胱抑素C和血小板活化因子在早期糖尿病肾病诊治中的应用价值

【摘要】 目的 探讨胱抑素C(Cys C)和血小板活化因子(PAF)在早期糖尿病肾病(DN)诊治中的应用价值。方法 测定30例糖尿病正常尿蛋白患者和28例糖尿病微量尿蛋白患者及15例正常对照组血清PAF及血清Cys C的水平。结果 Cys C及PAF水平：糖尿病微量尿蛋白患者组[(1.79±0.92)mg/L，(92.38±30.25)μg/L]与糖尿病正常尿蛋白患者组[(1.42±0.41)mg/L，(67.57±19.46)μg/L]均较正常对照组[(0.74±0.21)mg/L，(50.71±15.43)μg/L]明显增高，差异有统计学意义(P<0.01)，糖尿病微量尿蛋白组较糖尿病正常尿蛋白组高，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 血清Cys C和PAF在早期DN患者中显著升高，提示两者在早期DN进程中起着重要作用，其测定可能有助于糖尿病及其并发症的早期诊断和病情监测。

【关键词】 糖尿病肾病; 胱抑素C; 血小板活化因子

　　【Abstract】 Objective To study the clinical value of treating the early diabetic nephropathy(DN) with cystatin C(Cys C)and platelet activating factor (PAF).Methods The expression of Cys C and PAF were detected in 30 diabetic patients with normal albuminuria，28 diabetic patients with microalbuminuria and 15 healthy subjects.Results Cys C and PAF levels in diabetic patients with normal albuminuria[(1.42±0.41)mg/L，(67.57±19.46)μg/L] and diabetic patients with microalbuminuria[(1.79±0.92)mg/L，(92.38±30.25)μg/L]were remarkably higher than those in normal control group[(0.74±0.21)mg/L，(50.71±15.43)μg/L](P<0.01).The difference had statistical significance.Cys C and PAF levels in patients with microalbuminuria were remarkably higher than those in patients with normal albuminuria.The difference had statistical significance(P<0.01).Conclusion The remarkable increase of Cys C and PAF in patients with DN indicates that Cys C and PAF play a very important role in the early course of diabetic nephropathy.The measurement of Cys C and PAF may contribute to the early diagnosis and monitoring of diabetes and its complications.

　　【Key words】 Diabetic nephropathy;Cys C;PAF

　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)以肾小球系膜细胞增生、基底膜增厚或肾小球硬化为基本病理特征，是糖尿病的严重并发症和死亡原因。DN早期缺乏明显的临床表现，待尿常规蛋白检出异常时往往已进入晚期，失去治疗机会。因此，早期诊断对DN的预防和治疗具有重要意义[1]。笔者2006年8月～2008年12月对早期DN患者测定胱抑素C(Cys C)和血小板活化因子(PAF)，发现对其有一定的诊断价值。

　　1 资料与方法

　　1.1 对象 所有研究对象来源于医院门诊、住院患者及体检人员。按WHO 1999诊断标准，选择2型糖尿病患者58例，按24 h尿蛋白排泄率(UAER)值再分为微量尿蛋白组(连续查3次尿，其中2次UAER达30～300 mg/d)及正常尿蛋白组(UAER<30 mg/d)。微量尿蛋白组28例，男16例，女12例，年龄(52.8±3.2)岁，病史3～15年。正常尿蛋白组30例，男18例，女12例，年龄(52.4±3.4)岁，病史6月～10年。正常对照组15例为体检人员，男9例，女6例，年龄(50.7±3.3)岁。

　　1.2 观察指标及方法 抽取清晨空腹静脉血分离血清，PAF检测：

参考文献

方法[2]，抽提、纯化血清PAF，以标准PAF(Sigma公司)诱导兔血小板聚集率作标准曲线，测样本诱导兔血小板的聚集率，通过标准曲线求样本PAF值。血清Cys C浓度测定：使用罗氏P800全自动生化分析仪，采用乳胶颗粒增强免疫比浊法(PENIA)测定，试剂盒购自北京九强公司。

　　1.3 统计学方法 数据经SPSS 10.0统计软件包进行处理，计量资料用±s表示，结果比较用t检验。

　　2 结果

　　3组的检验结果，见表1。表1 3组的检验结果比较与正常对照组比较，*P<0.01，与正常尿蛋白组比较，#P<0.01

　　3 讨论

　　Cys C是一种含122个氨基酸、相对分子质量为1.33×103的蛋白质，它是半胱氨酸蛋白质超家族的成员之一，是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，也被称作半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、胱抑素C、γ2痕迹蛋白或后γ球蛋白[3]。Cys C存在于各种体液中，其中以脑脊液中含量最高，尿液中最低。它是“看家”基因在所有有核细胞上表达的产物，且产生速率恒定。由于其分子结构小且呈碱性，故血中Cys C几乎完全由肾小球滤过，但肾小管并不吸收完整的Cys C分子。肾小球滤过率(GFR)是衡量肾小球功能最重要的参数，是反映肾脏疾病患者肾脏功能的指标。但目前在技术上还无法在活体内直接测定GFR，因此，在临床实践和研究中只能根据肾脏对某一物质的清除率间接测定GFR。多年来，内生肌酐清除率被临床广泛应用于分析GFR，但不同程度地受到一些肾内和肾外因素的干扰。而血浆或血清中的Cys C就完全取决于肾小球的滤过率，即Cys C清除率与尿Cys C浓度无关，所以它已接近于“理想的”内源性标志物。在肾脏疾病的诊断治疗中需要一种快速简单且能准确反映GFR变化的指标，由于Cys C特定的生物学特性，目前已成为公认的较好的反映肾小球滤过率变化的指标，本文的结果也充分证实了这一点。黄群等[4]对102例2型糖尿病患者的Cys C水平研究，提示其2型糖尿病正常尿蛋白组、微量蛋白组和大量蛋白组的Cys C水平组间比较均有显著性差异。因此Cys C有可能成为反映糖尿病早期肾损害的敏感而可靠指标。

　　糖尿病患者由于长期高血糖，使非酶糖酰化速率增加，导致组织缺氧，血液粘滞度增高;同时内皮细胞释放内皮素和一氧化氮等血管活性物质，使肾小球毛细血管张力变化，引起肾血流动力学改变。使肾小球处于高滤过状态，造成微量白蛋白从尿中漏出增多，但对血清Cys C这种小分子碱性物质的滤过并不增加，反而由于各种炎症、代谢异常和免疫损伤致基底膜增生，造成滤过面积减少，导致肾小球滤过率下降，使血清Cys C升高。因此，血清Cys C与尿微量蛋白测定对糖尿病早期肾损伤具有重要的临床意义。

　　Cys C检测方法经历了几十年的不断探索，1997年报道了颗粒增强散射免疫比浊法(PENIA)，使血清Cys C测定的时间缩短至5 min左右，且可在自动生化仪上进行。

　　PAF主要由血小板、内皮细胞、中性粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞产生，是一种具有多种生物学作用的脂类化合物。具有强烈的促血小板聚集和释放作用，能刺激内皮细胞和平滑肌细胞，增加血管壁的通透性。内皮细胞表达PAF受体，PAF可以损伤内皮细胞的屏障作用，导致内皮细胞功能紊乱。在实验动物，PAF诱导的肾小球通透性的增加导致了显著蛋白尿的形成，而PAF受体拮抗剂可以逆转或防止血浆蛋白的外渗。

　　CavaloPerin等[5]研究证实，体内PAF的升高，可以通过内皮细胞、白细胞和血小板的作用，能够增加血管和肾小球的通透性。其作用机制一方面是PAF的增加，诱发肾小管内皮细胞的细胞骨架改变，从而导致细胞内裂隙的形成，改变了肾小球滤过膜的分子大小依赖的通透性，导致微血管的病变[6];另一方面，由于PAF诱导血小板释放阳离子，进而改变了肾小球滤过膜的电荷依赖的通透性。因此，糖尿病患者血浆PAF增高，是其出现微量蛋白尿的重要原因之一，加速DN的发生和发展。

　　DN是糖尿病常见而严重的并发症，其早期诊断和治疗极为重要，患者尿出现微量白蛋白期是干预治疗的关键期。本资料表明，糖尿病Cys C、PAF与尿UAER的测定值与健康对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)，提示如患者已发现患有糖尿病，就应及时定期检查血Cys C、PAF与尿UAER，有条件应联合检测，以提高糖尿病早期肾损伤诊断的可靠性与准确性。

参考文献

　　1 Russell TA.Diabetic nephropathy in patients with type 1 diabetes mellitus.Nephrol Nuns J，2006，33(1)：1528.

　　2 许文荣，顾可梁，曹红翠，等.血浆溶血血小板活化因子测定及在儿童哮喘中的应用.临床检验杂志，1997，15(5)：265267.

　　3 俸家富，罗军，李少林.胱抑素C肾小球滤过率肌酐替代标记物.国外医学临床生物化学与检验学分册，2005，26(3)：168172.

　　4 黄群，杨香玖，姚弘，等.血清胱抑素C在2型糖尿病不同肾损害期的变化及其临床意义.临床内科学杂志，2006，23(7)：467477.

　　5 CavalloPerin P，Lupia E，Gruden G，et al.Increased blood levels of plateletactivating factor in insulindependent diabetic patients with microalbuminuria.Nephrol Dial Transplant，2000，15(7):994999.

　　6 方咏红，张继平，周少雄，等.2型糖尿病患者血清血管性血友病因子、血小板活化因子水平与糖尿病肾病的关系.第一军医大学学报，2005，25(6)：729731.