关于COX-2在外阴皮肤鳞状细胞癌及外阴上皮内瘤变中的表达及临床意义

（论文网） 【摘要】 目的 探讨COX-2在外阴鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化SP法，检测30例外阴鳞状细胞癌(VSCC)、25例外阴上皮内瘤变(VIN)、20例癌旁营养不良(VD)、15例尖锐湿疣(VCA)和5例外阴正常表皮中COX-2的表达。结果 COX-2阳性表达及阳性细胞率显著高于VINⅢ和VCA(P &<0.05)，与癌旁增生型VD差别不显著。VINⅠ～Ⅱ、正常外阴表皮、癌旁硬化苔藓型VD无表达。COX-2表达与 VSCC组织分型有关(P&<0.05)，更强表达于高分化型中(P&<0.05)。结论 ILK的表达水平与肿瘤发生、发展关系密切，高表达的COX-2预示着VSCC的高度恶性、高侵袭性、高转移性和预后不良。
【关键词】 外阴肿瘤 COX-2 免疫组化
　　环氧合酶（cyclooxygenase，COX）也叫前列腺素内过氧化物合酶（PGH合酶）。是从膜衍生的花生四烯酸转化为PGh3的限速酶。外阴上皮内瘤变(vulvarintraepithelialneoplasia，VIN)是一组外阴癌前病变，既往称外阴上皮非典型增生。目前将轻、中、重度不典型增生分为 VINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级。本研究目的是检测ILK在外阴上皮内瘤变(VIN)和外阴鳞状细胞癌(简称鳞癌，VSCC)中的表达情况，探讨COX-2与外阴癌变的关系。
　　1 材料和方法
　　1.1 材料与试剂 选取1996-2010年在本院就诊的外阴病变患者的石蜡标本，VIN30例、VSCC30例;正常外阴皮肤10例。组织经4%甲醛固定，石蜡包埋，4μm连续切片。浓缩型兔抗人COX-2多克隆抗体，购自武汉博士德公司，链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP法)免疫组织化学超敏试剂盒、DAB显色剂均购于福州迈新公司。按试剂盒内说明进行染色，用已知的阳性切片作为阳性对照，以PBS替代一抗作为阴性对照。
　　1.2 方法 免疫组化SP法按试剂盒说明书进行操作。结果判定：COX-2免疫阳性染色为细胞质出现清晰的棕黄色颗粒，光镜下每张切片随机选取5个高倍视野，每个视野计数200个细胞，按阳性细胞占同类计数细胞的百分比，将染色结果分为四级。ILK阳性细胞数分级:阳性细胞百分率≤5%为阴性(-)，阳性细胞百分率6%～50%为弱阳性(+)，阳性细胞百分率51%～80%为阳性(6)，阳性细胞百分率≥80%为强阳性(7)。
　　1.3 统计学方法 应用SPSS11.5统计软件包，组间比较采用x2检验，检验水准α=0.05。
　　2 结果
　　2.1 COX-2在VSCC及VIN中的表达 COX-2表达阳性率见表1。COX-2表达于胞质染色均呈棕黄色。
　　表1 COX-2在VSCC及VIN中的表达(n)
　　 　　 2.2 COX-2表达与VSCC临床分期及组织病理特征的关系 COX-2表达的缺失率在高、中分化VSCC与低分化VSCC间差异有统计学意义;Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期间差异亦有统计学意义;有淋巴结转移与无淋巴结转移间差异有统计学意义(P&<0.05)。(表2)。
　　表2 COX-2与外阴癌临床分期及组织病理特征的关系(n)
　　
　　3 讨论
　　COX-2蛋白是由604个氨基酸组成，是含有17个氨基酸残基的信号肽，它是一种膜整合蛋白[1]。在多数组织、细胞因子、内毒素、白介素、肿瘤诱导剂等均能刺激COX-2产生，缺血缺氧也能刺激COX-2的表达，COX-2的高表达参与多种病理生理过程，包括炎症、损伤、修复及肿瘤的生长和转移，在肿瘤组织中，主要表达胃癌、乳腺癌、宫颈癌、口腔癌、肾癌、膀胱癌还有皮肤鳞状细胞中[2-3]。
　　COX-2是诱导型酶，在静息细胞内检测不到，只有当细胞接受相应刺激后才开始合成。COX-2在正常成人组织中，表达于神经元细胞、胎盘和肾中，我们在正常外阴皮肤的研究中未检出其表达，说明可能与细胞处于静止状态有关。
　　本研究发现从外阴的不典型增生到癌变，细胞的恶性程度增加，COX-2阳性率增加，说明COX-2参与了外阴癌变过程。本研究发现COX-2表达率在高、中分化VSCC中与低分化相比差异有统计学意义(P&<0.05);在临床Ⅲ～Ⅳ期与Ⅰ～Ⅱ期相比差异亦有统计学意义(P&<0.05);有淋巴结转移与无淋巴结转移比较，差异仍有统计学意义(P&<0.05)。提示COX-2可能参与了VSCC的发生、发展和转移的全过程，COX-2的表达可能与肿瘤细胞的分化程度有关。因此COX-2作为胞外基质信号向胞内传递中的一个重要效应物，在VSCC细胞的粘附、生存、分化、侵袭和转移中起到了关键作用。高表达的COX-2预示着VSCC的高度恶性、高侵袭性、高转移性和预后不良。
　　许多研究表明COX-2表达水平与肿瘤组织中微血管密度和VEGF的mRNA含量呈正相关，表明COX-2表达与肿瘤血管形成密切相关[4]。COX-2主要通过VEGF、MMP、iNOS和HIF-1α等因子促进肿瘤血管的生成。由此表明，COX-2在外阴上皮内瘤样病变中有促进真皮内血管形成的作用，在外阴鳞状细胞癌中，COX-2促进其血管生成并增加其侵袭和转移的活性。
参 考 文 献
[1]Menczer J， Schreiber L， Sukmanov O， et al.COX-2 expression in nonepithelial ovarian malignancies[J].Int J Gynecol Pathol， 2011，30(1):41-45.
[2]Legan M.Cyclooxygenase-2， p53 and glucose transporter-1 as predictors of malignancy in the development of gallbladder carcinomas[J].Bosn J Basic Med Sci， 2010，10(3):192-196.
[3]Abrahao AC， Castilho RM， Squarize CH，et al.A role for COX-2 derived PGE2 and PGE2-receptor subtypes in head and neck squamous carcinoma cell proliferation[J].Oral Oncol， 2010，46(12):880-887.
[4]Kim TJ，Lee YS，Kang JH，et al.Prognostic significance of expression of VEGF and Cox-2 in nasopharyngeal carcinoma and its association with expression of C-erbB2 and EGFR[J].J Surg Oncol，2011，103(1):46-52.