酮康唑乳膏的质量标准研究

【摘要】 目的：建立酮康唑乳膏的质量标准研究。方法：利用薄层色谱法对酮康唑乳膏中有关物质进行检查，同时采用紫外分光光度法并以酮康唑为标准对制剂中的酮康唑进行含量测定。结果：供试品色谱与对照品相应位置显相同颜色斑点，且杂质斑点不超过1.5%。在定量分析中，测定酮康唑的线性范围为4.08～32.64μg/mL，与吸收度呈良好线性关系，A=0.0269C-0.0003，r=0.99993；平均回收率99.7%，RSD=0.2%；样品测定均在质量控制合格范围内。结论：该法简便易行，重现性好，结果可靠，可作为该制剂的质量控制标准。

【关键词】 酮康唑乳膏；酮康唑 ；紫外分光光度法；薄层色谱法；质量标准

　　酮康唑乳膏由酮康唑、凡士林、液状石蜡、甘油、硬脂酸镁等成分组成，具有消炎、止痒、抗菌功能，对手癣、足癣、体癣、股癣、花斑癣及皮肤念珠菌病具有良好的疗效。为了控制该制剂质量，采用薄层色谱法对酮康唑乳膏中的有关物质进行检查，同时采用紫外分光光度法并以酮康唑为标准对制剂中的酮康唑进行其含量测定。

1 仪器与试药

　　
通用UV1901双光束紫外分光光度仪；BS110S电子天平；水浴锅；双槽展开缸；薄层板（自制）；分液漏斗；漏斗；脱脂棉等。酮康唑乳膏（海南三叶制药有限公司生产）； 酮康唑对照品（中国生物制品检定所）；正己烷；醋酸乙酯；甲醇；冰醋酸；氯仿；盐酸；氨；无水乙醇；空白基质。

2 方法与结果

2.1 有关物质检查（薄层层析）［1］

2.1.1 供试品溶液的制备 取酮康唑乳膏约2.5g，置烧杯中，加0.1mol/L盐酸溶液25mL，在水浴上加热，充分搅拌使酮康唑乳膏溶解，放冷后滤入分液漏斗中，同法提取3次，合并滤液，加25%氨水中和至中性，用氯仿提取3次，每次25mL，每次得到的氯仿液用经氯仿湿润的脱脂棉滤入蒸发皿中，合并氯仿液，挥干氯仿。取5mL氯仿倒入蒸发皿内，使之溶解，然后再倒入5mL容量瓶内，用氯仿定容，摇匀即可。

2.1.2 对照品溶液的制备 取供试品溶液0.5mL置于50mL容量瓶内，用氯仿定容，摇匀即可。

2.1.3 薄层板的制备 供薄层层析用薄层板为自制板，规格为100mm×200mm，取青岛硅胶G3g，用含0.5%CMCNa的水溶液为粘合剂（1∶3），手工涂制好后，水平放置自然干燥，置1100℃条件活化0.5h，取出置于变色硅胶干燥器中备用。

　　
取对照品溶液各15、10、5μL；供试品溶液10μL在薄层板上分别点样，以正己烷醋酸乙酯甲醇水冰醋酸（42∶39∶15∶2∶1.5）作展开剂，展距上行展开12～15cm，取出，晾干，置碘蒸气中至斑点显色清晰。结果见图1。

注：1.对照品溶液15μL 2.对照品溶液10μL
3.对照品溶液5μL　　4.供试品溶液10μL

图1 薄层色谱

2.2 含量测定［1］

李媚等.酮康唑乳膏的质量标准研究
2.2.1 波长选择 （1）对照试验：精密称取经80℃减压干燥4h的酮康唑对照品约0.04g，置于100mL容量瓶中，用氯仿定容，摇匀；精密量取该溶液2mL置50mL容量瓶中，用无水乙醇定容。采用分光光度法［1］，在200～400nm波长范围内扫描紫外吸收光谱;(2)空白试验:精密称取空白基质适量（约2g）置烧杯中，加0.1mol/L盐酸溶液25mL，在水浴上加热，充分搅拌使酮康唑溶解，放冷后，滤入分液漏斗中，同法提取3次，合并滤液，加氨试液中和至恰析出沉淀，再加氨试液1滴，用氯仿振摇提取3次，每次25mL，每次得到的氯仿提取液用经氯仿湿润的脱脂棉滤入100mL量瓶中，用适量氯仿洗涤棉花和滤器，合并氯仿液，并用氯仿稀释至刻度，摇匀；精密称取该溶液2mL，置于50mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。照分光光度法，在200～400nm波长描光谱。

　　
由对照试验和空白试验可见，酮康唑在244nm、298nm 2个波长处均有吸收峰，其中244nm处的吸收度最大，且在测定浓度下空白基质无干扰，故确定244nm为本品酮康唑乳膏的含量测定波长。

2.2.2 线性试验 照“（1） ”项下提取方法制成1mL中约含酮康唑0.4mg的溶液；精密量取该溶液0.5、1、2、3、4mL，分别置于50mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，采用分光光度法，在244nm的波长处分别测定吸收度，计算回归方程。结果见表1。

表1 标准曲线测定数据

对照品浓度
（mg/mL）4.088.1616.3224.4832.64
吸收度值（A）0.10430.22340.43890.65920.8738

　　
计算得回归方程为：A=0.0269C-0.0003，r=0.99993。由测定结果提示：酮康唑在4.08～32.64μg/mL范围内浓度与吸收度呈良好的线性关系。见图2。

图2 酮康唑标准曲线

2.3 精密度试验

2.2.3 精密度试验 精密称取本品适量（约2g），照“（2）”项下提取方法制成供试品溶液。取该溶液重复测定6次，吸收度（A）的相对标准偏差为0.1%。

2.2.4 重复性试验 精密称取同一批样品（批号：080105）6份，分别照“(2)”项下提取方法制成供试品溶液。再照“(1)”项下提取方法制成对照品溶液。参照分光光度法，在244nm的波长处分别测定吸收度，结果显示样品含量平均值为100.1%，RSD为0.19%（n=6）。从而证明重现性良好。

2.2.5 稳定性试验 取同一批号（批号：080105）样品，照“(2)”项下提取方法制成供试品溶液，于制样后不同时间进样测定，结果见表2。

表2 稳定性考察

测定时间
（h） 0　　2 4 8 12 RSD（%）
吸收度
(A) 0.4331 0.4337 0.4325 0.4318 0.4304 0.3

　　实验所得RSD为0.3%，说明供试品溶液在室温下放置12h内测定稳定。

2.2.6 回收率试验 精密称取经80℃减压干燥4h的酮康唑对照品适量，加入按处方比例的空白基质，照“(2)”项下提取方法制成供试品溶液，另精密称取同批酮康唑对照品适量，照“(1)”项下提取方法制成对照品溶液。采用分光光度法，在244nm的波长处分别测定吸收度。结果显示平均回收率为99.7%，RSD为0.2%（n=6）。由此可见本品含量测定方法的回收率良好。

2.2.7 样品含量测定 根据酮康唑乳膏含量测定方法学的研究结果，确定本品含量测定方法如下：取本品约2g，精密称定，照“(2)”项下提取方法制成供试品溶液，另精密称取同批酮康唑对照品适量，照“(1)”项下提取方法制成对照品溶液。采用分光光度法（附录IVA），在244nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。不同批号的样品含量测定结果见表3。

表3 酮康唑乳膏含量测定结果

样品
批号称取样
品量（g）吸收度
（A）H
（%） 平均值
（%）RSD
（%）

080105 2.0307 0.4378100.21 100.1 0.16

1.99410.4290 99.99
080109 2.01450.431599.5699.4 0.18
2.0013 0.4276 99.31
080110 2.03110.436699.9199.80.16
2.00430.4299 99.69

注：称取对照品含量W对为0.0404g，测其吸收度A对=0.4346。

3 结论

　　
海南医学院学报 Vol.16 No.9 Sep.2010

本文采用的是薄层色谱法进行酮康唑乳膏自身对照法测定其有关物质，方法简单，可行，实验显示本色谱系统能较好的分离主成分及其分解物，及利用紫外分光光度法对酮康唑乳膏中的酮康唑进行含量测定，方法简单、重现性好。可用于考察酮康唑乳膏生产、贮藏、稳定性过程中的杂质变化情况及含量变化，可见本方法可作为酮康唑乳膏的质量标准的研究依据。

参考文献