【摘要】 镁是体内含量最多的阳离子之一。原子式为Mg,原子量为24.31。成人体内含镁0.823~1.234 mol,其中50%存在于骨骼,45%在细胞内液,细胞外液占5%。肝、肾和肌肉含镁较多,在细胞内液镁的含量仅低于钾而居第2位,其浓度约为细胞外液的10倍。在细胞外液,镁的含量仅次于钠、钾、钙而居第四位。
【关键词】 细胞内液 镁 检验
在许多生理化学过程中镁都参与反应并占重要地位。比如是多种酶的激活剂,碱性和酸性磷酸酶、磷酸变位酶、焦磷酸酶、肌酸激酶、己糖激酶、亮氨酸氨基肽酶和羧化酶等,它们的催化作用都需有镁离子的激活;镁也是组成DNA、RNA及核糖体大分子结构所必需的元素;也是维持正常神经功能和肌肉的重要元素。
原子吸收分光光度测定镁,是利用镁在285.2 nm有强烈的发射光谱或吸收线,使其容易分离,特别适宜测定生物体液中镁的浓度,是镁测定的参考方法,受到广泛使用。利用某染料的直接分光光度法,准确度及精密度可达到临床要求,且适宜自动分析,在临床实验室广泛使用。
1 甲基百里香酚蓝比色法
1.1 原理 血清中镁、钙离子在碱性溶液中能与甲基百里香酚蓝染料结合,生成一种蓝色复合物,加入EGTA可掩蔽钙离子的干扰。与同样处理的镁标准液进行比较,求得血清镁含量。
1.2 试剂
1.2.1碱性缓冲液(pH 12.6):称取无水亚硫酸钠2.4 g,叠氮钠0.1 g,甘氨酸0.75 g,EGTA[ethdene geylcol bis(β-amino ethyle ther)-N,N,N′tetraaceticacid,乙二醇-X2(2-氨基乙基醚)-四乙酸]0.095 g于小烧杯中,加1 mol/L氢氧化钠23.5 ml使其溶解后,转入100 ml容量瓶中,加去离子水至刻度。
1.2.2显色剂:精确称取甲基百里香酚蓝(AR)0.036 g和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.60 g于烧杯中,加1 mol/L盐酸溶液10 ml,使其溶解后转入100 ml容量瓶中,加去离子水至刻度,混匀,置棕色瓶中保存。
1.2.3显色应用液(pH 10.3):临用前将上述l液和2液等量混合即可。
1.2.4镁标准液(Mg 0.823 mmol/L、Ca 2.5 mmol/L):精称硫酸镁(MgSO4·7h3O)0.2026 g,用少量去离子水溶解后转入1 L容量瓶中,再精称恒重的碳酸钙(CaCO3,AR)0.25 g于小烧杯中,加去离子水40 ml及1 mol/L盐酸6 ml,慢慢加温至60℃使其溶解,冷却后转入上述容量瓶中,然后加去离子水至刻度,盛入塑料瓶中可长期保存。
1.3 计算 血清镁(mmol/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×0.823
1.4 参考值0.67~1.04 mmol/L(1.64~2.52 mg/d1)
2 Calmagite染液比色法
2.1 原理 血清中镁在碱性条件下与Calmagite染料生成紫红色络合物,颜色的深浅与镁的浓度成正比。溶液中的EGTA可消除钙的干扰,使用表面活性剂可使蛋白胶体稳定,不必去除血清蛋白质而直接测定镁。
2.2 试剂
2.2.1Calmagite染料溶液:称取Calmagite[1-(羟基-4甲基-2-苯-偶氮)-2萘酚4-磺酸]染料(sigma)400 mg,溶于1 000 ml去离子水中。
2.2.2碱性溶液:称取氢氧化钠7 g,EGTA 1.5 g,3-环己胺-1,1丙磺酸(cAPS)79 g,氯化钠990 mg,溶于1 000 ml去离子水中,再加Triton X-100 2 ml,三乙醇胺56 ml,混匀,贮室温中备用。
2.2.3氯化锶溶液:称取氯化锶(AR)1.28 g溶于100 ml去离予水中。
2.2.4显色应用液:临用前将“1”液10份,“2”液10份,“3”液1份加水80份混合,用1 mol/L氢氧化钾溶液调pH为11.5±0.02,置冰箱保存,可用2周。
2.3 操作 取经稀盐酸处理和去离子水清洗的干燥试管3支,标明测定、标准和空白管。
2.4.计算 血清镁(mmol/L):测定管吸光度/标准管吸光度×0.823
2.5.参考值 0.7~1.10 mmol/L。
3 原子吸收分光光度法
3.1 原理 镁的空心阴极灯发射285.2 nm的谱线,通过火焰进入分光系统,照射到光电倍增管上。稀释的血清被吸进空气-乙炔火焰时,镁在高温下离解成镁原子蒸气。部分发射光被蒸气中基态镁原子吸收,光吸收的量与火焰中镁离子的浓度成正比。
3.2 试剂
3.2.1无盐氧化镧稀释液(La3+4.3 g/L):取浓盐酸10 ml加入800 ml去离子水中,再加入准确称取高纯度La2O35g,搅拌,使其溶解后,再以去离子水补足至1 L,贮存于室温。
3.2.2含盐氧化镧稀释液:在上述无盐氧化镧稀释液中加氯化钠164 mL、氯化钾7.5 mg/L,分别含Na+2.8 mmol/L和K+ 0.1 mmol/L。
3.2.3镁标准贮存液(20 mmol/L):精确称取硫酸镁(MgSO4·7h3O)0.493 g溶于去离子水中并稀释至100ml。
3.2.4镁标准液(1 mmol/L):取镁贮存液5ml,用去离子水稀释至100 ml。
3.2.5镁标准校正液(0~0.04 mmol/L):用含盐氧化镧稀释液将1 mmol/L镁标准液稀释成0~0.04 mmoL/L的4种浓度,贮存于聚乙烯瓶中。
3.3 操作
样品处理:取血清0.1ml,加无盐氧化镧稀释液4.9 ml,混匀。 插上电源,打开仪器,开灯及点火后,预温15分钟。吸入含盐氧化镧稀释液校正零点与基线。吸入镁校正标准液,调校读出的数字与浓度一致。吸入已经稀释的血清标本,读出镁浓度。
3.4 参考值
成人:0.6~1.1 mmol/L。儿童:0.5~0.9 mmol/L。
4 临床意义
4.1 血清镁增高
4.1.1肾脏疾病:凡影响肾小球滤过率者均可使血清镁潴留而增高。如慢性肾炎少尿期、尿毒症、急性或慢性肾衰竭等。
4.1.2内分泌疾病:如甲状腺功能减退症(黏液性水肿)、甲状旁腺功能减退症、阿狄森病、未治疗的糖尿病昏迷(治疗后迅速下降)。
4.1.3治疗措施不当:凡用镁制剂治疗不当引起中毒者。
4.1.4其他疾病:多发性骨髓瘤、严重脱水症、关节炎、急性病毒性肝炎、阿米巴肝脓肿、草酸中毒等。
4.2 血清镁降低
4.2.1消化道丢失:长期禁食、吸收不良或长期丢失胃肠液者。如慢性腹泻、吸收不良综合征、手术后的肠道瘘管或胆道瘘管、长期吸引胃液后,乙醇中毒严重呕吐者等。
4.2.2内分泌疾病:甲状腺功能亢进症、甲状旁腺功能亢进症、糖尿病酸中毒纠正后、原发性醛固酮增多症以及长期使用皮质激素治疗后,均使尿镁排泄增加。
4.2.3治疗措施不当:用汞撒利或氯噻嗪等利尿剂治疗者,未及时补充镁。长期静脉滴注无镁补液。
4.2.4其他疾病:急性胰腺炎在胰腺周围可形成镁皂;晚期肝硬化,可继发醛固酮增多症;加之腹腔积液利尿;低白蛋白血症能使镁结合量减少;急性心肌梗死、急性乙醇中毒以及新生儿肝炎、婴儿肠切除后等。
4.3 尿镁排泄增多 见于各种原因的多尿,包括长期服用利尿剂、肾小管性酸中毒、原发性醛固酮增多症、皮质醇增多症、糖尿病治疗后期、甲状旁腺功能亢进症、皮质激素治疗及肿瘤骨转移等。
4.4 尿镁排泄减少 见于长期禁食、厌食、吸收不良者,甲状旁腺功能减退、肾上腺皮质功能减退时,也可减少。
参 考 文 献
[1]朱剑功,杨喜民.红细胞与血浆中镁浓度检测的比较及在脑外伤的意义.实用医技杂志.2005年第17期.
[2]杨喜民,李拴德.等红细胞内与血浆中镁浓度检测在脑外伤中的临床意义《中国检验医学与临床》 2002年第3卷第3期,123-123页.
[3]刘慧,王晴威,王泉云.术前输注含镁极化液对术中血清和红细胞内电解质的影响中国胸心血管外科临床杂志.2000 年7卷03期.
关于镁的检测方法及临床意义
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