关于HLAＢ２７对强直性脊柱炎的临床应用

论文代写网： 　　　　　　　　 作者：郑静 陈佳荣 李彩玉 韩兆东 周玉明

【关键词】 HLAＢ２７；强直性脊柱炎；流式细胞仪

　　１ 材料与方法
　　１．１ 标本来源 全部为本院门诊健康体检者、疼痛门诊、中医科门诊、骨科门诊和住院病例。健康体检者20例均为汉族，其中男性14例，女性6例，年龄16～４６岁，平均31岁；腰痛患者47例，其中男性27例，女性20例，年龄23～７６岁，平均49.5岁；临床诊断AS 42例，年龄17～７９岁，平均48岁。
　　１．２ 试剂与仪器 FITC／ＰＥ标记的HLAＢ２７ＦＩＴＣ／ＨＬＡＢ７ＰＥ单克隆抗体(PN IM 1502)，免疫阴性对照抗体IgG2aＦＩＴＣ／ＩgG1ＰＥ（ＰＮ　ＩＭ　１２５５），鞘液，流式细胞仪，以上试剂及仪器均购自美国BeckmenＣoulter公司。
　　1.3 方法
　　1.3．１ 标本采集：取清晨空腹静脉血2 ml，EDTA 2K抗凝，室温保存，6 h内测定：混匀标本，用可调移液器将10 μl抗体加入不同试管，再加40 μl抗凝全血，充分混匀，避光室温孵育15 min；溶血后500 r/min离心10 min，弃上清，每管加入1 ml PBS，混匀，待测。
　　1.3．2 流式细胞仪的检测：光源488 nm的氩离子激光，FITC受激发后发出绿色荧光，PE发出红色荧光。上机前先用标准微球(Flow Check)进行光路和流路的校正，使变异系数在2%以内。根据细胞的FCS(前向角散射)和SSC(侧向角散射)特点设置淋巴细胞门，然后分析HLAＢ２７和HLAＢ７表达，在PMT2／ＰＭＴ３点图中记数HLAＢ２７＋／ＨＬＡＢ７细胞。标本上机后计数5000个淋巴细胞，荧光强度以对数放大，光散射数据存盘。
　　2 结果
　　2．１ HLAＢ２７检测结果 HLAＢ２７含量：以HLAＢ２７阳性细胞百分率表示。健康者中HLAＢ２７阳性率分别为1%，腰痛患者中HLAB27阳性率分别为14.89%，AS患者中HLAＢ２７阳性者39例，占92.86%。HLAＢ２７和HLAＢ７均阳性者共检出6例，包括AS患者1例，腰痛患者中3例。
　　２．２ 流式细胞仪检测图见图1。HLAＢ２７检测的淋巴细胞设门(图1)，阴性对照细胞标记抗原为IgG2aＦＩＴＣ／ＩgG1ＰＥ(图2)，阴性结果几乎所有淋巴细胞均在阴性区(图3)，阳性结果几乎所有淋巴细胞均在阳性区(图4)。 　　3 讨论
　　有关强直性脊柱炎的发病机制及HLAＢ27与强直性脊柱炎的关系，至今仍不十分清楚，目前认为病因为多重因子交互影响。据统计，90%～９５％的患者具有HLAＢ２７抗原(即HLAＢ２7阳性)。所有HLAＢ２７（＋）的人，只有2%～１０％终将发展成强直性脊柱炎；强直性脊柱炎发病与否，与细菌造成的胃肠道或泌尿道感染关系密切；细菌感染，常常使得HLAB27阳性的人发病，或已发病的人恶化；致关节炎抗原学说等［５］。由于HLAＢ２７与强直性脊柱炎之间的强相关性，因此HLAＢ２７检测被列为临床最有价值的诊断强直性脊柱炎工具之一，有助于对强直性脊柱炎的确诊［６］。本实验检测的42例AS患者HLAＢ２７表达率为92.86%，表明HLAＢ２７与AS呈密切相关；在47例腰痛患者中，有7例为阳性，但经过进一步的临床及X线检查，排除了AS的可能；在健康体检者中也发现2例HLAＢ２７阳性，说明尽管HLAＢ27实验具有高度的敏感性和特异性，检测阳性并不能作为AS的确诊指标，也不能作其筛选指标，目前尚不能将其作为早期诊断AS的指标，但如果结合临床症状、体征及X线检查疑似AS时，HLAＢ２７阳性则可明显支持临床诊断。
【参考文献】
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［６］　王雪明，毛伟红．HLAＢ２７对强直性脊椎炎的诊断价值［J］．临床检验杂志，２０００，１８（２）：１１６．