作者：吕晓武，史正刚，孟陆亮，吴丽萍，王强 张士卿
【摘要】 目的 观察增食灵口服液对幼龄鼠胃排空、血浆胃动素(MOT)、小肠推进的影响。方法 将实验动物随机分为正常对照组、吗丁啉组及增食灵口服液大、中、小剂量组。分别用0.9%NaCl溶液及各组药物灌胃7 d后，采用酚红法测定胃排空率，同时测定血浆MOT水平及小肠碳末推进率。结果 增食灵口服液大、中剂量组的胃排空均显著快于正常对照组(P＜0.05)；除吗丁啉组和增食灵口服液小剂量组外，其余各用药组的血浆MOT含量均显著高于正常对照组(P＜0.05)；增食灵口服液各组碳末推进率均高于正常对照组(P＜0.05或P＜0.01)。结论 增食灵口服液能显著促进胃排空，提高血浆MOT，促进小肠推进，且与剂量大小相关。
【关键词】 增食灵口服液；胃排空；小肠推进；胃动素；动物模型
Abstract：Objective To investigate the influence of Zengshiling oral liquid on gastric emptying， plasma motilin (MOT) and small intestine propulsion of young rat. Methods Experiment animal were pided into five groups randomly：control group， large dose of Zengshiling oral liquid group， normal dose of Zengshiling oral liquid group， small dose of Zengshiling oral liquid group and Motilium group. The rats were gavaged by 0.9% of NaCl and corresponding drug. 7 days later， gastric emptying was assayed by phenol red， plasma MOT levels and carbon powder propelling rate of small intestine were also assayed. Results The rate of gastric emptying of Zengshiling oral liquid groups were significantly higher than control group (P＜0.05). Except the Motilium group and the small dose of Zengshiling oral liquid group， the MOT content in other groups were notably higher than control group (P＜0.05). The carbon powder propelling rate of Zengshiling oral liquid groups were significantly higher than control group (P＜0.05 or P＜0.01). Conclusion Zengshiling oral liquid can obviously promote the rate of gastric emptying， raise the level of plasma MOT， and promote the small intestine propulsion of young rats. Its effect is related to the dosage.
Key words：Zengshiling oral liquid；gastric emptying；small intestine propulsion；plasma motilin；animal model
增食灵口服液由苍术、茯苓、槟榔、鸡内金、胡黄连等药物经提取配制而成，经本院附属医院使用表明，该制剂有明显改善胃肠道功能紊乱、增进食欲、治疗厌食症的作用。为了进一步探讨该药的作用机理，本实验观察了其对幼龄鼠胃排空、血浆胃动素(MOT)水平、小肠推进的影响，现将结果报道如下。
1 实验材料
1.1 药物
增食灵口服液，每毫升含原药材1 g，甘肃中医学院附属医院制剂室提供；吗丁啉，西安杨森制药有限公司生产，批号0503154。以上药物实验时用蒸馏水配制成适宜浓度，冰箱贮存备用。
1.2 动物
Wistar幼龄大鼠，体质量120～160 g，50 只，雌雄各半，甘肃中医学院SPF级动物中心提供，动物合格证号：20050002；昆明种幼龄小鼠，体质量12～16 g，50只，雌雄各半，甘肃中医学院SPF级实验动物中心提供，动物合格证号：2005003。
2 实验方法
2.1 对各组大鼠胃排空率、胃动素水平的影响
参照文献[1]方法，将50只大鼠随机分为5组，即正常对照组、吗丁啉组(1.03 mg/kg)及增食灵口服液大(1.80 g/kg)、中(1.35 g/kg)、小(0.90 g/kg)剂量组，除正常对照组灌服生理盐水外，其他各组灌胃给予受试药物，每日1次，连续7 d。末次给药前禁食不禁水16 h，末次给药后40 min，各组灌服阿托品0.129 mg/kg，10 min后各鼠均准确灌服0.05%酚红溶液1.5 mL/只，30 min后将各鼠摘眼球取血2 mL/只，送检MOT(具体按试剂盒说明书操作)。然后迅速断头处死大鼠并取胃，放于事先准备好的0.1 mol/L NaOH溶液100 mL中，用剪刀剪碎，浸泡24 h，倾取上清液5 mL于试管中，加入20%三氯醋酸0.5 mL，高速离心10 min，吸取1 mL，加入0.5 mol/L NaOH溶液4 mL，混匀，每个样本的酚红浓度用分光光度计于523 nm处测定吸光度(OD)值。胃排空率以标准组为基准，按下列公式计算：胃排空率(%)＝(标准组中各样本平均吸光度－待测样本吸光度)/标准组中各样本平均吸光度。
采用放免法，将眼球采血2 mL置于含30 μL 10%EDTA二钠和30 μL抑肽酶塑料管中混匀，4 ℃、3 500 r/min离心15 min，取血浆250 μL，-20 ℃以下保存待检。为避免血浆中冷凝蛋白对测定的干扰，测定时血浆复融后，4 ℃离心，取上清液按试剂盒要求条件测定。用MOT标准液的样品结合百分率绘制标准曲线，查出相应的样本值。样本管和标准管的检测均采用双管法。
2.2 对各组小鼠炭末推进率的影响
参照文献[1]方法，将50只小鼠随机分为5组，即正常对照组、吗丁啉组(1.03 mg/kg)及增食灵口服液大(9.0 g/kg)、中 (6.0 g/kg)、小(3.0 g/kg)剂量组，除正常对照组灌服生理盐水外，其他各组灌胃给予受试药物，每日1次，连续7 d。末次给受试药物前禁食不禁水16 h，末次给药30 min后用炭末混悬液(阿拉伯胶10%，活性炭5%)10 mL/kg灌胃，20 min后处死小鼠。剖腹取出整个胃肠道，铺直后测量幽门至回盲部全长及幽门至炭末前沿距离，按公式计算炭末推进率。炭末推进率(%)＝幽门至炭末前沿距离(cm)/小肠全长(cm)。
3 统计学方法
采用SPSS统计软件包进行统计处理，多组间均数比较采用方差分析。
4 结果
(见表1、表2)表1 各组大鼠胃排空率及血浆MOT水平比较(略)注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01(下同)表2 各组小鼠炭末推进率比较(略)
5 讨论
厌食症是儿科临床上的一种常见病和多发病，主要以较长期的食欲减退或消失、食量减少为主症，严重者常造成营养不良，影响小儿生长发育和身心健康。小儿厌食，古代文献中无此病名，但相关论述并不少见，多散载于“恶食”、“不思食”、“不嗜食”等章节或医案之中。小儿厌食的发病原因很多，但在诸多病因中，饮食不节、喂养不当或饮食不洁、诸虫感染等，致使脾胃受损、纳化失调是其关键，故临床治疗重在调理脾胃。
增食灵口服液方中用苍术芳香燥湿，茯苓甘淡渗湿，二药相伍，健脾运脾，共为君药；鸡内金消食化积，槟榔下气杀虫，二药配合，理气和胃，是谓臣药；胡黄连清湿热，除疳热，以平胃中郁热，乌梅助槟榔以安蛔，合甘草而化阴，故能生津而护胃，三药相合共为佐使。全方攻守相宜，动静相和，能使中焦调畅，脾健胃和，正合小儿厌食症之病机。现代药理研究表明，苍术、茯苓均含有丰富的多糖，能促进胃液分泌，增加胃肠激素分泌；鸡内金、槟榔能促进消化液分泌，增强胃肠蠕动，诸味合用，可以促进胃肠蠕动以助消化功能[2]。本实验研究表明，该方具有明显促进胃排空和小肠推进的作用。
MOT是由22个氨基酸组成的多肽，分泌MOT的细胞分布在小肠上段，尤以十二指肠为多。一般认为，MOT的主要作用器官是胃，在消化间期对胃排空内容物起主要作用。本研究也表明，增食灵口服液具有促进MOT释放作用，跟胃排空实验类似，大剂量组作用明显，小剂量组虽也有升高MOT趋势，但无统计学意义。本方促胃排空作用在一定程度上可能和促进MOT的释放有关。而人体MOT的释放主要是由毒覃碱机制所调节[3]，刺激迷走神经可使其释放增加[4]，结合文献[5]，提示本方促进MOT的释放可能是通过刺激迷走神经胆碱能通路这一机制而实现的。
参考文献
[1] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海：上海科学技术出版社，1991. 320，248，239.
[2] 董昆山，林秀琴，董一凡.现代临床中药学[M].北京：中国中医药出版社，1998.307.
[3] 林 江，唐静芬，蔡 鑫.枳实消脾丸对大鼠胃排空影响的实验研究[J].中华消化杂志，1999，19(1)：45.
[4] Lee KY， Chang TM， Chen WY. Effect of electrical stimulation of the vaguson plasma motilin concentration in dog[J]. Life Sci， 1981，29：1093.
[5] Fox JE， Danie EE， Jury J， et al. Cholinergic contral mechanisms for immunoreactive motilin release and motility in the canineduodenum[J]. Can J Physiol Pharmacol，1983，61：1042.