关于脐血IgG、IgA、IgM、C3、C4水平及其临床意义

　　　　　　 作者：王军 张绍美 何艳芳 张文辉 沈栋林 戴园园

【摘要】 目的 检测新生儿脐血血清IgG、IgA、IgM、C3、C4的变化，探讨新生儿脐血的免疫功能。方法 24例正常足月自然分娩新生儿脐血作为研究对象，26例健康成人献血员（男女不分）的血清作为对照。采用散射比浊法检测血清中IgG、IgA、IgM、C3、C4的水平，对结果进行统计学分析。结果 脐血清中IgG、IgA的量与成人血清相比无显著性差异（P&>0.05）；IgM、C3、C4的量显著低于成人血清（P＜0.01）。结论 脐血清中IgM、C3、C4的水平低于正常成人水平，IgG、IgA的水平与正常成人无显著差别。
【关键词】 脐血 免疫球蛋白 补体 散射比浊法
　　Abstract： Objective To study the levels of IgG， IgA， IgM， C3 and C4 in cord serum to learn the immune function of cord blood. Methods Radical immunodiffusion (RI) was used to determine the levels of IgG， IgA， IgM， C3 and C4 in cord serum from normal full-term neonates and in control serum from adult blood donors. The results were analyzed statistically. Results The levels of IgG and IgA in cord serum were not significantly different from that in the control （P&>0.05）， but the levels of IgM， C3 and C4 were significantly lower than those in the control group (P＜0.01). Conclusion The levels of IgM， C3 and C4 in cord serum are under those in the control group， but the levels of IgG and IgA in cord serum do not differ from the adult normal.
　　Key words: cord blood; immunoglobulins; complement; radical immunodiffusion
　　脐血中含有丰富的造血干/祖细胞，是造血重建所需的良好种子细胞；脐血还具有采集方便和移植后移植物抗宿主病（graft versus host disease， GVHD）发生率低的特点［1］。自1988年第1例脐血移植治疗范可尼贫血成功以来，脐血移植广泛应用于白血病、再生障碍性贫血、遗传性疾病和肿瘤等多种疾病的治疗，取得了理想效果并显示出良好前景。脐血干细胞移植成功的关键除了人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA)配型相合外，与脐血中含有丰富的活性物质和功能不成熟的免疫细胞有关，这些活性物质和免疫细胞在脐血造血干/祖细胞的成功移植及肿瘤免疫中发挥重要作用。本实验利用散射比浊法（RI法）测量脐血清中IgG、IgM、IgA、C3、C4的水平，探讨脐血免疫功能特点，为脐血在临床上的应用提供实验依据。
　　1 对象和方法
　　1.1 研究对象 24例脐血是我院2004年9月—2006年4月采集的，均为足月自然分娩健康新生儿脐血，胎龄37～42周，平均（38.4±2.2）周，出生体重为2500～4000 g，平均（3293±386）g，Apgar评分均为8～10分。26例健康成人血清来自社会正常成人献血员，无男女区分，年龄18～45岁，平均（38.0±7.8）岁。
　　1.2 试剂 抗人IgG、IgA、IgM、C3、C4血清，样本稀释液，IgG、IgA、IgM、C3、C4标准血清，Behring Nepherlometer 100 Analyzer均由美国DADE-BEHERING配套提供。自配磷酸缓冲液（pH为7.2～7.4）。
　　1.3 方法 采脐血或成人外周血4 ml，当日测定。采用RI法测定血清IgG、IgA、IgM、C3、C4。
　　1.4 统计学处理 实验数据以x±s表示，采用PEMS-2.00软件包处理结果。所有数据进行方差齐性检验后，组间比较采用t检验。检验水准：α=0.05。
　　2 结 果
　　脐血清IgG、IgA 2组间比较无显著性差异（P&>0.05）；脐血清IgM、C3、C4水平显著低于对照组（P＜0.01）。见表1。表1 脐血清和成人血清IgG、IgA、IgM、C3、C4测定结果比较
　　3 讨 论
　　王红伟等［2］认为，脐血免疫功能不成熟是新生儿免疫功能低下的重要原因，与骨髓和外周血相比，脐血中的免疫细胞发育不成熟，抗原表达和功能活性低下，是移植后GVHD发生率低的主要原因。贾廷珍等［3］脐血免疫学特点的系列研究显示，新生儿脐血T 淋巴细胞发育不成熟， 多为幼稚细胞或处于抑制状态。国内外多有研究认为［4］，脐血T淋巴细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）、B细胞发育不成熟，多为幼稚细胞或处于抑制状态，成熟的免疫细胞不多，抗体含量不足与未受非己抗原刺激有关。Ettinger等［5］研究分析认为，IL-4 是重要的Ⅱ型细胞因子，可促进B 细胞生长和分化，使B 细胞从G0 期进入G1 期，并促进B 细胞表达MHCⅡ类抗原，增强B细胞的抗原提呈作用，同时还能作为第二信号刺激B细胞活化，对B细胞抗体的生成和类别转换有重要作用。IL-6 主要由单核巨噬细胞、B细胞、Th3 等多种细胞分泌，对B细胞的抗体生成具有调节作用，主要作用于活化B细胞的终末分化阶段，促使B细胞最后分化为免疫球蛋白分泌细胞。因此，这2种细胞因子对B细胞抗体的生成均有促进作用。提示B细胞的不成熟可能是缺少细胞因子的有效刺激。脐血淋巴细胞自发合成DNA 的能力是成人的6～10 倍， 说明脐血淋巴细胞发育不成熟， 处于生理性增殖状态。此外， 脐血淋巴细胞合成分泌细胞因子的能力亦显著低下。

　　我们的研究结果显示，脐血清中IgG、IgA 的水平与正常成人血清相比无显著性差异（P＞0.05），IgM、 C3、 C4的水平显著低于正常成人血清（P＜0.01）。抗体是成熟B细胞分化为浆细胞后，由浆细胞分泌的；补体主要在肝脏中合成，补体系统在正常脐血中的含量较低［6］，本实验结果与此相符合。IgG是存在于血液、淋巴、腹腔液及脑脊液中的主要免疫球蛋白，占血清免疫球蛋白的75%以上。IgG最主要的特点可能是其具有激活补体经典途径的能力。IgG是血液中最稳定的Ig分子（半衰期超过3周），这使它的作用更显重要。IgG是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白，脐血中IgG的含量受母体IgG水平的影响较大。有研究认为，早产儿脐血中的IgG水平较足月儿低;因此，我们认为脐血中IgG的水平与成人无显著性差异，主要受母体IgG水平的影响。IgA分子量较大，分为血清型IgA与分泌型IgA（sIgA）2种，不能通过胎盘，前者占血清总Ig的10%～15%，后者在外分泌系统中有更重要的免疫功能。呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴样组织合成大量的sIgA，sIgA与这些部位的局部感染、炎症或肿瘤等病变密切相关。血清型IgA由骨髓、淋巴结、脾内浆细胞合成入血，IgA不引发明显的炎症反应，一般认为主要通过隔离、结合以及交联病原体从而组织病原体穿过上皮并促进黏膜对病原体的清除。IgA不能通过胎盘，所以从理论上讲脐血IgA水平与成人相比应该有差异，但本文研究结果与此不同， 这可能与我们选择的研究对象有关。影响脐血IgA水平的主要因素为宫内感染，我们选择的是正常足月自然分娩的新生儿作为研究对象，可能某些新生儿合并不同程度的宫内感染，但在出生时无明显表现，临床仍然表现为正常足月自然分娩，其原因值得进一步研究。IgM是在生物进化过程中出现最早的免疫球蛋白，也是免疫球蛋白中最具有多样性的一种。IgM占血清免疫球蛋白含量的5%～10%。由于记忆B细胞并不大量分泌IgM，所以IgM的升高表示近期有抗原出现［6］。IgM不能通过胎盘，脐血中IgM的含量不会受到母体血清中IgM的影响。我们的研究结果显示脐血中IgM的含量明显低于正常成人（P＜0.01）。
　　综上所述，结合本实验结果，我们推测，脐血免疫功能较正常成人血清免疫功能低。

参考文献

［1］ 江淑芳，史春梦.脐带血免疫学特性的研究进展［J］.免疫学杂志，2002，18（3）：149-152.

［2］ 王红伟，牛德亮，常彩红.早产儿脐血体液免疫指标检测的意义［J］.山东医药，2005，45（32）：46-47.

［3］ 贾廷珍，刘长安，杨 光.脐血基础与临床研究［J］.中华放射医学与防护杂志，2006，26（1）：10-14.

［4］ Imbert AM， Belaaloui G， Bardin F， et al. CD99 expressed on human mobilized peripheral blood CD34+ cells is involved in transendothelial migration ［J］. Blood， 2006， 108(8): 2578-2586.

［5］ Ettinger R， Sims GP， Fairhurst AM， et al. IL-21 induces differentiation of human naive and memory B cells into antibody-secreting plasma cells［J］. J Immunol， 2005，175(12):7867-7879.

［6］ Rodriguez P， Truyens C， Alonso-Vega C， et al. Serum levels for IgM and IgA antibodies to anti-trypanosoma cruzi in samples of blood from newborns from mothers with positive serology for Chagas disease ［J］. Rev Soc Bras Med Trop， 2005， 38(Suppl 2):62-64.

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