肺腺癌组织中Wnt-1基因表达及临床意义探讨

作者：程万宏 王艳俊 隗玉川

【摘要】 目的 研究Wnt-1基因在肺腺癌组织中的表达其临床意义。 方法 应用RT-PCR检测48例肺腺癌组织中Wnt-1基因表达；应用cox模型分析基因表达与预后的关系。 结果 ①肺腺癌组织中Wnt-1基因表达率为39.6%，生存时间≥3年组其表达率(29.0%)明显低于生存时间＜3年组(58.8%)，P＜0.05；②多因素Cox回归分析显示TNM分期和Wnt-1基因mRNA高表达反映肺腺癌预后情况，风险度分别为2.015和1.313。 结论 Wnt-1基因表达与生存时间呈负相关。TNM分期和Wnt-1基因mRNA高表达是肺腺癌独立的预后指标。
【关键词】 肺腺癌 Wnt-1 预后
　　胚胎发育和肿瘤形成是两个不同过程，但在细胞增殖、分化和信号传导等方面，两者却有着紧密的联系。癌基因Wnt-1属于发育调控基因，与多种肿瘤的侵袭和转移关系密切[1，2]。为此，作者应用RT-PCR检测了Wnt-1基因mRNA在肺腺癌组织中的表达，探讨mRNA表达与肺腺癌生物学行为和预后的关系。
　　材料与方法
　　1．临床资料：48例肺腺癌为大连大学新华医院胸外科1998年1月至2000年9月收治，术前未经放、化疗，术后经病理证实，临床和随访资料完整的病例。其中，男28例，女20例，年龄35～76岁，平均57.7岁；术后生存时间≥3年者31例，＜3年者17例；PTNM分期（国际抗癌联盟，UICC1997）：Ⅰ期17例，Ⅱ期13例，Ⅲ期18例；肿瘤分级：高分化22例，低分化26例；淋巴结转移：阳性25例，阴性23例。
　　2．主要试剂：Wnt-1引物(a：5’-TACCTCCAGTCACACT CCCC-3’；b：5’-CCATGGCAGGAGAATAGGAA-3’，348bp)，β-actin引物318bp，由大连宝生物公司合成。
　　3． PCR扩增反应条件为：94℃预变性2min，94℃40s，57℃40s，72℃1min，30个循环后，72℃延伸10min。
　　4．统计学分析：采用SPSS 11.5统计软件包进行统计学分析。n≥40采用卡方检验，n＜40采用Fisher精确概率法进行单因素分析； Cox比例危险度模型作为多因素预后分析。 　　结果
　　1．48例肺腺癌中Wnt-1mRNA表达率为39.6%(19/48)；Wnt-1基因表达与生存时间缩短关系密切，生存时间≥3年组Wnt-1mRNA表达率(29.0%)明显低于生存时间＜3年组(58.8%)，P＜0.05。
　　2．Cox比例风险度模型多因素分析：对患者年龄、性别、吸烟与否、淋巴结转移、TNM分期、Wnt-1等指标进行多因素Cox回归分析，最终有TNM分期和Wnt-1 mRNA高表达两种因素与肺腺癌预后密切相关，且有独立的预后意义。其中，TNM分期反映不良预后的危险性最大，风险度exp(β)为2.015，Wnt-1 mRNA的exp(β)为1.313。
　　讨论　　　　　　
　　目前，关于Wnt基因与肺癌关系的研究多数集中于Wnt信号系统成员E-cadherin、β-catenin、APC和Axin等，而Wnt基因本身表达异常与肺癌临床因素间的相关性研究则少见报道。李钫等检测了63例NSCLC中Wnt-1蛋白的表达情况，结果肺腺癌中的表达率为36.0%，并认为Wnt-1表达与NSCLC的发生和病理分级有关[3]。本实验中48例肺腺癌Wnt-1mRNA表达率为39.6%；两实验中Wnt-1在肺腺癌的表达率相近。而本实验中Wnt-1基因表达与生存时间呈负相关，生存时间≥3年组Wnt-1mRNA表达率(29.0%)明显低于生存时间＜3年组(58.8%)。
　　应用多因素Cox回归进行分析，最终有TNM分期和Wnt-1mRNA表达两种因素与肺腺癌预后密切相关，且有独立的预后意义。分析表明TNM分期及Wnt-1基因mRNA不同表达水平与肺腺癌患者的预后显著相关，其风险度分别为2.015和1.313。TNM临床分期的风险度明显要高，说明了TNM临床分期的正确性和重要性。因此，在肺腺癌预后评价中还应以传统的指标为基础，坚持对TNM临床分期高的患者进行综合治疗，以提高其近、远期生存率。而对肺腺癌患者进行TNM临床分期同时，辅助性检测Wnt-1基因mRNA以及其它一些肿瘤转移和预后相关指标，则有可能筛选出预后不良的患者，使这些患者能够得到及时合理的综合治疗，从而延长生存时间，提高生存质量。