作者：蒋秋燕，钟璐，方刚，苏莉鸣
【摘要】 目的 观察墓头回提取液对荷U14宫颈癌小鼠血液流变学的影响。方法 将荷U14宫颈癌小鼠分为墓头回提取液高、中、低剂量组及顺铂组、模型组和空白对照组，观察各组给药后血液流变学的变化。结果 墓头回提取液高、中剂量组及顺铂组均可降低荷U14宫颈癌小鼠不同切变率下的全血粘度、血细胞比容；低剂量组全血粘度、血细胞比容均无明显变化；墓头回提取液各剂量组血浆粘度无明显变化；顺铂组可降低全血粘度、血细胞比容，而对血浆粘度无明显影响。结论 墓头回提取液可降低荷U14宫颈癌小鼠血液粘度，改善血液流变性质。
【关键词】 墓头回提取液；荷U14宫颈癌小鼠；血液流变学
Key words：Mutouhui extracts；U14 cervical cancer mouse；hemorheology
据统计，世界范围内每年约有50万的宫颈癌新发病例，占所有癌症新发病例的5%，其中80%的病例来自于发展中国家[1]， 因此，宫颈癌的防治研究显得意义重大。有研究表明，恶性肿瘤患者普遍存在着明显的血液流变学异常，而血液流变学的各项指标对疾病的发生、发展以及预后均有着重要的参考价值[2]。本实验观察了墓头回提取液对种植性U14宫颈癌小鼠血液流变学的影响，结果表明，可降低荷U14宫颈癌小鼠血液粘度，改善血液流变性质，现报道如下。
1 实验材料
1.1 动物及瘤株
SPF级雌性KM小鼠，体重(20±2)g，购于广西医科大学实验动物中心，合格证号：SCXK桂2003-0003。U14宫颈癌细胞株，购于上海药物研究所，在昆明小鼠腹腔内传代。
1.2 药物与试剂
墓头回原药材(1.0 kg)，经鉴定为异叶败酱，粉碎，然后用5 000 mL蒸馏水浸泡0.5 h，用水煎煮2次，水提取液冷却后与75%乙醇以10∶1的比例醇沉10 h，用真空过滤器过滤。合并2次滤液，水浴加热浓缩至100 mL，得到墓头回浸膏150 g，保存备用。顺铂(齐鲁制药有限公司产品，批号706031CF)，临用时以注射用水配制成所需浓度(1 mg/mL)。其他所用试剂均为分析纯。
1.3 主要仪器
LG-R-80F型血液粘度仪V2.00，北京中勤世帝科学仪器有限公司提供。
2 实验方法
2.1 分组与实体瘤模型的建立
未带瘤的KM小鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为墓头回提取液高、中、低剂量组及顺铂组、模型组、空白对照组。
在无菌条件下，取接种第7日的腹水，以无菌生理盐水按1∶3比例稀释，调整细胞数约为2.0×109个/L，除空白对照组外于每只小鼠右前肢腋下注射0.2 mL。
2.2 给药
参照预实验及活性筛选给药量。将墓头回浸膏配制为墓头回提取液高、中、低3个剂量，分别为1 500、750、375 mg/(kg·d)。从接种第2日开始，墓头回提取液组按体重0.2 mL/(10 g·d)定时分组灌胃给药；顺铂组腹腔注射顺铂注射液3 mg/(kg·d)；模型组及空白对照组每只每天予0.9%氯化钠溶液0.5 mL灌胃。以上均连续给药10 d。
2.3 指标检测
给药第10 日后，全部小鼠采用眼球取血处死(取血量在1.0～1.2 mL之间)，血样用肝素抗凝(20 IU/mL)，于4 h内检测血液流变学指标。
2.4 统计学方法
所有数据用SPSS11.0软件进行统计分析，计量资料结果以x±s表示。
3 结果
(见表1)表1 各组小鼠血液流变学指标检测结果(略)注：实验过程中死亡3只小鼠。与正常对照组比较，△△P&<0.01；与模型组比较，**P&<0.01；与低剂量组比较，#P&<0.05，##P&<0.01
4 讨论
血液粘度是血液最基本的流变特性。血液粘度与肿瘤的发生与发展密切相关，大量研究显示，肿瘤患者的血液粘度明显高于正常人，血液流变学各项指标对疾病的发生、发展及预后均有重要的参考价值[3-4]。吕氏等[5]对25例宫颈癌患者和25例正常人的血液流变学测定结果表明，全血比粘度、血浆比粘度、纤维蛋白原均升高，全血还原粘度也升高，说明宫颈癌患者的血液流动性、凝固性质、血液有形成分的粘滞性及血浆成分等方面都起了变化。因此，宫颈癌患者的血液粘度均升高，表现为高粘滞综合征，在排除心脑血管病变及外周血管病变后，血液流变学测定可作为监测宫颈癌患者存在血瘀证的内容之一。本实验检测了U14宫颈癌带瘤小鼠高切、低切下的全血粘度、血浆粘度、血细胞比容，结果显示，各接种肿瘤组以上指标均高于未接种肿瘤组(P&<0.01)，说明肿瘤的确可导致血液粘度的升高。墓头回提取液高、中剂量组全血粘度、血细胞比容均低于模型组(P&<0.01)，墓头回提取液低剂量组全血粘度、血细胞比容与模型组比较均无明显变化(P&>0.05)，说明墓头回提取液可降低全血粘度、血细胞比容，此种作用与墓头回提取液药物浓度呈量效关系。墓头回提取液与顺铂对血浆粘度无明显影响，说明两药对血液无明显稀释作用。
【参考文献
】
[1] Valdespino VM， Valdespino VE. Cervical cancer screening： State of the art[J]. Curr Opin Obstet Gynecol，2006，18(1)：35－40.
[2] Sandra C， Mendes， Catherine Robin. Mesenchymal progenitor cells localize within hematopoietic sites throughout ontogeny[J]. Development，2005，132(5)：1127－1136.
[3] 陈幸华，罗成基，郭朝华，等.放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞体外成灶能力的变化[J].第三军医大学学报，1997，19(3)：231－233.
[4] Sandra C， Mendes， Catherine Robin. Mesenchymal progenitor cells localize within hematopoietic sites throughout ontoeeny[J]. Development，2005，132(51)：1127－1136.
[5] 吕伟超，郑红枫，周冬仙.25例宫颈癌患者血液流变学观察[J].浙江中西医结合杂志，1995，2(5)：25.