关于HPLC法测定双氯芬酸钠肠溶片的含量及含量均匀度

【摘要】 目的：建立了高效液相色谱法测定双氯芬酸钠肠溶片中双氯芬酸钠的含量及含量均匀度的方法。方法:色谱柱为KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇水（75：25），用磷酸调节pH至3.50±0.05，检测波长为284nm，流速为1ml﹒min-1。该方法对双氯芬酸钠的平均回收率为99.40%，RSD为1.24%（n=5）。该法与与标准法比较，没有显著性差别。结果：方法简便，结果准确，专属性强。结论：可用于含量及含量均匀度的测定。

【关键词】 HPLC法； 双氯芬酸钠肠溶片； 双氯芬酸钠

　　 双氯芬酸钠肠溶片为解热镇痛及非甾体抗炎镇痛药，用于缓解各种关节炎的关节肿痛症状，治疗非关节性的各种软组织风湿性疼痛，急性的轻、中度疼痛，对成人和儿童的发热有解热作用。国家药品标准［1］采用对照品比较法测定含量，且现行标准对其含量均匀度没有收载。本研究采用HPLC法，对双氯芬酸钠肠溶片中双氯芬酸钠进行含量和含量均匀度的测定。实验结果表明，本法简便、快速、专属性强，可用于含量及含量均匀度的测定。

　　1 仪器与试药
　　
　　LC10ATvp型高效液相色谱仪（日本岛津），SPD10Avp型紫外检测器，N2000型色谱数据工作站，普利赛斯电子分析天平。双氯芬酸钠对照品（批号：100334200302，中国药品生物制品检定所），双氯芬酸钠肠溶片（辽源市迪康药业有限责任公司、新乡同心药业有限公司），甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件
　　
　　色谱柱：KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇水（75：25），用磷酸调节pH至3.50±0.05；检测波长：284nm；流速：1ml﹒min-1；柱温：室温。理论塔板数不低于4000，分离度大于1.5。

　　2.2 线性关系
　　
　　精密称取双氯芬酸钠对照品0.0497g，置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。精密量取储备液1.0，2.0， 3.0， 4.0， 5.0ml分别置于25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件，取20μl进样，记录色谱图，以峰面积Y对对照品进样量（μg﹒ml-1）作线性回归。结果回归方程（n=5）为：
　　
　　Y=40006X+13423　　r=0.9999
　　
　　线性范围为：19.88μg/ml～99.40μg/ml

　　2.3 重复性实验
　　
　　取同一批号样品适量（约相当于双氯芬酸钠60mg）3份，精密称定，按样品测定项下的方法，测定双氯芬酸钠肠溶片的含量，RSD为0.85%。

　　2.4 稳定性实验
　　
　　取重复性实验中的第一份溶液，室温下在0、1、2、3、4小时测定，结果表明，本品的供试品溶液在室温4小时内基本稳定，RSD=0.60%，n=5。

　　2.5 精密度试验
　　
　　取线性关系考察中双氯芬酸钠浓度为59.64μg/ml的对照品溶液，重复进样5次，结果RSD为1.26%。

　　2.6 加样回收实验
　　
　　精密称取已知含量的样品适量（约相当于双氯芬酸钠25mg）5份，分别置于50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml于25ml容量瓶中，分别精密加入双氯芬酸钠对照品储备液2.00ml，加甲醇稀释至刻度，照样品测定项下的方法测定，结果见表1。

　　2.7 样品含量的测定
　　
　　取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当双氯芬酸钠25mg），置于50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，按上述色谱条件，取20μl进样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，测得结果与国家药品标准［1］方法比较，结果见图1和表2。

　　图1（略）

　　2.8 样品含量均匀度的测定
　　
　　取本品1片，置于50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液3ml于25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，按本文色谱条件，取20μl进样测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果见表2。

　　表2 双氯芬酸钠肠溶片含量及含量均匀度测定结果（略）

　　3 讨论
　　
　　取对照品溶液在200～300nm波长范围内扫描，在284nm波长处有最大吸收，故选择284nm为检测波长。
　　
　　本法与国家药品方法相比较，两者结果无明显差别，且该方法简便、快速、专属性强，并对含量均匀度进行了测定，为药品标准的制定提供了一定的参考。

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参考文献