作者：李莉，张苏明，徐振华，王丹
【摘要】 目的 观察抗组胺药苯海拉明对小鼠记忆的影响。方法 将小鼠分为生理盐水组(NS组)和苯海拉明组(ND组)，根据苯海拉明剂量的不同，ND组又分为 ND1(2.0 mg/kg)、ND2(4.0 mg/kg)、ND3(6.0 mg/kg)组，每组10只。利用避暗实验观察小鼠潜伏期(latency)和错误次数(error times)，评估药物对小鼠记忆功能的影响。结果 在避暗实验中，用药后第1 天，与NS组相比，ND1、ND2、ND3组潜伏期缩短(P<0.01)，错误次数增多(P<0.01);与ND1组相比，ND3组潜伏期缩短，错误次数增多，差异有显著性(P<0.05);用药后第2、3天，各组错误次数、潜伏期的差异均无显著性(P>0.05)。结论 苯海拉明能损害小鼠记忆功能，且呈剂量依赖性，记忆损害在停药1 天后迅速消失，提示不会造成持久的记忆障碍。
【关键词】 记忆;苯海拉明;避暗实验
Abstract: Objective To investigate the effects of an antihistamine， diphenhydramine on the memory of mice.Methods The mice were pided into normal saline group (NS group) and diphenhydramine groups (ND groups)， which were subpided into ND1 (2.0 mg/kg)， ND2 (4.0 mg/kg) and ND3 (6.0 mg/kg) groups (n=10 each) according to the doses of diphenhydramine. The latency and error times in the step-through passive avoidance task were recorded to evaluate the effects of diphenhydramine on the memory of mice. Results In the step-through test， on the first day， as compared to NS group， the latency decreased (P<0.01)， and the error times increased (P<0.01) in ND1， ND2 and ND3 groups; as compared to ND1 group the latency decreased and the error times increased in ND3 group， with significant difference (P<0.05). There was no significant difference in the latency and error times between each group on the second day and third day (P>0.05).Conclusion Diphenhydramine can impair the memory function of mice in a dose-dependent manner. The memory impairment disappears quickly within the 1st day of drug withdrawal， implying that diphenhydramine causes no persistent dysfunction in memory.
Key words: memory; diphenhydramine; step-through task
苯海拉明作为一种抗组胺药，是晕车药的主要成分，也常用于治疗手术后药物引起的恶心、呕吐。组胺作为神经系统的调质之一，在许多中枢活动中起着重要的调节作用，如神经内分泌调节、觉醒-睡眠、运动、攻击行为以及学习记忆等[1]。许多研究者发现组胺可以改善某些疾病导致的学习记忆障碍[2-4]。但抗组胺药苯海拉明对记忆功能有何影响，国内外鲜见报道。本实验用避暗法观察苯海拉明对小鼠记忆功能的影响。
1 材料和方法
1.1 实验动物 昆明种小鼠40只，雌雄各半，体重20～25 g，由徐州医学院实验动物中心提供，实验前1天使小鼠熟悉实验室环境，自由摄食饮水，每日上午9:30～12:00进行实验。
1.2 药品和仪器 盐酸苯海拉明(天津金耀氨基酸有限公司，批号：0308271)，用生理盐水(NS)稀释成所需浓度。BA-200型小鼠避暗仪，成都泰盟科技有限公司研制，实验装置分明暗两室，两室之间有一直径为3 cm大小的圆洞，两室底部均铺以铜栅，暗室接电。
1.3 动物分组及处理 按分层随机区组设计，使各组小鼠雌雄比例、平均体重基本相同，将小鼠分为生理盐水组(NS组)和苯海拉明组(ND组)，根据苯海拉明剂量的不同，ND组又分为 ND1(2.0 mg/kg)、ND2(4.0 mg/kg)、ND3(6.0 mg/kg)组，每组10只。训练前10 min，NS组以10 ml/kg生理盐水灌胃，ND组分别以2.0、4.0和6.0 mg/kg的苯海拉明灌胃。
1.4 避暗实验 训练时先将小鼠放入反应箱中适应5 min，然后暗室底部铜栅通以40 V、50 Hz交流电，将小鼠背对洞口放入明室，小鼠进入暗室即受电击。训练时潜伏期大于180 s者弃去不用。用药后第1、2、3天再次将小鼠放入明室，记录第1次进入暗室的时间(潜伏期)和5 min内进入次数(错误次数)。如果5 min时小鼠仍未进入暗室，错误次数记为0次，潜伏期记为300 s。
1.5 统计学处理 错误次数及潜伏期用±s表示，用SPSS 13. 0软件进行数据处理，用单因素方差分析LSD检验，检验水准α= 0. 05。
2 结 果
由表1可以看出，在避暗实验中，用药后第1 天，与NS组相比，ND1、ND2、ND3组潜伏期缩短，错误次数增多(P<0.01);与ND1组相比，ND3组潜伏期缩短，错误次数增多(P<0.05);用药后第2、3天，各组错误次数、潜伏期差异均无显著性。表1 苯海拉明对小鼠记忆的影响与NS组比较：**P<0.01;与ND1组比较：#P<0. 05
3 讨 论
人和动物的内部心理过程是无法直接观察到的，只能根据可观察到的刺激反应来推测脑内发生的过程。因此，对脑内记忆过程的研究只能从人类或动物学习或执行某项任务后间隔一定时间测量它们的操作成绩或反应时间，其中避暗实验是常用的研究动物记忆的实验方法[5]。
本实验结果表明：用药后第1天，与生理盐水组相比，ND1、ND2和ND3组潜伏期缩短(P<0.01)，错误次数增多(P<0.01)，表明苯海拉明可产生顺行性遗忘作用;与ND1组相比，ND3组潜伏期略缩短，错误次数略增多，实验中差异有显著性(P<0.05)，表明苯海拉明对小鼠记忆的损害呈剂量依赖性。用药后第2、3天观察，不论是错误次数还是潜伏期均相似(P>0.05)，表明苯海拉明对小鼠不会造成持久的记忆障碍。
海马在学习记忆过程中突触可塑性的形成起重要作用。以往的研究表明，组胺系统和突触可塑性之间有较为密切的联系。1993年，2个研究小组同时发现在转染NMDA受体的HECK细胞上，组胺能够作用于NMDA受体NRZB亚单位的多胺位点，增强海马NMDA受体介导的突触传递。苯海拉明造成记忆障碍的机制可能和拮抗了组胺受体有关，提示生活中服用苯海拉明会对记忆有一定的影响。
参考文献
[1] Schwartz JC， Arrang JM， Garbarg M， et al. Histaminergic transmission in the mammalian brain [J]. Physiol Rev，1991，71(1):1-51.
[2] Zhang L， Chen Z， Ren K， et al. Effects of clobenpropit on pentylenetetrazole-kindled seizures in rats [J]. Eur J Pharmacol， 2003， 482(1-3):169-175.
[3] Jin CL， Zhuge ZB， Wu DC， et al. Lesion of the tuberomammillary nucleus E2-region attenuates postictal seizure protection in rats [J]. Epilepsy Res， 2007， 73(3):250-258.
[4] Chen Z， Zhao Q， Sugimoto Y， et al. Effects of histamine on MK-801-induced memory deficits in radial maze performance in rats [J]. Brain Res， 1999， 839(l):186-189.
[5] 刘少林，张均田. 学习、记忆实验法[M]//徐叔云，卞如濂，陈修. 药理实验方法学. 3版. 北京：人民卫生出版社，2002：826-834.