抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子和白介素17对类风湿关节炎的诊断意义

　　　　作者：张慧 毛朝明 蒋茜 仝佳 王胜军 邵启祥 许化溪 焦志军

【摘要】 目的： 研究类风湿关节炎(rheumatoid arthritis， RA)患者血清抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide， CCP)抗体、类风湿因子(rheumatoid factor，RF)和白介素17(interleukin17，IL17)水平变化及临床应用价值。方法： 收集80例RA患者血清，以80例健康体检者血清作对照。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清抗CCP抗体，IL17含量，特种蛋白仪检测RF含量，并进行统计分析。结果： RA患者活动期上述指标的含量均显著高于稳定期和健康对照组(P&<0. 01)。RA患者组三项指标的阳性率明显高于正常对照组(P&<0. 01)。RF诊断RA的敏感性高于抗CCP抗体及IL17，而抗CCP抗体对RA的特异性显著高于RF及IL17。两两联合检测及三者联合检测敏感性较单独检测都有所减低，而特异性增高明显，三者联合检测，特异性达到100%。结论： 动态监测抗CCP抗体、RF和IL17有助于观察RA病情变化，提高RA诊断率。

【关键词】 类风湿关节炎; 抗环瓜氨酸肽抗体; 类风湿因子; 白细胞介素17

　　[Abstract] Objective: To explore the clinical significance and the clinical value of changes of serum antiCCP antibody， rheumatoid factor(RF) and IL17 levels in patients with rheumatoid arthritis(RA). Methods： Serum antiCCP antibody and IL17 was detected in 80 case of RA and 80 case of healthy physical examines by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)， Beckman automated protein analysis system was used to detect serum RF. Following， some statistical analysis for these data were done. Results： AntiCCP antibody， RF and IL17 levels in the acute phase of RA group were significantly higher than those in the stable phase of RA group and the healthy physical examines group (P&<0. 01). Three detection items positive rate were apparently higher in RA group than in the healthy physical examines group (P&<0. 01). Comparative analysis showed that RF sensitivity was higher than antiCCP antibody and IL17. But the antiCCP antibodies had higher specificity than RF and IL17. Sensitivity can be decreased when combining two or three detection items， but specificity can be event increased to 100% when combining three detection items. Conclusions： Not only monitoring the serum levels of antiCCP antibody， RF or IL17 was helpful for observation the development of rheumatoid arthritis，but also can improve diagnosis.

　　[Key words] rheumatoid arthritis; anticyclic citrullinated peptide antibody; rheumatoid factor; interleukin17 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis， RA) 是常见的以关节滑膜慢性炎症病变为主要表现的自身免疫性疾病，不可逆的骨关节破坏，造成患者运动功能的丧失和生活质量的下降[1]。早期诊断，及时、有效的治疗可控制病情发展，阻止关节破坏，提高患者的生活质量。一些实验检测指标已应用于该病的临床诊断。类风湿因子(rheumatoid factor，RF)的敏感性高于抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide，CCP)抗体，而抗CCP抗体的特异性明显高于RF，二者具有良好的互补性，联合抗CCP抗体、RF检查有助于RA早期诊断 [2-3]。 最近发现白介素17(interleukin17，IL17)作为一种前炎症细胞因子与RA的病情密切相关，检测RA患者血清中的IL17是否也有助于观察其病情变化呢?这方面还鲜见报道。本研究对此作一探讨。

　　1 对象与方法

　　1.1 对 象

　　选取2007年10到2009年12月到我院就诊的RA患者80例，均符合1987年美国风湿病协会(ARA)修订的RA分类标准。分别采集80例患者在活动期和稳定期的血清。80例正常健康体检者血清作为对照。

　　1.2 方 法

　　1.2.1 抗CCP IgG型抗体测定 采用ELISA法，将血清1∶50稀释。严格按试剂盒说明书进行操作，抗CCP抗体&>25 U/ml为阳性，&<25 U/ml为阴性。试剂由德国欧蒙公司提供。

　　1.2.2 RF定量测定 使用美国贝克曼库尔特公司Immage特种蛋白分析仪，试剂为专用试剂。RF&>20 IU/ml判为阳性， &<20 IU/ml判为阴性。

　　1.2.3 IL17细胞因子测定 采用ELISA法，严格按试剂盒说明书进行操作，试剂购于上海西唐生物科技有限公司，&>33 pg/ml判为阳性。

　　1.2.4 统计学分析 采用SPSS 10.0软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示。对各组数据先进行单因素方差分析(oneway ANOVA)，然后采用SNKq检验对三组数据进行两两比较，P&<0.01有统计学意义。率的比较采用χ2检验， 两因素之间的相关性用直线相关分析，P&<0.05 为差异有统计学意义。

　　2 结 果

　　2.1 抗CCP抗体、RF及IL17测定结果

　　RA患者活动期与稳定期比较，抗CCP抗体、RF及IL17的含量均显著增高，差异有统计学意义(P&<0.01)。RA患者活动期组与健康对照组比较，抗CCP抗体、RF及IL17的含量也均显著增高，差异有统计学意义(P&<0.01)。RA患者稳定期血清中抗CCP抗体、RF的水平稍高于健康对照组，差异有统计学意义(P&<0.01)，稳定期IL17与健康对照组比较差异无统计学意义(P&>0.05)。见表1。表1 抗CCP抗体、RF及IL17测定结果与稳定期和健康对照组比较，P&<0.01;b：与健康对照组比较，P&<0.01

　　2.2 抗CCP 抗体、RF和IL17阳性率检测结果

　　RA患者三项指标阳性率明显高于正常对照组，差异有统计学意义，P&<0. 01。见表2。表2 抗CCP 抗体、RF和IL17阳性率检测结果

　　2.3 RA患者抗CCP抗体、RF 和IL17之间的相关性

　　通过直线相关分析发现，RA患者抗CCP抗体与RF之间无相关性(r=0.163，P&>0.05 )，并且IL17与抗CCP抗体之间(r=0.187，P&>0.05)，IL17与RF(r=0.178，P&>0.05)之间亦无相关性。

　　2.4 抗CCP 抗体、RF及IL17单独或联合检测对RA诊断的灵敏度及特异性

　　由表3可见，单独检测时，敏感性依次为RF&>抗CCP&>IL17，特异性依次为抗CCP&>IL17&>RF，无论两两联合检测还是三者联合检测敏感性较单独检测都有所减低，而特异性增高明显，三者联合检测，特异性可达到100%。见表3。表3 抗CCP 抗体、RF及IL17单独或联合检测对RA诊断的灵敏度及特异性

　　3 讨 论

　　类风湿关节炎作为一种致残率较高的疾病，及时有效的治疗可控制病情发展，阻止关节破坏，所以选择有利于RA诊断并可以监测其病情变化的血清学检查显得尤为重要。 RF检测简便、快速、灵敏度高(60 % ～80 %)， 在临床上广为应用，也是最早应用于RA 临床诊断的自身抗体，但其特异度相对较低，给临床早期诊断带来一定困难[4]。近几年来发现，抗CCP抗体对RA的诊断具有较高的特异性，且与患者病情严重程度有关，是侵蚀性关节损害的一个重要标志及危险因素，在RA早期可出现阳性，诊断RA的特异性达90%以上，但敏感性较RF低[5-7]。类风湿关节炎是一种以关节组织的慢性炎症为表现的自身免疫性疾病，众多的炎性细胞因子参与该病的病理过程。近来研究发现IL17作为一种前炎症细胞因子，在类风湿关节炎发病早期即可通过上调诱导型氧化亚氮合酶(iNOS)促进关节软骨细胞释放NO，诱导基质金属蛋白酶1，3，13(MMP1，3，13)、环氧化酶2(COX2)、IL6、基质降解酶以及IL1的表达，参与骨侵蚀，促进慢性炎症的发生[8-11]。

　　我们的研究结果表明RA患者抗CCP抗体、RF、IL17阳性率明显高于正常对照组，且活动期抗CCP抗体、RF和IL17含量要高于稳定期，考虑可能是由于RA急性期抗原抗体复合物活化Th1、Th17及B细胞引起一系列免疫反应，导致抗CCP抗体、RF和IL17含量要高于稳定期，而在稳定期急性炎症得到控制，所以导致三项检测指标含量下降。在分析三者对RA诊断的特异性和敏感性中我们发现单独检测时，RF敏感性最高，抗CCP抗体特异性最高，这与国内的报道相符[3-5]。IL17的敏感性稍低于抗CCP抗体，特异性处于抗CCP抗体和RF之间，联合检测敏感性较单独检测都有所减低，而特异性增高明显，可达到100%。直线相关分析结果表明，活动期RA患者抗CCP抗体，IL17和RF三者之间无相关性，增高存在不同步性，这提示我们联合检测抗CCP抗体，IL17和RF可以减少RA的漏诊。进一步结合影像学诊断及跟踪随访，观察到在急性期IL17含量高的患者通常病情严重，骨侵蚀明显，这主要是由于IL17在T细胞驱动的炎症中可刺激不同类型细胞分泌各种细胞因子和化学因子，破坏骨修复系统而导致骨破坏、关节变形[11]。由此可见， 检测IL17不仅可以提高RA诊断，在一定程度上还可以提示RA的病情变化，有望成为评估RA病情的一项新的检测指标，当然这还需要我们收集更多的病例资料及实验研究对其进一步论证。

参考文献

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　　[3] 郭冬梅， 张红卫， 陈国强.抗环瓜氨酸肽抗体联合类风湿因子检测对类风湿性关节炎诊断的临床价值[J] .实用心脑肺血管病杂志，2009，17(12):1048-1049.

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