【关键词】 RC-160
关键词:RC-160;NCI-H446
0 引言
RC-160是一种新兴的生长抑素的类似物，近年来由于它在抑制肿瘤细胞增殖及异常分泌等方面的作用而受到关注.研究表明，人类小细胞肺癌（SCLC）细胞株NCI-H446表面富含生长抑素受体，通过该受体可介导RC-160对NCI-H446的抑制作用.国内尚未见到有关报道.我们应用细胞生物学方法评价RC-160对人SCLC.细胞株NCI-H446的作用及其作用特点，旨在为SCLC的临床治疗提供新的思路.
1 材料和方法
1.1 材料 ①细胞:NCI-H446细胞株引自中国科学院上海细胞生物研究所的细胞库.细胞按常规培养;②试剂:RC-160由美联（西安）生物科技有限公司合成，MTT试剂为Sig-ma公司产品.
1.2 方法 ①细胞生长曲线:采用细胞计数法进行并计算对数生长期的细胞倍增时间;②MTT法测定RC-160作用的量效及时效关系:取对数生长期细胞，常规消化，接种于96孔培养板，每孔1000个细胞，24h后，细胞贴壁，加入6个不同浓度梯度的RC-160，RC-160剂量范围为320～100000mg・L-1 ，对照孔不加药.常规培养，分别于药物作用后4，24，72及120h行MTT测定;③RC-160对细胞周期的影响:将NCI-H446分别加入10mL培养瓶中，同时加入IC30 值及IC50 值的RC-160，并设置一不加药的对照瓶，按常规方法对细胞进行DNA染色，流式细胞仪（FASS，Profile II型）测定不同的DNA含量，使用Cell FIT软件分析细胞周期.
2 结果
细胞生长倍增时间为29.4h.RC-160对NCI-H446作用的剂量-效应，结果随着药物浓度的增加，细胞生长明显被抑制，其作用特点表现为明显的浓度依赖性.RC-160对NCI-H446细胞作用的IC30 值为133mg・L-1 ，IC50 值为251mg・L-1 .RC-160对NCI-H446作用的时间-效应为随着时间的延长，细胞生长被明显抑制，其作用特点表现为明显的时间效应性.用RC-160对NCI-H446细胞作用的IC30 值及IC50 值进行各时间点试验，得到两种药物浓度下时间-效应曲线.经RC-160处理的细胞，其G1/G0期、S期细胞比率明显降低（0.01 3 讨论
小细胞肺癌（SCLC）是常见的呼吸道恶性肿瘤，由于SCLC的癌细胞质内存在着Kulchitsky颗粒，而这些颗粒可以分泌一些具有内分泌调节作用的物质，所以，SCLC常伴有异常内分泌综合征［1］ .因此，除了APUD瘤系统的肿瘤细胞表面高度表达生长抑素受体（SSTR）外，近年来业以证明，SCLC的细胞表面也有丰富的SSTR［2］ .
RC-160是一种具有生物活性的生长抑素类似物，它具有与SSTR结合的高亲和性，它可以通过SSTR的介导而主要发挥二方面的作用:其一是生长抑素样的作用，即抑制神经/内分泌细胞的异常分泌;其二是拮抗肿瘤细胞的恶性增殖［3］ .我们研究了非标记的RC-160对SCLC细胞株NCI-H446的抑制作用，结果表明其作用具有明显的浓度及时间依赖性，RC-160的作用可以使细胞周期阻滞于晚S期或早G2+M期，在小分子水平上阻断DNA的合成，因而进一步影响其RNA转录与蛋白质的合成.
参考文献
［1］Adi FG，Desmond NC，Marion MN，John DM.Characterization of variant subclasses of cell lines derived from small cell lung cancer having distinctive biochemical，morphological，and growth properties ［J］.Cancer Res，1985;45（6）:2924-2930.
［2］汪 静，邓敬兰，武胜昔，乔宏庆.SSTR1～5在肺癌组织中的表达与分布［J］.中华核医学杂志，2000;20（1）:1-4.
［3］Buscail L，Delsque N，Esteve JP，Saint LN，Prats H，Clerc P.Stimulation of tyrosine phosphates and inhibition of cell prolifer-ation by SSA:Mediation by human SSTR subtypes SSTR1and SSTR2［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1994;91（3）:2315-2319.