蜂王浆对低钙条件下离体蟾蜍心脏心率和心肌收缩力的影响

　　　　 作者：傅雷 关升 王冬梅 林原 付娟 唐泽耀

【摘要】 目的 观察不同浓度蜂王浆溶液对离体蟾蜍心率和心肌收缩力的影响。方法 30只蟾蜍随机分为任氏液组、任氏液+蜂王浆组和低钙任氏液+蜂王浆组，每组10只。采用斯氏法制备离体蛙心灌流标本。对照组离体蟾蜍心脏只灌流任氏液，任氏液+蜂王浆组在离体蟾蜍心脏的灌流任氏液中加入蜂王浆溶液，低钙任氏液+蜂王浆组在离体蟾蜍心脏灌流低钙任氏液中加入蜂王浆溶液。通过蟾蜍心室外采用心室收缩波动、心室吸收药物的方法给药，心室外容积固定为1.0 ml，根据所需蜂王浆浓度计算出加入原浆蜂王浆的容积，每次加入蜂王浆后记录10～20 min。应用BL420F生物机能实验系统记录的离体蟾蜍心肌收缩曲线，并进行心肌收缩力和心率的统计学分析。结果 任氏液+蜂王浆组与任氏液组比较，在1∶5 000浓度时蜂王浆能明显抑制离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力（P＜0.05）；在1∶500浓度时，蜂王浆可显著抑制离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力，甚至心脏停止跳动呈剂量依赖关系；低钙任氏液+蜂王浆组与任氏液组比较，在1∶10 000浓度时蜂王浆明显抑制离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力（P＜0.05）；在1∶1 000浓度时，蜂王浆显著抑制离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力，甚至心脏停止跳动呈剂量依赖关系。低钙任氏液+蜂王浆组与任氏液+蜂王浆组比较，在1∶5 000浓度蜂王浆能明显抑制离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力（P＜0.05）。结论 在低钙条件下，蜂王浆对离体蟾蜍心脏活动的抑制比在正常钙任氏液条件下更容易出现。

【关键词】 蜂王浆；低钙；心肌收缩力；心率

　　【Abstract】 Objective To observe the effect of different concentration of royal jelly on exsomatize toad heart rate(HR) and myocardial contraction force under lower Ca2+ condition. Methods Conventional irrigated exsomatize frog heart was used. The toads were pided into: normal Ren solution， normal Ren solution + royal jelly and low calcium Ren solution + royal jelly groups. Results Royal jelly suppressed exsomatize toad HR and myocardial contraction force?? when the concentration of royal jelly was 1∶5 000 in normal Ren solution + royal jelly group comparison with those in normal Ren solution (P＜0.05); Royal jelly significantly suppressed exsomatize toad HR and myocardial contraction force when the concentration of royal jelly was 1∶500， even heart arrest， in the manner of dosage dependence. Royal jelly suppressed the exsomatize toad HR and myocardial contraction force when the concentration of royal jelly was 1∶10 000 in low calcium Ren solution + royal jelly group comparison with those in normal Ren solution group (P＜0.05); Royal jelly significantly suppressed the exsomatize toad HR and myocardial contraction force when the concentration of royal jelly was 1∶1 000， even the heart arrest， also in the manner of dosage dependence. Royal jelly significantly suppressed the exsomatize toad HR and myocardial contraction force when the concentration of royal jelly was 1∶5 000 in low calcium Ren solution + royal jelly group comparison with those in normal Ren solution + royal jelly group (P＜0.05). Conclusions Exsomatize toad cardiac activity is inhibited by royal jelly under the low calcium condition compared to normal Ren solution condition.
　　
　　【Key words】 Royal jelly; Low calcium; Myocardial contraction force; Heart rate

　　蜂王浆为蜜蜂科中华蜜蜂及意大利蜜蜂之工蜂咽腺分泌的乳白色胶状物，具有滋补、强壮、益肝和健脾之功能，而且在抗菌、抗癌、抗衰老、抗氧化、提高机体免疫功能等方面具有独特的疗效，在机能恢复上卓有成效〔1，2〕。研究表明，蜂王浆通过对脂肪代谢的调节，降低血脂和胆固醇，从而治疗高血脂，并对血压有双向调节作用，始终将血压向正常范围调节〔3〕。本研究着重探讨蜂王浆的保健作用及不同剂量对心脏功能的影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物 中华蟾蜍30只，体重80～100 g，由大连医科大学实验动物中心提供。所有蟾蜍随机分为对照组、任氏液+蜂王浆组和低钙任氏液+蜂王浆组，每组10只。

　　1.2 方法

　　1.2.1 试剂与仪器 蜂王浆由大连鑫毅蜂产品有限公司生产（批号GB9697）。任氏液（1 000 ml蒸馏水中NaCl 6.50 g，KCl 0.14 g，CaCl2 0.12 g，NaHCO3 0.20 g，Nah3PO4 0.01 g），低钙任氏液（ 1 000 ml中CaCl2 0.06 g，其余成分同任氏液），BL420F生物机能实验系统（成都泰盟公司）和张力换能器。

　　1.2.2 模型制备 取1只蟾蜍破坏其脑和脊髓后，仰卧位固定于蛙板上，剪开胸壁，暴露心脏，在两个主动脉下穿两根丝线，在主动脉球上端向心脏方向剪一斜向的切口，将盛有少量任氏液的玻璃蛙心插管先插入动脉球，后在心缩期插入心室，将其中的一根丝线结扎，并固定；另一根丝线远离静脉窦结扎其余的动静脉。若插管的管尖在蟾蜍的心室内，则见管中液面随着心搏而升降。将心脏连同静脉窦一起剪下，吸去管内的血液，并用任氏液反复冲洗心室内的血液。

　　1.2.3 给药方法 对照组离体蟾蜍心脏只灌流任氏液，任氏液+蜂王浆组在离体蟾蜍心脏的灌流任氏液中加入蜂王浆溶液，低钙任氏液+蜂王浆组在离体蟾蜍心脏灌流低钙任氏液中加入蜂王浆溶液。通过蟾蜍心室外采用心室收缩波动、心室吸收药物的方法给药。心室外容积固定为1.0 ml，根据所需蜂王浆浓度计算出加入原浆蜂王浆的容积，每次加入蜂王浆后记录10～20 min。

　　1.2.4 检测指标 将玻璃蛙心插管的上端用试管夹固定于铁支架台上，将蛙心夹上的丝线连接于张力换能器的黄片上，换能器的输出线与计算机的输入接口相连。待蟾蜍心脏插管稳定1h左右，采用计算机描记心肌收缩曲线，应用BL420生物机能实验系统记录蟾蜍的心肌收缩曲线，固定心脏外容积为1.0 ml，调节张力换能器与蟾蜍心脏之间连线的张力至7g左右，固定放大器灵敏度、时间常数和滤波等参数。

　　1.3 统计学分析 数据用x±s表示，应用SPSS13.0计算机软件进行分析，组间进行单因素方差分析。

　　2 结果

　　2.1 蜂王浆对离体蟾蜍心率的影响 见表1。任氏液+蜂王浆组与任氏液组离体蟾蜍心脏的心率在蜂王浆1∶5 000时开始有抑制，分别为25.58±1.4和28.56±1.9（P＜0.05），在1∶1 000时分别为22.38±1.1和28.36±1.4（P＜0.05），在1∶500时心脏停止跳动。低钙任氏液+蜂王浆组与任氏液组离体蟾蜍心脏的心率在蜂王浆1∶10 000时开始有抑制，分别为26.28±1.4和28.61±1.2（P＜0.05），在1∶2 000时分别为21.7±1.8和28.14±0.9（P＜0.05），在1∶1 000时心脏停止跳动。低钙任氏液+蜂王浆组与任氏液+蜂王浆组离体蟾蜍心脏的心率在蜂王浆1∶5 000时开始有明显抑制，分别为23.86±1.6和25.58±1.4（P＜0.05）。

　　2.2 蜂王浆对任氏液或低钙任氏液灌流离体蟾蜍心肌收缩力的影响 见表2。任氏液组+峰王浆组与正常任氏液组离体蟾蜍心脏的心肌收缩力在蜂王浆1∶5 000时开始有抑制，分别为5.25±0.4和7.05±0.7（P＜0.05），在1∶1 000时分别为3.54±0.4和6.89±0.7（P＜0.01），在1∶500时心脏停止跳动。低钙任氏液+蜂王浆组与任氏液组离体蟾蜍心脏的心肌收缩力在蜂王浆1∶10 000时开始有抑制，分别为5.1±0.6和6.85±0.7（P＜0.05），在1∶2 000时分别为3.34±0.4和6.85±0.6（P＜0.01），在1∶1 000时心脏停止跳动。低钙任氏液+蜂王浆组与任氏液+蜂王浆组离体蟾蜍心脏的心肌收缩力在蜂王浆1∶10 000时开始有明显抑制，分别为5.1±0.6和7.08±0.7（P＜0.05）。

　　表1 蜂王浆对离体蟾蜍心率的影响（略）

　　与正常任氏液组比较：1）P＜0.05；与任氏液+蜂王浆组比较：2）P＜0.05；下表同

　　表2 蜂王浆对离体蟾蜍的心肌收缩力的影响（略）

　　3 讨论
　　
　　研究表明，蜂王浆具有降血压、抗疲劳、抗变态反应、抗菌、性激素样作用、免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、对实验性П型糖尿病大鼠心肌的保护、抗病毒性心肌炎等作用〔4～7〕。另外，蜂王浆中还含有丰富的乙酰胆碱，是蜂王浆中的活性物质，在体内可直接被吸收利用，是记忆和神经信息传递的重要介质，对脑力、思维能力、记忆能力的提高起到重要作用。乙酰胆碱能与心肌细胞膜的M型胆碱能受体结合，增加膜对K+的通透性，降低膜对Ca2+的通透性，使膜电位更接近于K+的平衡位点，抑制心肌细胞的收缩，当蜂王浆溶液达到一定浓度产生心肌细胞收缩力起到抑制作用。本研究显示，离体蟾蜍心脏在正常任氏液灌流中加入蜂王浆，当蜂王浆浓度达到1∶5 000时，离体蟾蜍心脏开始明显抑制，与有关报道〔8〕基本相似。有研究表明，老年人低钙能够引起心力衰竭〔9〕，细胞外液中Ca2+浓度下降可以触发心肌细胞收缩对Ca2+敏感性增强。本研究亦显示，离体蟾蜍心脏在低钙任氏液灌流中蜂王浆浓度达到1∶10 000时，离体蟾蜍心脏开始明显抑制，比在正常钙任氏液灌流中加入蜂王浆离体蟾蜍心脏开始明显抑制的浓度明显降低，并且停止心脏跳动的浓度也下降，说明蜂王浆对离体蟾蜍心脏活动的抑制在低钙条件下比在任氏液条件下更容易发生。对于老年人特别是易患低钙血症的老年妇女，在服用蜂王浆时应注意控制剂量，并对心脏并发症进行监测。此外，蜂王浆中还存在其他多种活性组分，如组织胺、5羟色胺、心脏肽、微量元素硒等，但对心肌、平滑肌的影响可能只起到从属地位。蜂王浆对心肌的抑制作用可能通过对 ATP 酶活性的影响，保持机体的能量储备的机制发挥作用〔10〕。
　　
　　蜂王浆对心肌收缩力的具体作用机制涉及到更微观的领域（细胞和分子生物学等），目前尚未有相关报道，蜂王浆含有的具体成分对心肌收缩作用尚有待于进一步研究。

参考文献

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