盐酸川芎嗪对婴幼儿先天性心脏病体外循环术后白介素6、白介素8及中性粒细胞的影响

　　　　 作者：王刚，潘征夏，吴春，李洪波，李勇刚，代江涛，罗小辑

【摘要】 目的：探讨盐酸川芎嗪对婴幼儿先天性心脏病体外循环(CPB)术后细胞因子IL6、IL8及中性粒细胞的影响。方法：40例经CPB行先天性心脏病手术的患儿随机分为观察组20例，对照组20例。观察组术前1 h静脉给予川芎嗪(5 mg/kg)，对照组给予同等剂量生理盐水。分别在气管插管后10 min(T1)、转流后5 min(T2)、手术结束时(T3)、手术后2 h(T4)、手术后24 h(T5)采集动脉血3 mL，离心取血浆，通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测致炎细胞因子IL6、IL8血浆浓度，同时对每一时点中性粒细胞计数。结果：两组IL6在手术结束时(T3)、术后2 h(T4)，IL8在手术结束时(T3)升高显著(P<0.05)，而对照组升高更显著(P<0.01)，在手术后24 h(T5)均下降并接近正常，但IL6对照组仍比观察组偏高;中性粒细胞CPB术后升高，但两组间差异无统计学意义。结论：术前应用盐酸川芎嗪对婴幼儿先天性心脏病CPB术后致炎细胞因子IL6、IL8有抑制作用。

【关键词】 盐酸川芎嗪;体外循环;婴幼儿

　　[Abstract] Objective: To study the effect of Ligustrazine Hydrochloride on IL6， IL8 and neutrophil after cardiopulmonary bypass (CPB). Methods: Forty infants with congenital heart disease were randomly pided into two groups: 20 cases in the observing group and 20 cases in the control group. With the ELISA， the plasma concentrations of the proinflammatory cytokines such as IL6， IL8 and neutrophil were measured at the time points of T1 (10 min after the trachea cannula)， T2 (5 min after bypass)， T3 (time of the surgery termination)， T4 (2 hours after the surgery) and T5 (24 hours after the surgery). Results: After CPB， the concentrations of IL6 at T3， T4 and IL8 at T4 had increased significantly (P<0.05)， but the changes of the concentration of the control group were more significant (P<0.05)， with a decrease close to the normal level at T5， but IL6 concentration was a little higher than the treated group; the neutrophile quantity increased after CPB， but the difference was not significant between the two groups (P>0.05). Conclusions: Preoperative application of the ligustrazine hydrochloride in infants with congenital heart disease could reduce the peak level of IL6 and IL8 after CPB.

　　[Key words] Ligustrazine Hydrochloride; Cardiopulmonary bypass; Infant

　　体外循环(cardiopulmonary bypass，CPB)是一种非生理性的循环方式，可诱发全身炎症反应，对机体组织、器官造成不同程度的损害，而IL6、IL8及中性粒细胞在其中发挥了重要作用[1]，并且对肺组织的危害最为严重[2]。有报道[3]术后肺功能障碍的发生率约占15%～30%，严重者可导致急性呼吸窘迫综合征及死亡。2007年3～10月，我们采用ELISA法检测了先天性心脏病患儿CPB前后IL6、IL8血浆浓度及中性粒细胞的变化，旨在探讨川芎嗪对婴幼儿先天性心脏病体外循环(CPB)术后致炎细胞因子及中性粒细胞的影响。

　　1 资料与方法

　　1.1 临床资料

　　40例先天性心脏病患儿中，男21例，女19例，年龄2个月～2.5岁(1.08±0.45)岁，体重3.5～10.5(7.35±2.11)kg;病种包括VSD(室间隔缺损)29例，VSD合并ASD(房间隔缺损)/PDA(动脉导管未闭)3例，ASD 4例，ASD合并PDA 2例，TAPVC(完全性肺静脉异位引流)(心内型)及PAPVC(部分性肺静脉异位引流)各1例;所有患儿均有不同程度肺动脉高压，其中轻度12例，中度21例，重度7例。所有患儿术前检查均排除有严重的肺功能障碍以及合并有严重的肝、肾功能异常。随机分为观察组和对照组，每组20例，两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

　　1.2 手术方法

　　CPB采用Stockert SC人工心肺机、Medtronic 3301膜式氧合器、Dideco 901膜式氧合器、宁波菲拉尔体外循环管道、宁波菲拉尔动脉微栓过滤器、东莞科威婴儿心肌保护装置和Dideco婴儿型血液浓缩器。全部病例选择中低温(25～30 ℃)静脉复合麻醉，常规建立CPB，在主动脉根部直接应用冷晶体停跳液灌注(10～15 mL/kg)，保护心肌，灌注流速2～2.5 L/(min·m2)，动脉压维持在20～30 mm Hg。缺损修补完成2/3时复温，肛温25～32 ℃时降低流量开放主动脉。CPB转流中应用a稳态方法进行血气管理和电解质平衡管理，术毕关胸。

　　1.3 样品的收集、处理

　　观察组术前1 h静脉给予盐酸川芎嗪(5 mg/kg，哈尔滨三联制药厂)，对照组给予同等剂量生理盐水。血液标本在下列时间点采集：气管插管后10 min(T1)、转流后5 min(T2)、手术结束时(T3)、手术后2 h(T4)、手术后24 h(T5)。所有血液标本均从检测插管(桡动脉)采集，放置于不同的含1%肝素(杭州众维生物技术有限公司)的收集管内，每次3 mL，在4 ℃下4 000 r/min离心10 min(日本久保田公司KUBOTA6930型冷冻离心机)，取上层血浆放于聚丙烯管，置-30 ℃冰箱[SANYO公司Sanyo Medical Freezer(MDFU322)冻箱]保存备用。

　　1.4 观察指标

　　以双抗体夹心ABCELISA法(试剂盒为美国R&B公司生产，批号：20080126，奥地利TECAN公司的酶标仪和自动洗板机)检测IL6、IL8在气管插管后10 min(T1)、转流后5 min(T2)、手术结束时(T3)、术后2 h(T4)、手术后24 h(T5)的血浆浓度，同时测定中性粒细胞数。

　　1.5 统计学方法

　　计量资料以±s表示，采用t检验，计数资料进行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 临床结果

　　两组手术时间、CPB时间、主动脉阻断时间、辅助呼吸时间、ICU停留时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。术后观察组并发肺炎3例，对照组9例。表1 两组临床结果比较

　　2.2 IL6、IL8及中性粒细胞变化

　　结果见表2。两组中IL6在T3、T4、IL8在T3升高，差异有统计学意义(P<0.05)，而对照组升高更明显(P<0.01)，在T5均下降并接近正常，但IL6对照组仍比观察组偏高;中性粒细胞CPB后升高明显，但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。表2 两组IL6、IL8及中性粒细胞变化比较注：与T1比较，*P<0.05，**P<0.01;与对照组比较，#P<0.05。

　　3 讨论

　　目前多数学者认为CPB引起的全身炎症反应综合征是导致CPB后肺损伤的主要因素，其中IL6、IL8及中性粒细胞起了重要作用[1]。IL6由激活的巨噬细胞、淋巴细胞及上皮细胞分泌，当肺组织在炎症刺激下，肺泡灌洗液、血清中IL6水平显著升高并持续较长时间[4]。IL6持续升高可激活中性粒细胞，大量中性粒细胞在炎症部位聚集，释放弹性蛋白酶及各种氧自由基，造成毛细血管内皮细胞、肺泡上皮细胞损害及血管外基质破坏，导致肺血管通透性增高，肺泡表面活性物质破坏，引起严重的肺水肿，进而导致剧烈的全身性炎症反应，是导致ARDS的重要因素[5]。IL8可使肺组织中大量的中性粒细胞聚集，并与中性粒细胞表面的特异性受体结合导致白细胞发生变形反应、脱颗粒、呼吸爆发，释放蛋白溶解酶和活性氧，引起炎症反应，从而引起肺组织损伤[6]。

　　盐酸川芎嗪是一种活性生物碱单体，药理作用广泛且副作用小，其中一项重要作用是能抑制肿瘤坏死因子在炎性反应中的启动和触发作用，从而抑制IL6、IL8的产生和释放，并可抑制由细胞因子刺激血管内皮细胞ICAM1的合成与表达，从而达到抑制白细胞粘附的作用。

　　本研究中，两组在CPB后IL6、IL8及中性粒细胞均有升高，而在观察组中IL6、IL8的升高水平明显较对照组低(P<0.05)，并且早于对照组恢复到正常水平，表明在术前应用盐酸川芎嗪对CPB引起机体IL6、IL8的释放起到了抑制作用，从而减轻CPB诱发的全身炎症反应综合征，减轻肺损伤。但中性粒细胞两组比较差异无统计学意义，说明盐酸川芎嗪对中性粒细胞无抑制作用。在临床表现方面，对照组术后肺炎发生率高于实验组，两组辅助呼吸时间差异虽无统计学差异，但对照组仍较实验组长。推测可能是应用盐酸川芎嗪后，因抑制了IL6、IL8的释放，减轻了全身炎症综合征对肺的影响，利于术后恢复。

　　婴幼儿先天性心脏病CPB术引起全身炎症综合征可对肺功能造成损害，IL6、IL8及中性粒细胞起到了重要作用，通过在CPB前应用盐酸川芎嗪，可减弱CPB后致炎细胞因子IL6、IL8的释放，减轻全身炎症反应综合征，从而减轻肺损伤，但其机制有待深入研究。

参考文献

　[1] Ng CS， Wan S， Yim AP， et a1. Pulmonary dysfunction after cardiac surgery [J]. Chest， 2002， 121: 1269.

　　[2] Kallapur SG， Jobe AH. Contribution of inflammation to lung injury and development [J]. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed， 2006， 91(1): 132.

　　[3] 甄福喜， 陈 亮， 张 浩. 前列腺素E1在心肺转流中的肺保护作用[J]. 江苏医药， 2006， 32(6): 543.

　　[4] 肖 刚， 赵文静. 乌司他丁对呼吸机所致肺损伤大鼠体内炎性因子的影响[J]. 徐州医学院学报， 2007， 27(12): 780.

　　[5] Smith CJ， Emsley HCA， Gavin CM， et al. Peak plasma interleukin6 and other peripheral markers of inflammation in the first week of ischaemic stroke correlate with brain infarct volume，stroke severity and long term outcome [J]. BMC Nerology， 2004， 4: 2.

　　[6] Osman MO， Kristensen JU， Jacobsen NO， et a1. A monoclonal antiinterleukin 8 antibody (WS4) inhibits cytokine response and acute lung injury in experimental severe acute necrotising pancreatitis in rabbits [J]. GUT， 1998， 43: 232.