作者：牟林茂，李安源，司国民，宋 梅，马宏博，王志学，蔡平平
【摘要】 目的 观察不同剂量平肾通络降压颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)血压及肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响。方法 随机将SHR分为模型组、卡托普利对照组和平肾通络降压颗粒高、低剂量组。正常Wistar大鼠为空白对照组。每日同一时间按实验要求分别按1 mL/100 g体重灌药及蒸馏水，连续8周。分别于用药前和用药1、2、4、6、8周测定血压，以及血管紧张素(Ang)Ⅰ、AngⅡ和醛固酮(ALD)。结果 SHR经治疗8周后，平肾通络降压颗粒高剂量组血压较治疗前明显下降，差异有统计学意义(P＜0.01)。卡托普利组降压作用起效更快，但至第8周时2组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，血浆AngⅡ、ALD含量下降，以ALD下降明显(P＜0.01)。显示平肾通络降压颗粒可降低SHR的血压，抑制RAS活性。结论 平肾通络降压颗粒有稳定缓和的降压作用，能逆转高血压病早期肾损害。
【关键词】 平肾通络降压颗粒；高血压病；早期肾损害；大鼠
Key words：Pingshen Tongluo Jiangya granula；hypertension；early stage of renal damage；rat
高血压病是全球范围内的重大公共卫生问题之一，可导致脑血管、心脏和肾脏等重要脏器的一系列病变，严重危害人类的健康。本研究观察平肾通络降压颗粒对自发性高血压大鼠血压及肾素-血管紧张素系统的影响，以探讨其对防治高血压病早期肾损害的作用机理。
1 实验材料
1.1 药物
平肾通络降压颗粒，深圳市三九现代中药有限公司提供的中药免煎颗粒剂(批号0408011)，为淡棕黄色干粉。本品临床用量为日最大剂量15 g[相当于原药材176 g，以人体75 kg计，约为2.35 g原药材/(kg·d)]。卡托普利片，规格：25 mg/片，青岛黄海制药有限公司生产(批号0405221)。
1.2 动物
自发性高血压大鼠(SHR)32只，雄性10周龄，体重(223.5±23.5)g，收缩压均大于150 mm Hg，购自北京维通利华科研实验动物中心(动物合格证号0055741)。正常雄性Wistar大鼠8只，体重(225.1±21.9)g，购于山东中医药大学实验动物中心(二级实验动物，合格证号20050406)。
1.3 仪器及试剂
CRS-Ⅲ型大鼠电脑血压心率仪，MDF-330型-20 ℃低温冰箱，低温离心机(BHG HERMLE ZK364，德国)，BECKMAN-700全自动生化分析仪，GC-911型γ放射免疫计数器，Teflon匀浆器，血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)试剂盒(北京原子高科核技术应用股份有限公司)。
2 实验方法
2.1 分组及给药
SHR 32只，随机分为模型组、卡托普利对照组和平肾通络降压颗粒低、高剂量组。正常Wistar大鼠8只，为空白对照组。共40只大鼠开始实验观察。平肾通络降压颗粒低、高剂量组每日同一时间分别按1 mL/100 g体重灌服平肾通络降压颗粒[相当于平肾通络降压颗粒13.5 g/(kg·d)和27 g/(kg·d)，用药量约为临床预计用量的10倍和20倍]；卡托普利对照组予卡托普利水溶剂[卡托普利67.4 mg/(kg·d)，为临床用量的10倍]；空白对照组和模型组每日同一时间灌服1 mL/100 g体重蒸馏水。以上各组均自由饮水和普食饲养。
2.2 指标测定
2.2.1 血压测量
用大鼠电脑血压心率仪间接测定大鼠尾动脉收缩压，每日上午测量血压。
2.2.2 指标测定
连续给药8周，末次给药后24 h禁食12 h后，以乌拉坦1 mg/kg腹腔注射麻醉动物，自下腔静脉取血2 mL，注入防凝试管中。4 ℃、3 000 r/min离心10 min，分离血清。采用均相竞争放射免疫分析法直接测定血浆AngⅠ、AngⅡ及ALD含量，严格按照试剂盒说明书操作。待反应结束后，4 ℃、 3 500 r/min离心15 min，吸弃上清液，由γ放射免疫计数器测定各样品沉淀的cpm数，并由γ计数器预先编制的程序，直接给出有关参数、标准曲线和样品浓度。
2.3 统计学方法
使用CS10.31简明统计软件包处理。计量数据采用x±sx±s的形式。组间和组内比较采用t检验。
3 结果
(见表1、表2)表1 各组大鼠给药前后收缩压值比较(略)注：与给药前比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01 表2 各组大鼠血浆RAS和ALD含量测定结果(略)注：与空白对照组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；与模型组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01；与卡托普利组比较，##P&<0.01
4 讨论
中医学理论认为，高血压病早期肾损害的病机为肾气虚衰，肾中阴阳失调，肾络瘀血。《素问·上古天真论》曰：“女子……六七，三阳脉衰于上，面皆焦，发始白；七七，任脉虚，太冲脉衰少，天癸竭，地道不通，故形坏而无子也。丈夫……五八，肾气衰，发堕齿槁；六八，阳气衰于上，面焦，发鬓斑白；七八，肝气衰，筋不能动，天癸竭，精少，肾脏衰，形体皆极……。”说明肾之精气随年龄增长而衰弱的特点。而气虚则血瘀，即王清任“元气既虚，必不能达血管，血管无气，必停留而瘀”的观点。根据高血压病的肾虚为本、血瘀为标的病机特点，确立补益肾气、燮理阴阳、活血通络的治疗原则。平肾通络降压颗粒方中桑寄生、黄芪、黄精、泽泻、酸枣仁、怀牛膝等均有不同程度的降压作用。酸枣仁有镇静作用；丹参、水蛭还具有改善微循环、抗血小板的聚集和血栓形成，使血液粘度下降，对缺血性损害的保护作用。本实验选择10周龄SHR，血压仍然处于自发性升高的阶段，其模型对照组血压随着鼠龄的增加呈现进行性增高，而各用药组均有抑制和降低SHR血压增高的趋势。平肾通络降压颗粒组随用药时间延长效应增强，尤以高剂量组突出(P＜0.01)。早期卡托普利降压作用起效快，但至第8周时，平肾通络降压颗粒高剂量组与卡托普利组降压效果无明显差异(P＞0.05)。显示平肾通络降压颗粒可降低SHR的血压，其降压作用和缓、持久。本实验显示，SHR经平肾通络降压颗粒治疗8周后，可使血浆中的AngⅡ、ALD含量明显下降，尤以ALD下降作用明显。说明平肾通络降压颗粒是通过减少ALD、AngⅡ生成发挥降压作用的，阻止肾脏病理学损害，产生肾保护作用，并且有一定的量效关系。