胰腺癌患者手术前后血清VEGF与HGF水平变化及其有关性的分析

【关键词】 胰腺癌；血管内皮生长因子；肝细胞生长因子；相关性
恶性肿瘤的发生发展是多因素、多阶段的复杂过程，其中肿瘤血管生成是肿瘤生长、浸润和转移的关键因素 ［1］。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF) 是一种重要的血管生成促进因子；肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor， HGF)是一种多功能因子，能刺激多种类型细胞分化、增殖、再生、运动及形态的发生，被认为是一种强血管生成因子。研究证实，VEGF和HGF在恶性实体性肿瘤患者体液中显著增高，并与侵袭状态密切相关，可作为肿瘤预后指标之一［2］。但关于胰腺癌患者手术前后血清VEGF与HGF水平变化及其相关性的研究较少。因此，我们采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测胰腺癌患者外周血VEGF和HGF的表达水平，以进一步评价它在胰腺癌中诊断和治疗学上的价值。
　　1 资料与方法
　　1.1 研究对象 2004年5月—2008年7月，选择我院手术治疗胰腺癌患者49例，并经病理检查证实诊断。其中男31例，女18例，年龄41～75岁，平均59.1岁。淋巴结转移情况根据术前查体和术后病理证实，把患者组分为转移组19例和无转移组30例。对照组为35例非肿瘤患者，男性23例，女性12例，年龄45～68岁，平均56.5岁。
　　1.2 血清标本的收集与保存 所有胰腺癌患者分别于术晨肌注术前药物前及术后1个月(健康人群则随机清晨空腹)抽取外周静脉血4 ml，室温放置30～60 min后3 000 r/min离心10 min，分离血清，然后留取血清分别放入2 ml Eppendor管中，置－80℃低温冷冻备用。
　　1.3 方法 主要试剂及仪器 血清VEGF和HGF的检测应用ELISA法，VEGF ELISA试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司，HGF ELISA试剂盒购自武汉博士德生物公司；芬兰MultiskanMK3型全自动酶标仪。
　　1.4 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。所有数据以x±s表示，组间或组内显著性比较采用t检验或方差分析，相关关系应用Pearson相关性分析，P＜0.05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　2.1 术前胰腺癌有无转移患者血清HGF、VEGF水平变化 胰腺癌患者术前血清VEGF和HGF水平与其有无转移有关，有转移组血清VEGF和HGF水平显著高于无转移组(P＜0.01)。见表1。 表1 术前胰腺癌有无转移患者血清HGF、VEGF检测结果注：vs无转移组比较，＃P＜0.01
　　2.2 手术前后胰腺癌患者血清HGF、VEGF水平变化 见表2。表2 手术前后血清HGF及VEGF水平注：与对照组比较，＃P＜0.01；手术前后比较，＃P＜0.01
　　2.3 胰腺癌患者手术前血清VEGF与HGF的相关性分析 以HGF为自变量，相关系数r=0.7906，P＜0.01，两者呈显著正相关。
　　3 讨论
　　VEGF是目前已知的作用最强、特异性最高的血管生成调控因子，VEGF通过与内皮细胞膜上的受体结合而发挥内皮相关功能，包括调节内皮增殖、血管生成及调节血管通透性等。HGF是一种多功能细胞因子，可促使细胞运动并扩散紧密连接生长的癌细胞群，可促进细胞分裂和生长，刺激体内新血管生成，对某些恶性肿瘤的发生、浸润和转移有作用［3～5］。VEGF和HGF在新生血管生成中的作用相互促进，共同影响肿瘤新生血管的生成。49例胰腺癌患者术前血清VEGF和HGF水平显著高于正常对照组，表明胰腺癌肿瘤细胞能分泌大量VEGF和HGF，可能为肿瘤继续生长和转移提供了内在必要条件。血清VEGF和HGF水平升高反映出胰腺癌存在血管新生，是胰腺癌的伴随因素。 胰腺癌的预后是由患者年龄、性别、肿瘤生长部位、临床分期、病理分化程度、有无转移等多种因素综合决定的。本研究发现，胰腺癌患者术前血清VEGF和HGF水平与其转移有关，随着肿瘤的浸润与转移，血清VEGF和HGF水平明显升高，有转移者血清VEGF和HGF水平明显高于无转移者。我们认为，术前血清VEGF和HGF水平可反映胰腺癌肿瘤部位的血管增生程度及体内肿瘤负荷的大小，可作为评价胰腺癌癌肿瘤恶性程度及进展程度的指标，并有可能作为抗血管治疗的效应指标。
　　本研究显示，胰腺癌患者术后血清VEGF和HGF水平较术前有显著变化。49例胰腺癌患者术后1个月血清VEGF和HGF水平较术前均显著降低。提示作为有效的治疗手段，根治性手术的“去肿瘤负荷作用”解除了肿瘤对机体的浸润及血管生成的影响，使得肿瘤新生血管生成减少，在一定程度上减缓了肿瘤的进展，可作为判断手术疗效及预后的指标。
　　本研究显示，胰腺癌患者组血清VEGF和HGF表达呈高度相关性表达，可能是HGF通过上调VEGF的表达协同促进血管生成。HGF与其受体结合后促进血管内皮细胞增殖、迁移及毛细血管样小管的形成，同时还可上调VEGF mRNA的表达。用VEGF和HGF联合培养内皮细胞后发现，其毛细血管样结构的数量明显超过了单独应用VEGF时。因此推测HGF存在着直接促血管生成的作用以及通过增加VEGF产量而产生间接效应。
　　细胞因子的检测可用于肿瘤的诊断和预后评估，可有效地监测疗效和预防复发。本研究初步探讨了血清VEGF和HGF在胰腺癌患者手术前后水平变化，血清VEGF和HGF水平增高在胰腺癌中预示了一种更具有侵袭性的生物学行为。VEGF和HGF作为两种多功能生长因子，虽然已被认定它能够调节细胞生长、分化、成形、运动及促进血管生成并在脏器再生和修复中起重要作用，但迄今对其生物学特性及其作用机制的研究却不甚明了，许多研究尚有待于深入进行，特别是VEGF和HGF在胰腺癌的发生、发展及转移中的作用机制。

参考文献

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