【摘要】 目的:探讨抗凝剂的使用对肝功能测定结果的影响。方法:分别用草酸钠和肝素钠两种抗凝剂抗凝的血浆测定谷丙转氨酶和总胆红素,并与不使用抗凝剂的血清进行比较。结果:草酸钠抗凝剂组谷丙转氨酶活力显著低于非抗凝剂组,肝素钠抗凝剂组总胆红素含量明显高于非抗凝剂组。结论:在进行肝功能测定时应注意抗凝剂的选择,以免测定结果出现假阴性和假阳性而造成误诊误治。
【关键词】 草酸钠;肝素钠;谷丙转氨酶;总胆红素
临床实验室中使用的抗凝剂种类很多,如凝血酶、草酸盐、肝素钠、EDTA、柠檬酸盐等,这些抗凝剂对保证血浆和细胞的分离、缩短病人等候时间具有重要意义,但抗凝剂的选择不当会造成检测结果不准确,造成误诊误治。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂 谷丙转氨酶、总胆红素由浙江伊利康生物技术有限公司生产(批号070501、070601),草酸钠试剂由北京化学试剂公司生产(分析纯99.97 %,分子量134.01,批号040803),肝素钠由齐鲁制药有限公司生产(批号060116)。
1.1.2 仪器 日立7060型全自动生化分析仪。
1.1.3 血清标本 医院门诊及住院病人154例患者血浆标本,平均年龄42.5岁,男76例,女78例,平均年龄39.5岁。
1.2 方法 采取病人静脉血,分为采用草酸钠、肝素钠两种抗凝剂处理和不使用抗凝剂处理3个组,草酸钠抗凝浓度为0.1 mol/L,肝素钠为125 IU/mL。静脉血经离心后吸取血清或血浆分别进行谷丙转氨酶和总胆红素测定。按试剂说明书设置谷丙转氨酶和总胆红素实验参数。
1.3 统计学处理 应用NOSA统计学软件处理数据,使用草酸钠、肝素钠抗凝剂处理的血液测定结果分别与不使用抗凝剂测定结果进行比较。
2 结果
草酸钠组谷丙转氨酶活力显著低于对照组,肝素钠组总胆红素含量明显高于对照组。见表1、表2。表1 草酸钠抗凝血清谷丙转氨酶测定结果表2 肝素钠抗凝血浆总胆红素测定结果
3 讨论
在临床实验室中,草酸钠常用作抗凝剂,但可以抑制乳酸脱氢酶活性[1],因此,在测定谷丙转氨酶时,可以使谷丙转氨酶试剂中的乳酸脱氢酶活性降低,进而降低指示反应的反应速度,使单位时间内NAD+生成减少,实时反应曲线斜率减小或变平缓,使谷丙转氨酶测定结果偏低,特别是测定高谷丙转氨酶活性标本时,其下降更加明显,造成测定误差。
肝素为含有长短不一的直链阴离子粘多糖,平均分子量为15 000左右,带有大量的负电荷,呈强酸性。重氮法测定总胆红素时,试剂中的十一烷基二甲基溴化铵是季铵盐类有机物,在水中Br一被OH一取代后的有机化合物是季铵碱(强碱),二者在水中相遇后进行复杂的化学反应形成不溶于水的盐类化合物,反应液出现混浊,使试剂的透光度下降、吸光度升高,造成总胆红素的测定值升高[2]。
因此,我们在使用抗凝剂测定肝功能时,一定要注意抗凝剂对测定结果的影响,以免产生严重偏差,给病人造成误诊误治。
参考文献
[1] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].2版.东南大学出版社,1997:214-216.
[2] 张庆岳,王连明,齐桂答,等.肝素对重氮法(含十二烷基二甲基漠化钱)测定总胆红素的影响[J].临床检验杂志,2000,18(3):179-180.