作者：樊红彬，王轶男，朱记军，耿德勤
【摘要】 目的 探讨急性脑梗死患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)与一氧化氮(NO)水平的相关性及其与急性脑梗死的关系。方法 分别采用高效液相色谱法和Griess重氮化反应法检测62例急性脑梗死患者(起病24 h内)血浆Hcy及NO水平，分析两者的相关性及其与急性脑梗死的关系。结果 急性脑梗死组血浆Hcy水平明显高于对照组(P<0.01)，而NO水平则明显低于对照组(P<0.01)。急性脑梗死组血浆Hcy水平与NO水平呈负相关(r=-0.904，P<0.01)。结论 在急性脑梗死的早期血浆NO水平降低，其原因可能与急性脑梗死前后的高Hcy水平有关。
【关键词】 脑梗死;同型半胱氨酸;一氧化氮
Abstract: Objective To investigate the correlation between homocystine (Hcy) and nitric oxide (NO) in the blood plasma in patients suffering from acute cerebral infarction as well as their relationship with acute cerebral infarction.Methods 62 patients with acute cerebral infarction (within 24 hours) were enrolled. High performance liquid chromatography (HPLC) and Griess diazotization reaction were employed to determine the levels of Hcy and NO in the plasma and the correlation between Hcy and NO was analyzed. Results The plasma levels of Hcy in acute cerebral infarction group were significantly higher than those in the healthy control group (P<0.01)， whereas the NO levels were significantly lower (P<0.01). The of Hcy level was negatively correlated with the NO level (r=-0.904，P<0.01).Conclusion During the early stage of acute cerebral infarction， the lower level of NO in the blood plasma may be closely associated with the increased level of Hcy before and after acute cerebral infarction.
Key words: cerebral infarction; homocystine; nitric oxide
脑梗死的发生发展是多因素共同作用的结果，本文通过对急性脑梗死患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)及一氧化氮(NO)代谢水平的观察，探讨Hcy与NO在急性脑梗死病理过程中的相关性。
1 资料和方法
1.1 临床资料 研究对象为2007年10月—2008年9月在本院神经内科住院的急性脑梗死患者。共入选患者62例，男39例，女23例，年龄47～75岁，平均年龄(68.72±12.13)岁。入选标准包括急性起病(从起病至抽取血液样本时间不大于24 h)，有明确的局灶性神经系统损害症状、体征，经头颅CT和(或)MRI确诊，所有病例均符合全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准。排除脑出血、心源性脑栓塞、明确的急性感染、有肝肾功能严重损害及发病前3个月使用维生素B6、维生素B12、叶酸的患者。随机选择在本院体检的无心脑血管疾病史和肿瘤、感染、免疫性疾病的老年人为对照组，共51例，男31例，女20例，平均年龄(57.89±11.99)岁。2组在年龄、性别构成上均无显著性差异(P>0.05)。
1.2 检测方法
1.2.1 血浆Hcy的测定 采用高效液相色谱法。于入院次日晨空腹采静脉血7 ml (3 ml用于Hcy检测，4 ml用于NO检测)，参照试剂盒说明书操作。血液标本经EDTA抗凝并于30 min内离心分离血浆，应用高效液相色谱仪对血浆Hcy水平做高效液相分析。色谱图经计算机处理后转化为数据形式。Hcy荧光分析试剂盒购自Sigma公司。
1.2.2 血浆NO产物浓度测定 血液标本经EDTA抗凝，3 000 r/min离心10 min后分离血浆，采用Griess重氮化反应法(Griess试剂系统由江苏碧云天公司提供)，根据所制作的标准曲线，测量NO产物NaNO2的浓度。
1.3 统计学处理 所有数据以均值±标准差表示，采用t检验和直线相关分析，P<0.05认为差异有显著性。
2 结 果
2.1 2组血浆Hcy及NO水平比较 急性脑梗死组血浆Hcy水平明显高于对照组(P<0.01)，而NO水平则明显低于对照组(P<0.01)，见表1。表1 对照组和急性脑梗死组Hcy及NO水平比较与对照组比较：*P<0.01
2.2 急性脑梗死组血浆Hcy与NO水平相关性分析 急性脑梗死组血浆Hcy与NO水平呈明显负相关(r=-0.904，P<0.01)。
3 讨 论
高Hcy是动脉粥样硬化疾病的重要危险因素之一，高Hcy导致动脉粥样硬化可能经历以下几个过程：①内皮功能的损害，该过程可能与氧自由基及NO的参与有关[1];②刺激血管平滑肌细胞的增生，这也是动脉粥样硬化一个非常重要的环节，该过程可能与低密度脂蛋白的氧化有关[2];③加速高血压的发展，促进血液高凝状态的发生，该过程与Hcy直接或间接影响体内凝血系统有关[3]。高Hcy还通过多种机制参与急性脑梗死的病理损害过程，包括直接降低血管的舒张功能及增强氧化应激反应[4]。本研究中，在脑梗死的早期，血浆Hcy的水平明显高于对照组，与既往相关报道结果一致，提示高Hcy与脑动脉粥样硬化及脑梗死存在密切关系。
一般认为，NO在脑梗死发病中的作用具有双重性，在低浓度时，起着扩血管、抑制血小板聚集、抑制细胞浸润和粘附等生理作用，从而保护神经细胞;而高浓度时，则产生神经细胞损伤的病理作用[5]。体内NO含量的变化取决于NOS的活性。NOS分为以下3型：神经元型(nNOS)，主要来源于神经细胞;诱生型(iNOS)，由免疫和炎症刺激诱生;内皮型(eNOS)，来源于内皮细胞。eNOS在脑缺血早期被激活，其合成的时间短、浓度低，iNOS则在缺血中后期，由于炎症细胞的大量浸润，释放出的细胞因子和脂多糖等诱导而激活，激活后可长时间、大量产生NO，从而使其具有神经毒性作用[6]。关于急性脑梗死后NO含量的变化仍有争议，本研究表明，在脑梗死的早期(脑梗死发生24 h内)，血浆NO的含量是明显降低的，其原因可能与iNOS被激活时间较晚有关。
本研究表明，在脑梗死的早期，血浆Hcy与NO的水平呈负相关。其原因可能与下列因素有关：①在脑梗死发生前，由于高Hcy的作用，导致内皮功能损害及内源性抑制剂增多[1]，其结果是生理状态下占主导地位的eNOS活性下降;②在脑梗死早期iNOS的活性还未被明显激活;③虽然在脑梗死的早期，eNOS亦可能被激活而导致其活性有所增高，但不足以抵消高Hcy对eNOS的影响。
脑梗死的发生发展是一个极其复杂的过程，Hcy与NO在其中的作用及其机制还有待更深入的研究，以为脑梗死的防治提供更多思路。
参考文献
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