电针百会穴对慢性应激抑郁模型大鼠HPA轴的影响

【摘要】 [目的]揭示针灸治疗抑郁症的作用机理。[方法]SD雄性大鼠32只，随机分为正常对照组、模型组、百会穴电针组、百会穴埋线组，每组8只。采用慢性轻度不可预见性应激刺激结合孤养的方法造模，大鼠共接受21天各种不同的刺激。造模同时电针组、百会穴埋线组分别给予电针、埋线等不同疗法干预。造模结束后通过观察下丘脑垂体肾上腺皮质轴的变化，判断针刺对其的干预作用。[结果]经过治疗，电针组与模型组相比，血清CRH、CORT和ACTH含量显著降低(P<0.01);而埋线组与模型组相比，血清CRH和ACTH也明显降低(P<0.01)，但是CORT含量无显著性差异。[结论]百会穴电针疗法及埋线疗法均可拮抗HPA轴功能的亢进，并且电针疗效优于埋线疗效。

【关键词】 抑郁症;下丘脑垂体肾上腺;大鼠;针刺治疗

　　Abstract: [Objective] This article explores the electroacupuncture therapeutically mechanism in depression. [Methods]32 male SD rats were pided into four groups: control group， model group， electroacupuncture group， and catgut embedding group， 8 rats in each group. The combination of both chronic mild unexpected stimulation and solitary feeding were adopted. The rats accepted 21 days of various stimulation， at the same time， electroacupuncture group and catgut embedding group were given electroacupuncture and catgut embedding therapy on Baihui (GV 20).[Results] After the experiment， compared with the model group， the level of CRH， ACTH and CORT was obviously lower in electroacupuncture group(P<0.01)， and in catgut embedding group， CRH， CORT and ACTH level was obviously lower too(P<0.01). But the level of CORT had no significant difference. [Conclusion] Both groups of electroacupuncture and catgut embedding therapy on Baihui acupoint can antagonize hyperfunction of HPA axis， and the former is better than the latter.

　　Key words: depression; hypothalamicpituitaryadrenal axis; rats; acupuncture

　抑郁症已经成为当代社会危害人类健康的常见病。研究结果表明，抑郁症患者HPA轴功能亢进，抗抑郁剂治疗后HPA轴功能趋于正常[1]。本实验通过观察电针百会穴对慢性应激抑郁模型大鼠HPA轴相关激素的影响，探讨针刺的抗抑郁作用及相关机理。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物 SD大鼠32只，雄性，清洁级，体重160～180g， 由中科院上海实验动物中心提供，饲养于浙江中医药大学动物中心。

　　1.2 主要试剂 促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)放射免疫分析药盒、皮质醇(CORT)放射免疫分析药盒和促肾上腺皮质激素(ACTH)放免试剂盒，均购自北京华英生物技术研究所。

　　1.3 模型制备 按照文献方法[2]进行抑郁症模型大鼠的复制。正常组、模型组、针刺组和埋线组每笼饲养1只。除正常组之外其余各组接受21天各种不同的应激刺激，包括冰水游泳(4℃，5min)、热应激(45℃，5min)、禁水24h、夹尾1min、电击足底(电压5mv，每隔1min刺激1次，每次持续10s，共30次)、摇晃(1次/s，15min)、禁食48h和昼夜颠倒等刺激，每天随机安排1种，平均每种刺激各进行2～3次，使动物不能预料刺激的发生。

　　1.4 动物分组及处理方法 SD大鼠共32只，随机分为4组，正常对照组、模型对照组、百会穴电针组和百会穴埋线组，每组8只大鼠。各组处理方法如下：百会穴电针治疗组：每次应激前1h，进行电针治疗，频率15Hz，连续波，电流强度以大鼠安静耐受为度(约1mA)，每次20min，每天1次，共电针21天。百会穴埋线治疗组：在造模第1天，第8天和第15天，每次应激前1h给予埋线治疗，共3次。模型对照组：造模后，不做其他处理，固定方法同电针组。正常对照组：不做任何造模及治疗处理，固定方法同电针组。

　　1.5 血清CORT及CRH、ACTH的侧定 各组动物于第21天末次治疗的24h后，采用腹腔静脉取血，血液在冰浴试管中静置0.5h，4℃，3000转/min离心10min，分离血清，保存在-70℃的冰箱中待测。用放射免疫分析法测定，按试剂盒说明书进行操作。

　　1.6 统计学处理 全部数据用SPSS16.0软件统计包处理，以平均值加减标准差(x±s)表示，组间差异采用单因素方差分析(ANOVA)，以P<0.05为显著性差异的标准。

　　2 结果

　　表1 各组大鼠血清CRH、ACTH和CROT含量的比较与正常组比较，**P<0.01 与模型组比较，#P<0.01;与埋线组比较，ΔP<0.05

　　实验后，与模型组相比，电针组大鼠的血清CRH、ACTH和CORT含量显著降低(P<0.01);埋线组大鼠与模型组相比，血清CRH和ACTH含量也有显著降低(P<0.01)，但CORT含量无显著性差异。电针组与埋线组大鼠组间比较，各项指标有显著性差异。见表1。

　　3 讨论

　　本实验采用的是孤养与CUMS相结合的抑郁模型，从发病学、临床表现和治疗学效应以及抑郁症的现代认识等方面均基本符合中医理论的慢性应激肝郁证[3]。该模型通过在造模的21天里随机选取多种不同的应激因子长期刺激动物，以模拟人类慢性、低水平的应激源所致抑郁来研究抑郁症，是目前国内外学者所广泛采用的方法。

　　下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴主要是由下丘脑、垂体和肾上腺组成，这三者之间相互协调，构成一定级别上的反馈调节系统。HPA轴作为神经内分泌免疫网络的枢纽，主要作用是维持人体内环境的稳定，对外界环境的刺激做出必要的生理与心理反应以适应环境的刺激[34]。但若机体长期处在一种应激状态下，HPA轴持续亢进，超过了其自身调节的范围，糖皮质类固醇激素(GC)始终处于一种高水平状态，则会引起机体内分泌、免疫等多个系统功能的紊乱。据观察统计，许多患者抑郁症状的严重程度与HPA轴功能持续亢进、血中GC水平升高呈密切相关性[5]。

　　下丘脑的CRH是一个41肽，以高亲活力作用于促肾上腺皮质激素细胞的膜受体，经过细胞CAMP/PKB和DG/PKC途径调节ACTH的释放和生物合成。当机体遇到应激刺激，如低血糖、失血、剧痛以及精神紧张时，刺激作用于神经系统各个部位，最后将信息汇聚于下丘脑CRH神经元，引起HPA轴的兴奋性提高，然后通过CRH引起垂体一肾上腺皮质系统反应。

　　在HPA轴中，ACTH的测量被证明在判定情感障碍性疾病中十分有用。肾上腺皮质醇的分泌节律在HPA轴的活动中是脉冲式的，呈现多次少量爆发、低水平持续渐进增长和静止的交叉过程。许多研究者都证实，有HPA轴活动亢进的患者中，这种脉冲式的皮质醇分泌节律更频繁，也更持久，因此推测这种分泌方式可能参与了抑郁症的发病。

　　从本实验放射免疫结果看:造模后，与正常对照组相比，抑郁大鼠血清CRH、CORT和ACTH含量均明显升高，表明大鼠处于HPA轴亢进的抑郁状态;经过治疗，电针组与模型组相比，血清CRH、CORT和ACTH含量显著降低，说明电针可以使抑郁大鼠体内CRH、ACTH及CORT浓度降低直至趋于正常。而埋线组与模型组相比，血清CRH和ACTH明显降低，但是CORT无明显差异，提示埋线疗法对改善HPA轴功能有一定作用，但不及电针疗法。电针疗法很可能是通过拮抗HPA轴功能亢进，从而改善抑郁症状，发挥出一定的抗抑郁作用。

参考文献

　[1] 张均田.新药发现的药理学基础[M].北京:化学工业出版社，2002:3540.

　　[2] 金光亮，南睿，郭珍霞.慢性应激肝郁证大鼠模型的建立[J].北京中医药大学学报，2003，26(2):1821.

　　[3] 汪进良.开心散对强迫游泳小鼠中枢神经递质及血浆皮质醇的影响[J].北京中医药大学学报，2005，28(2):36.

　　[4] Atkinson H C，Wood S A，Kershaw Y M，et al. Diurnal variation in the responsiveness of the hypothalamic pituitaryadrenal axis of the male rat to noise stress[J].JNeuroendocrinol， 2006， 18(7): 526533.

　　[5] ChenY， HanT， RuiY， et al. Effects of total triterpenes of Centella asiatica on the corticosterone levels in serum and contents of monoamine in depression ratbrain[J]. ZhongYaoCai，2005，28 (6):4926