灯盏花素对脑缺血再灌注沙土鼠有关行为指标影响

【摘要】 目的 研究灯盏花素注射液对沙土鼠脑缺血再灌注后相关行为影响。方法 制备沙土鼠前脑缺血再灌注模型，脑缺血时间为10 min。将沙土鼠随机分为假手术组、对照组和灯盏花素组，每组8只动物，后两组再根据再灌注时间分为再灌注1、2、4、7 d等4个亚组。用开阔法观察沙土鼠脑缺血再灌注后行为学改变。实验期间始终将沙土鼠脑温控制在（37.2±0.2）℃。结果 沙土鼠脑缺血再灌注后1、2、4和7 d，对照组相关行为学指标评分明显高于假手术组，而灯盏花素组沙土鼠行为学评分尽管高于假手术组，但明显低于对照组。结论 灯盏花素可减轻脑缺血再灌注对沙土鼠相关行为学指标的影响，减轻沙土鼠脑缺血再灌注损伤。
【关键词】 灯盏花素 再灌注损伤 行为
　　［ABSTRACT］Objective To investigate the effect of breviscapine on the ethological index after cerebral ischemia/reperfusion in gerbils. Methods A cerebralischemiareperfusion model of gerbils was established， ischemia time being 10 minutes. Gerbils were randomised to shamgroup， control group and breviscapine group. They were further pided into four subgroups， eight in each group. Reperfusion was carried out in the latter two groups， which lasted for 1， 2， 4， and 7 d， respectively. The ethological index of gerbils was counted by the open field method after reperfusion. The brain temperature in all gerbils was kept at(37.2±0.2) ℃ during the experiment. Results After different time of reperfusion， the score of ethological index in control group was higher than that in shamgroup， that in breviscapine group was higher than shamgroup， but was lower than control group. Conclusion Breviscapine could reduce cerebral ischemia/reperfusion injury in gerbils by attenuating the changes of the behavioral marks.
　　［KEY WORDS］ Breriscapine; Reperfusion injury; Behavior
　　脑缺血再灌注损伤及其防治的研究一直为国内外学者所关注，至今未获得重大进展。低温具有确切的脑保护作用，但其本身存在诸如增加血黏度、干扰微循环、引起心律失常等副作用。灯盏花素注射液是一种中成药，具有蛋白激酶C（PKC）抑制作用，同时具有降低血黏度、改善微循环之功效。有研究表明，灯盏花素可减轻脑缺血再灌注损伤。本研究就灯盏花素对沙土鼠脑缺血再灌注后相关行为学指标的影响做进一步探讨。
　　1 材料与方法
　　1.1 动物模型制作
　　沙土鼠24只，体质量(50～70)g，雌雄不拘。戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔注射麻醉后，将动物俯卧于手术台上，自头顶部切开皮肤，于矢状缝外2 mm、前囟后2 mm处，用细钻钻洞（不钻透脑膜），置入自制电极，用牙托粉固定。电极接多功能脑电监护仪监测脑电图，以判断是否造成沙土鼠前脑缺血。然后将动物仰卧于实验台上，切开颈部正中皮肤，仔细分离双侧颈总动脉，用无创动脉夹阻断颈总动脉造成前脑缺血，松开动脉夹恢复脑血流即为再灌注[1，2]。脑缺血时间10 min。假手术组仅游离双侧颈总动脉但不予阻断。各组动物在脑缺血再灌注期间均将其放入恒温箱中，以使脑温控制在（37.2±0.2）℃。
　　1.2 动物分组
　　将动物随机分为假手术组、对照组和灯盏花素组，每组8只动物，后两组再根据再灌注时间分为再灌注1、2、4、7 d等4个亚组。灯盏花素组于脑缺血前30 min和再灌注后6 h时腹腔注射灯盏花素注射液90 mg/kg（云南省生物制药厂），假手术组和对照组动物在相同时间点注射等容量的生理盐水。
　　1.3 相关行为学指标检查
　　沙土鼠脑缺血再灌注后1、2、4和7 d应用开阔法观察其行为学变化，开阔法检查所用的迷宫尺寸为76 cm×72 cm×57 cm，划分为25个方格。检查时将沙土鼠放于正中格中，记数其10 min内爬过的格子数。每次检查时保持房间安静和室内灯光强度一致。

　　1.4 统计学处理
　　数据均以±s表示，组间比较采用t检验。
　　2 结 果
　　沙土鼠脑缺血再灌注后1、2、4和7 d，假手术组行为学评分为244±51，对照组行为学评分明显高于假手术组（t=5.399～11.372，P&<0.01），灯盏花素组沙土鼠行为学评分尽管高于假手术组，但明显低于对照组（t=3.103～8.518，P&<0.05）。见表1。表1 脑缺血再灌注期间沙土鼠相关行为学指标变化(略)
　　3 讨 论
　　沙土鼠因缺乏Willis动脉环，阻断双侧颈总动脉可造成前脑缺血，故被广泛应用于脑缺血的实验研究。但近来的研究发现，部分沙土鼠存在解剖学变异，阻断双侧颈总动脉不易造成前脑缺血[3]。
　　灯盏花素注射液是从云南灯盏花全草中分离所得，其主要成分是黄芩素甙。有研究表明，灯盏花素具有PKC抑制作用[3]，同时其还可降低血黏度、改善微循环。另有研究表明，灯盏花素可减小大脑中动脉阻断后皮质梗死灶的体积，减轻脑缺血再灌注损伤[4～6]。
　　开阔法是检查沙土鼠脑缺血后神经功能障碍的常用方法之一。海马在维持动物的学习、记忆和空间定位能力等方面发挥着重要作用，当海马功能受损时，表现为探索活动活跃。海马对脑缺血特别敏感，短暂的脑缺血即可造成海马神经元死亡。本实验结果显示，沙土鼠脑缺血10 min再灌注1、2、4和7 d后，对照组的行为学评分明显高于假手术组，提示脑缺血引起海马神经元功能受损，导致沙土鼠探索活动次数增加。而缺血前应用灯盏花素沙土鼠行为学评分尽管高于假手术组，但明显低于对照组，证实灯盏花素可减轻脑缺血再灌注损伤。
【

参考文献

】
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