，28(5):297-299.