蒙药阿嘎如·朱吉克提取物的抗氧化活性

　　　　　　 作者：敖恩宝力格 包秋华 邰丽华

【摘要】 目的 研究蒙药阿嘎如·朱吉克的抗氧化作用。方法 采用80%乙醇和蒸馏水分别对蒙药阿嘎如·朱吉克进行超声波提取，检测提取物对于二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基的清除作用，以及对β胡萝卜素亚油酸氧化体系的抑制作用。结果 阿嘎如·朱吉克乙醇提物和水提取物对DPPH自由基有较好的清除作用，其达到50%清除率所需浓度IC50值分别为0.7和1.2 g/L。并且对β胡萝卜素亚油酸氧化体系有明显的抑制作用，其IC50值分别为1.2和4.8 g/L。结论 阿嘎如·朱吉克的乙醇提取物及水提取物具有抗氧化活性，水提取物的抗氧化作用明显高于乙醇提取物。

【关键词】 抗氧化性;蒙药;阿嘎如·朱吉克

　 自由基的大量堆积，可促进衰老、心脑血管疾病、肿瘤、辐射损伤等病理过程〔1，2〕。随着分子生物学、医学的深入发展以及检测技术的提高，人们对自由基的危害有了越来越多的认识。研究发现一些具有抗衰老、抗癌和防治心脑血管疾病的抗氧化剂〔3，4〕。但多为人工合成抗氧化剂，其安全性令人质疑，因此，找到安全可靠的天然抗氧化剂是当前研究所关注的焦点〔5，6〕。蒙药是我国传统医药的重要组成部分，纯属天然药物。这些药物多数化学成分不明、药理作用不详，仅凭药典、经验使用。要想发展蒙医药学，必须利用现代的科学技术手段，对蒙药进行成分分析，揭示它的生物效应，对其药理及毒理进行研究，找到蒙药独特疗效的科学依据。蒙药阿嘎如·朱吉克是由沉香、豆蔻、广枣等11味蒙药材组成。“蒙药正典”中有记载其具有祛风、清热、除湿等功能。临床上常用来治疗心烦失眠、神气不宁、心脏损伤、心区疼痛等病症〔7〕。但迄今未见对其药理学方面的研究报道。本文旨在通过测定蒙药阿嘎如·朱吉克抗氧化活性，为合理地开发利用这一宝贵的民族药物提供参考，并为开发天然抗衰老剂提供新的实验依据。

　　1 材料与方法

　　1.1 材料与仪器 蒙药阿嘎如·朱吉克由内蒙古中蒙医院提供。二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基、β胡萝卜素、亚油酸由美国Sigma公司提供。2，6 二叔丁基对甲酚(BHT)和抗坏血酸，无水乙醇，吐温40，氯仿等均为国产分析纯试剂。实验用水为二次石英亚沸蒸馏水。主要仪器有721型分光光度计、KQ3200 V型超声波清洗器、FA2104 N电子天平等。

　　1.2 提取方法 准确称取样品1.00 g于100 ml锥形瓶中，加入80%浓度的乙醇(或蒸馏水)15 ml，浸泡6 h，超声辅助提取(12 kHz，10 min)，过滤，滤液用冷冻干燥仪干燥，称重，然后用浓度为10%的二甲基亚砜(DMSO)溶液使其溶解并用蒸馏水稀释至一定体积。

　　1.3 DPPH自由基清除活性的测定 DPPH自由基在有机溶剂中是一种稳定的自由基〔8，9〕，呈紫色，在517 nm处有强吸收。当有抗氧化剂存在时，DPPH的单电子被配对而使颜色变浅，变浅的程度与配对电子数成化学计量关系，因此，我们可以通过吸光度的测定来检测自由基的清除情况，从而评价试验样品的抗氧化能力。本试验的具体操作如下：取0.2 mmol/L的DPPH 2 ml加入到2 ml一定浓度的提取液中，充分混匀。30 min后在517 nm(最大吸收波长处)测定其吸光度A值。以抗坏血酸为对照。样品清除自由基的能力由下面的公式得出：抗氧化率(%)=〔(Ac-As)/Ac〕×100%。式中Ac及As为60 min后空白及待测样的吸光值。

　　1.4 β胡萝卜素亚油酸氧化体系的抑制测定 将0.15 mg β胡萝卜素溶解于15 ml氯仿，加入30 mg亚油酸和200 mg吐温40，然后于50℃旋转真空干燥。加入75 ml无氧蒸馏水，于超声波中形成乳化液。取0.1 ml样品乙醇液与5 ml乳化液于试管中混合，以不加提取物样品的等量乙醇代替与乳化液混合作为空白样。在45 ℃保温，于波长为460 nm处测定吸光度。同时采用BHT进行对照实验。抗氧化率用下式进行计算：抗氧化率(%) = 100(△C△S)/△C 。式中，△C =〔ln(Ac0/Ac60)/60〕;△S =〔ln(As0/As60)/60〕;△C为对照吸光值的降低率，△S为样品吸光值的降低率;Ac0与As0分别为t=0 min时对照与样品的吸光度;Ac60与As60分别为t= 60 min时对照与样品的吸光度。

　　2 结 果

　　2.1 DPPH自由基清除活性分析 本研究以抗坏血酸为参照，对比了两种提取物的DPPH自由基清除效果。阿嘎如o朱吉克提取物对DPPH自由基的清除作用以抗氧化率(清除率)来表示，清除率越高说明提取物的抗氧化作用越强。在0.2 mmol/L DPPH自由基的反应液中阿嘎如·朱吉克提取物对DPPH自由基30 min时的清除能力如图1所示，可见，抗坏血酸及阿嘎如·朱吉克80%乙醇提取物和水提取物的DPPH自由基清除能力随其浓度升高而显著增强，且水提取物的抗氧化作用明显强于80%乙醇提取物。在本试验条件下，抗坏血酸的半数抑制浓度(IC50)约为0.25 g/L，阿嘎如·朱吉克水提取物的IC50约为0.7 g/L，而80%乙醇提取物的IC50约为1.2 g/L，可见阿嘎如·朱吉克的乙醇及水提取物具有较好抗氧化作用。

　　2.2 β 胡萝卜素亚油酸氧化体系的抑制作用分析 β胡萝卜素亚油酸氧化体系试验法主要评价的是抗氧化物质在乳化脂质体系中的抗氧化能力。图2为采用β 胡萝卜素亚油酸氧化体系抑制试验测定的阿嘎如·朱吉克80%乙醇及水提取物与抗氧化剂BHT抗氧化效果的对比。在脂质体系中醇溶性的BHT是公认的强抗氧化剂，在本试验条件下，BHT也呈现出极强的抗氧化性，其IC50约为0.6 g/L。而阿嘎如·朱吉克提取物同样表现出优良的抗氧化活性，其中80%乙醇提取物的IC50约为4.8 g/L，而水提取物的IC50约为1.2 g/L。

　　图1 两种提取物与抗坏血酸的DPPH自由基清除活性图2 两种提取物与BHT的β胡萝卜素氧化抑制活性

　　3 讨 论

　　本研究首次对阿嘎如·朱吉克进行抗氧化作用检测，结果表明阿嘎如·朱吉克80%乙醇提取物及水提取物对DPPH自由基有很好的清除作用，而对β胡萝卜素亚油酸氧化体系也有较好的抑制作用，且这两种作用与提取物的浓度呈正比，其中尤以阿嘎如·朱吉克水提取物的抗氧化活性强，接近于抗坏血酸与BHT的抗氧化活性，表明阿嘎如·朱吉克中抗氧化活性成分在水中的溶解性较好。以上结果提示了阿嘎如·朱吉克提取物可能在抗衰老、抗高血脂、抗凝、抗肿瘤等方面有一定作用，但确切的药理作用及作用机制需要进一步的实验研究。

参考文献

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