胸腺肽α1对慢性乙型肝炎患者Th1/Th2类细胞因子水平的影响

　　　　 作者：何和章，吴国平，王光余

【摘要】 　　目的：观察胸腺肽α1联合拉米夫定对慢性乙型肝炎(CHB)患者Th1 /Th3类细胞因子表达的影响。方法:将慢性乙型肝炎患者48例，分为治疗组24例和对照组24例，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测两组Th1类细胞因子γ干扰素(IFNγ)和Th3类细胞因子白介素4(IL 4) ， HBVDNA水平并比较治疗前、后变化。结果: 治疗组和对照组在治疗后6个月乏力、纳差、肝区不适等症状、体征均有所改善，但治疗组改善情况优于对照组，总有效率（95.8%，23/24）明显高于对照组（75.0%，18/24）（P＜0.01）。对照组治疗前后各指标差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗组治疗后IL4，HBVDNA水平较治疗前及对照组治疗后明显降低（P＜0.01），IFNγ水平明显升高（P＜0.01）。结论: 胸腺肽α1能明显提高慢性乙型肝炎患者的Th1类细胞因子中IFNγ表达水平， 改善患者Th1 /Th3细胞功能失衡状态， 有利于病毒的清除。

【关键词】 胸腺肽α1；慢性乙型肝炎；Th1/Th3类细胞因子；γ干扰素；白介素4；酶联免疫吸附法

　　［ABSTRACT］ Objective: To observe the effect of Thymic Peptide α1 combine with Lamivudine on levels of Th1/Th3like cytokine in chronic hepatitis type B patients. Methods: A total of 48 cases with chronic hepatitis type B were pided into the treatment group and the control group by half. The levels of Th1like cytokine (IFNγ)， Th3like cytokine (IL4) and HBVDNA were tested by quantitative enzymelinked sandwich immunoassay method. Meanwhile， the changes were compared before and after the treatment. Results: Symptoms and signs in both group changed after treatment in 6 months including lack of power，poor appetite and liver was uncomfortable. But the condition of treatment group was better than control gourp. The total effective rate in treatment group (95.8%，23/24) was higher then control group (75.0%，18/24) （P＜0.01). The indications before and after the treatment in the control group was not significantly different（P＞0.05）.IL4 and HBVDNA level after treated in treatment group were significantly lower than before as well as compared with treated cases in the control group. The level of IFNγ was increased obviously（P＜0.01）. Conclusions: Thymic Peptide α1 can obviously improve the expressed level of IFNγ among Th1like cytokine in chronic hepatitis type B patients. It can improve the unbalance condition between Th1/Th3 cells and benefit for cleaning virus.
　　
　　［KEY WORDS］ Thymic Peptide α1; Chronic hepatitis type B; Th1/Th3like cytokine; IFNγ; IL4; Enzymelinked immunosorbent assay

　　目前研究认为［1］， Th1/Th3 类细胞失衡与乙型肝炎的慢性化有关。HBV抗原特异的Th1细胞占据优势，倾向于发生急性或自限性感染;而Th3细胞占据优势，倾向于发生持续性的HBV感染。有调节机体免疫状态作用，本文研究了胸腺肽α1对慢性乙型肝炎患者Th1/Th3类细胞因子水平的影响，现报道如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 临床资料
　　
　　诊断依据按2000年第10次全国病毒性肝炎学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》［2］。选择慢性乙型肝炎住院患者48例。分为治疗组和对照组，治疗组24例，中度16例，轻度8例；男性20例，女性4例；年龄26～43岁，平均（31.06±10.9）岁。对照组24例，中度15例，轻度9例；男性19例，女性5例，年龄19～45岁，平均（32.7±9.2）岁。排除HAV、HCV、HDV、HEV感染， 并排除近3个月应用糖皮质激素等影响免疫功能药物的病例。两组患者在病情、病程、性别、年龄等方面差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

　　1.2 方法

　　1.2.1 标本的采集与处理

　　在治疗前和疗程结束时无菌采集静脉血5mL，2000r/min离心后收集上清液， 于－20 ℃保存， 待测细胞因子。细胞因子检测：采用酶联免疫吸附法( ELISA)检测血清中IFNγ和IL4水平， 试剂盒购自美国Genzyme公司(深圳晶美公司代理)，操作严格按试剂盒说明书进行。

　　1.2.2 治疗方法

　　两组均用拉米夫定。治疗组在此基础上加用胸腺肽α11.6mg/次，2次/周，皮下注射；连续用药6个月。所有患者均戒酒，避免服用损肝药物等。

　　1.3 观察指标
　　
　　包括临床症状及体征：肝脏B超、ECG等。实验室检查：肝功能、电解质、血、尿常规、乙肝病毒免疫学标志物检测。

　　1.4 疗效判断

　　1.4.1 以谷丙转氨酶（ALT）判断

　　(1)显效: ALT恢复至正常值范围以内; (2)有效: ALT恢复至正常上限值的1.5倍以内; (3)无效:未达到上述改变者。

　　1.4.2 以临床症状及体征判断

　　(1)显效:自觉症状消失，肝肿大、脾肿大稳定或消失; (2)有效:自觉症状消失或好转，肝肿大，脾肿大稳定不变，肝区无明显叩击痛; (3)无效:未达到上述改变者。

　　1.5 统计学处理
　　
　　计量资料以(±s)表示，采用t检验比较，计数资料用χ2 检验比较。检验水准α=0.05。

　　2 结果
　　
　　治疗组和对照组在治疗后6个月乏力、纳差、肝区不适等症状、体征均有所改善，但治疗组改善情况优于对照组，总有效率（95.8%，23/24）明显高于对照组（75.0%，18/24）（P＜0.01）。对照组治疗前后各指标差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗组治疗后IL4，HBVDNA水平较治疗前及对照组治疗后明显降低（P＜0.01），IFNγ水平明显升高（P＜0.01）。表1 两组外周血培养上清PBMC中IL4、IFNγ、HBVDNA水平的比较ng·L-1（略）

　　3 讨论
　　
　　HBV感染过程是由宿主的免疫反应决定的， 而辅助性T细胞(Th细胞) 是机体的一类重要的免疫调节细胞。IFNγ是Th1的特征性细胞因子， 主要介导细胞免疫应答， 活化的Th1优势反应可以强化充分的HBV特异性CTL反应， 足量的CTL反应是宿主清除HBV的前提; IL4是Th3特征性的细胞因子， 主要调节体液免疫反应，并与细胞内病原所致的进展性疾病相关联。HBV感染的慢性化主要是机体细胞免疫功能低下所致， Th1/Th3类细胞的不平衡可以解释这一机制。
　　
　　拉米夫定通过竞争抑制HBVDNA聚合酶及参与新的HBVDNA链合成过程以终止新链合成，从而迅速显著抑制HBVDNA复制，使HBVDNA浓度下降，肝脏炎症减轻，促进肝功能恢复，改善肝组织学，延缓或阻止肝纤维化的发展［3，4］。研究证实拉米夫定疗程以1～1.5年较好，更长的疗程不仅不提高疗效，还可能增加病毒变异、耐药的风险［5，6］。胸腺肽α1是人工合成的由28个氨基酸组成的高纯度的多肽，它通过调节机体免疫状态，提高Th1、降低Th3 细胞活性，促进NK细胞、内源性IFN及IL2的形成和产生，并提高活性，从而抑制HBV复制，同时能增强机体抗感染能力，减轻肝细胞的免疫病理损伤，促进肝细胞功能修复，并在治疗乙型肝炎的疗程结束后病毒清除的效应仍可继续增加，具有疗效持久，使用安全的特点［7，8］。本研究证实，胸腺肽α1联合拉米夫定治疗患者临床症状消失快，总有效率提高。IL4与HBVDNA水平均明显下降，IFNγ水平明显上升。
　　
　　综上所述，慢性乙型肝炎患者存在Th1/Th3平衡失调，而胸腺肽α1既能抑制HBVDNA复制又能调节Th1/Th3细胞因子比例平衡，使免疫反应由Th3型向Th1型逆转。

参考文献

　　1 王俊学，王果俊. 苦参碱及氧化苦参碱的药作用及临床应用研究进展［J］. 肝脏， 2000， 5 (2) ∶116117.

　　2 中华医学会传染病与寄生虫病学分会，肝病学分会. 病毒性肝炎的诊断标准［S］. 西医结合">中西医结合肝病杂志， 2001， 11 (1) :5660.

　　3 姚光弼，王宝恩，崔振宇，等. 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者的长期疗效［J］. 中华肝脏病杂志， 1999， 7 (2)∶8083.

　　4 曾维群，郭树华，张大志，等. 拉米夫定治疗活动性肝炎肝硬化的疗效观察［J］. 中华肝脏病杂志， 2003， 11 (3)∶176178.

　　5 姚光弼，崔振宇，姚集鲁，等. 国产拉米夫定治疗2200 例慢性乙型肝炎的Ⅳ期临床试验［J］. 中华肝脏病杂志， 2003， 11 (2)∶103108.

　　6 贺永文，郭春霞，潘廷凤，等. 拉米夫定的疗程及早期应答与疗效的关系［J］. 中华肝脏病杂志， 2006， 14 (12)∶902905.

　　7 Andreone P， Cursaro C， Gramenzi A， et al. In vitro of thymosin  alphaon Th1 and Th3 cytokinesyn the sisinpatientswith chronic hepatitis C［J］. J Viral Hepat， 2001， 8∶194201.

　　8 赵艳鹃，高歌. 干扰素α  2b与苦参素、胸腺肽α1联合序贯治疗慢性乙型肝炎的实验研究［J］. 临床肝胆病杂志， 2005，21 (6)∶341342.