HPLC测定丹七片中人参皂苷Rg1的含量

【摘要】 目的］建立丹七片含量测定的方法。［方法］采用HPLC法，流动相：甲醇：水（48：52），色谱柱：DiamonsiLTM C18(250mm×4.6mm，5um)，检测波长：280nm。［结果］人参皂苷Rg1的线性范围为4.8μg～24.0μg r=0.9996 ，平均回收率为99.80%， RSD为1.46%。［结论］该方法可用于控制丹七片的质量。

【关键词】 HPLC；丹七片；人参皂苷；含量测定

　　 ［Objective］ To establish a HPLC method or the determination of ginsenside Rg1 in Danqi tablet. ［Method］HPLC conditions were as fellows: DiamonsiLTM C18 colum，a mobile phase of MeOH:h3O(48∶52)，and the wavelength at 280nm.［Results］There was a good linearity within the rang of 4.8ug～24.0ug of ginsenside Rg1.The average recover was 99.80% and RSD was 1.46%.［Conclusion］ This method can be used for the quality control of Danqi tablet.Key words:HPLC；Danqi tablet；ginsenside Rg1；determination

　　丹七片由丹参、三七两味中药制成，具有活血化淤的功效，广泛用于血淤气滞，心胸痹痛等症。其现行标准收载于卫生部药品标准中药成分制剂第一册，但只有显微及理化鉴别［1］，为提高检测手段，更有效地控制产品的内在质量，本文采用HPLC法对三七进行了含量测定。实验取得了满意的效果。

　　1 仪器与试药

　　waters型高效液相色谱仪。HS色谱数据工作站（杭州英谱科技开发有限公司）。人参皂苷Rg1对照品（中国药品生物制品检定所，批号110703200323），丹七片（广州白云山制药厂050125 050713 051223），所用试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件［2］

　　流动相：甲醇∶水（48∶52），色谱柱：DiamonsiLTM C18(250mm×4.6mm，5μm)，流速：1.0ml/min，波长：280nm，进样量:20μl。

　　2.2 线性关系考察

　　称取人参皂苷Rg1对照品60.0mg，置25ml容量瓶中。加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密吸取上述贮备液1.0ml， 2.0ml， 3.0ml， 4.0ml， 5.0ml分别置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别取样20ul，以峰面积为纵坐标，以对照品的量(μg)为横坐标，绘制标准曲线。其回归方程为Y=3.995×106X＋1.318×107 r=0.9996表明人参皂苷Rg1在4.8μg～24.0μg之间有良好的线性关系。

　　2.3 干扰试验

　　（1）供试品制备。取本品10片，精密称定，研细，取3g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，超声处理30min，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液。精密量取滤液25ml，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚30ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用饱和的正丁醇提取3次，30ml，25ml，20ml，合并正丁醇液，先用氨试液40ml洗涤，再以少量正丁醇饱和的水洗涤，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解并移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取4.0ml，加甲醇至25ml摇匀，即得。（2）空白溶液的制备。按处方称取除去三七药材的其它药材，制备空白样品，然后按供试品溶液的配制的方法提取，并按上述色谱条件测定。结果在人参皂苷Rg1出峰位置上 未见其它杂质峰的干扰。说明按本文的实验条件测定，缺样空白无干扰。

　　2.4 回收率试验

　　取样品约1.5 g，精密称定，共6份（1.4910g，1.5013g，1.4992g，1.5008g，1.4907g，1.4984g）置50ml容量瓶中，分别精密加入2.0mg/ml的人参皂苷Rg1对照品溶液16.0ml、20.0ml、24.0ml。按“供试品制备”项下操作，吸取溶液20μl注入高效液相色谱仪，按外标法以峰面积计算。结果见表1。表1 加样回收试验（略）

　　2.5 稳定性考察

　　精密吸取供试品溶液20μl，隔2h进样1次，共进样6次，测得人参皂苷Rg1峰面积。计算RSD为1.14%，证明人参皂苷Rg1在10h内稳定。

　　2.６ 精密度试验

　　(1)重复性试验:取样品，精密称定，按2.1项下的色谱条件及2.3项下的样品处理方法，在相同条件下测定同一批号样品6份，计算含量，其RSD为1.25%，说明其重复性好。(2)中间精密度试验:不同分析人员，按2.1项下的色谱条件及2.3项下的样品处理方法，测定同一批号的样品4份计算含量，其RSD为1.02%。说明其中间精密度好。(3)样品测定:依3.2.1项下方法制备供试品溶液。另取人参皂苷Rg1对照品加甲醇制成1ml含0.48mg的溶液。按2.1项下色谱条件，分别吸取供试品溶液和对照品溶液20μl注入色谱仪，记录峰面积。按外标峰面积计算人参皂苷Rg1的含量。结果见表2。表2 丹七片中人参皂苷Rg1的含量（略）

　　3 结论

　　采取本法测定丹七片中人参皂苷Rg1的含量，方法简便，准确，重现性好。为丹七片的质量控制提供了分析方法。

参考文献